强直性脊柱炎HLA-B27基因多态性和骨代谢研究

发布时间：2020-07-30 10:02

【摘要】：背景:强直性脊柱炎(AS)是一种风湿性疾病,多为慢性进展性,常常导致中轴及外周关节损害,青年男性的发病率高于女性;主要临床表现为骶髂关节和脊柱附着点的炎性病变,最终可导致患者关节功能障碍,甚至最终功能丧失,严重的影响患者的生活质量。研究证实AS的发病和患者基因相关,如人类白细胞表面抗原-B27(HLA-B27)基因;HLA-B27在AS患者中具有较高的阳性率,为90%,明显高于健康人群。以中轴及外周关节关节囊、肌腱和韧带的骨附着点为中心的慢性炎症是AS疾病的主要特点,最终造成软骨破坏和骨质侵蚀,并导致组织纤维化及骨化,最终使整个韧带完全骨化。AS具有明显病理性成骨过程,致残的主要原因是病理性成骨导致脊柱和关节的骨化。AS患者在病理性成骨的同时,也会有骨质疏松或者骨质减少的发生,频率为50%~92%。目的:研究江西地区汉族人群AS患者的HLA-B27抗原及等位基因亚型分型和分布,分析该地区AS患者基因亚型的特点,并探讨其与AS疾病的关系。研究与HLA-B27配对的非B27等位基因在AS疾病中分别的特点,并分析其与AS疾病的关系。研究AS患者骨代谢指标水平变化的特点,分析其水平变化与AS疾病的关系。方法:收集的128例AS患者血液标本为2016年1月至2018年6月在南昌大学第二附属医院门诊或住院患者的;在相同时间段内,收集该医院就诊的类风湿关节炎(RA)患者76例、系统性红斑狼疮(SLE)患者62例及体检中心的健康人群(HP)50例的血液标本为对照组。AS患者组和对照组的HLA-B27抗原表达情况,采用流式细胞术(FCM)方法检测。HLA-B27基因检测和亚型分型的鉴定,使用序列特异性引物聚合酶链式反应(PCR-SSP)分析。采用化学发光法检测骨代谢指标[骨钙素(OC)、甲状旁腺素(PTH)、25-羟维生素D(25-(OH)D]、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(TPINP)和β-胶原特殊序列(β-CTX))的水平。结果:1.研究对象共纳入316例,其中AS 128例,对照组188例(RA:76,SLE:62,HP:50)。AS组HLA-B27基因的阳性率高于对照组(93%vs.3.7%,P0.01)。AS组的男性人群比例高于对照组,平均年龄低于RA及HP组。2.FCM法检测HLA-B27抗原在诊断AS疾病时具有一定的临床价值;其特异度和灵敏度分别为94.7%和94.5%,阳性预测值和阴性预测值分别为92.4%和96.2%。PCR-SBT法检测HLA-B27基因诊断AS的特异度和灵敏度分别为96.3%和93.0%;阳性预测值和阴性预测值分别为94.4%和95.3%。3.AS组的HLA-B等位基因检出率以HLA-B27最高,为94.53%;其次为HLA-B40、HLA-B15、HLA-B46和HLA-B51,检出率分别为28.91%、15.63%、14.06%和9.38%。HLA-B27共检测出4种亚型,分别为HLA-B2704、HLA-B2705、HLA-B2707和HLA-B2715。B2704、B2705、B2707和B2715占HLA-B27亚型的构成比分别为87.40%、9.24%、2.52%和0.84%。4.与HLA-B27配对的等位基因中,以HLA-B40等位基因构成比最高,为29.06%;其次为HLA-B15、HLA-B46,构成比分别为13.68%和11.97%。5.AS组的25-(OH)D水平均低于RA、SLE和HP组;PTH水平低于RA和SLE组。AS组的OC和β-CTX水平高于RA、SLE和健康对照组。结论:1.江西地区汉族人群AS患者的HLA-B等位基因以HLA-B27最多见,HLA-B40、HLA-B15、HLA-B46和HLA-B51次之。AS人群中共检测出4种HLA-B27亚型,分别为HLA-B2704、HLA-B2705、HLA-B2707和HLA-B2715,以HLA-B2704为主要基因亚型。2.HLA-B27基因和抗原的检测对AS诊断具有较高临床价值。3.与HLA-B27配对的等位基因中,以HLA-B40等位基因最常见。4.AS患者25-(OH)D和PTH的平均水平低于对照组,OC和β-CTX平均水平高于对照;AS患者存在异常骨代谢和成骨的过程。
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R593.23
【图文】：

流式细胞仪检测,抗原

第 3 章结果表 2. FCM 法检测 HLA-B27 抗原的结果分组总数HLA-B27 抗原阳性 %AS 128 121 94.53RA 76 5 6.58SLE 62 3 4.84HP 50 2 4.00注：因 RA、SLE 和 HP 检测 HLA-B27 抗原阳性人数少，为进行统计学分析，将其组合为对照组后再进行 2检验， 2

测序,基因,卡方检验,总数

第 3 章结果表 3. PCR-SBT 检测 HLA-B27 基因结果分组总数HLA-B27 基因阳性 %AS 128 119 92.97RA 76 3 3.95SLE 62 3 4.84HP 50 1 2.00注：因 RA、SLE 和 HP 检测 HLA-B27 基因阳性人数少，为进行统计学分析，将其组合为非 AS 组后再进行卡方检验， 2值为 224.576，P<0.01。

细胞外,晶体结构,亚型,HLA-B27分子

综述发生主要是和 HLA-B27 的重链相关。HLA-B27 等位基因多态性决定了 HLA-B27分子亚型的多态性，而 HLA-B27 分子之间仅有一个或数个氨基酸差别，B27 亚型的突变机制主要有点突变、基因转变和互惠重组三种机制。由于 HLA-B2705在全世界范围内都有发现，通常把它看作是“祖基因”，而其他亚型被认为是从B2705 进化而来[14]，如 AS 易感基因 B2705 和 AS 保护基因 B2709 在结构上的差别在于 116 位置上的天冬氨酸(Asp)和组氨酸(His)的不同[15]。

【参考文献】