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氟中毒对小鼠精子ATP的影响及生成途径分析

发布时间:2020-12-19 06:38
  [目的]本论文通过研究氟对小鼠精子ATP的影响,以及对其生成途径进行深入的探讨,从而为进一步阐明氟的生殖毒性奠定理论基础,为实施科学诊断提供依据。[方法]8周龄雄性昆明小鼠120只,随机分成4组,每组30只,即对照组、低氟组、中氟组、高氟组,对照组供给蒸馏水,染氟组分别供给含25、50、100mg/LNaF的蒸馏水。染氟期间记录小鼠的饮水及采食量,动态观察小鼠的生长状况及生长性能。染氟90天后取样,同时建立线粒体有氧呼吸与无氧酵解模型检测小鼠精子在不同呼吸途径中所产生的ATP含量及精子活力,随后根据结果显示进行相应的基因分析,最后利用透射电子显微镜观察不同组别小鼠精子的超微结构。[结果]1.与对照组相比,90天氟化钠暴露组小鼠精子活率和活力成下降趋势,中氟组和高氟组差异极显著;同时精子密度有所下降,且中氟组和高氟组差异显著。各染氟组骨氟含量也显著增加。体重增加量在第四周和第五周高氟组(100mg/LNaF)显著上升,然而在第十周,低氟组(25mg/LNaF)显著下降。2.利用全波长多功能酶标仪检测不同模型下精子的ATP产量,结果发现精子所产生的总ATP含量成下降趋势,并且高氟组与中氟组... 

【文章来源】:山西农业大学山西省

【文章页数】:53 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
前言
第一章 氟中毒小鼠模型的建立
    1 材料与方法
        1.1 试验材料
        1.2 试验方法
        1.3 统计方法
    2 试验结果
        2.1 试验小鼠生长发育状况的观察及小鼠日均摄氟量的检测
        2.2 氟化钠对试验小鼠生长性能的影响
        2.3 小鼠骨骼中氟的含量
        2.4 氟化钠对试验小鼠牙齿的影响
    3 讨论
        3.1 试验小鼠生长发育状况及日均摄氟量
        3.2 氟化钠对试验小鼠生长性能的影响
        3.3 试验小鼠骨骼中的氟含量
        3.4 氟化钠对试验小鼠牙齿的影响
        3.5 动物模型的建立
    4. 本章小结
第二章 氟中毒对小鼠精子ATP的影响
    1 材料与方法
        1.1 试验材料
        1.2 试验方法
        1.3 统计方法
    2 实验结果
        2.1 小鼠精液品质的鉴定
        2.2 小鼠精子在不同呼吸模型下ATP的含量
            2.2.1 小鼠精子总ATP的含量
            2.2.2 小鼠精子在线粒体有氧呼吸模型下ATP的含量
            2.2.3 小鼠精子在无氧酵解模型下ATP的含量
        2.3 氟对小鼠精子在不同呼吸模型下的活力的影响
            2.3.1 小鼠精子的活力
            2.3.2 小鼠精子在线粒体有氧呼吸模型下的活力
            2.3.3 小鼠精子在无氧酵解模型下的活力
    3 讨论
        3.1 氟对小鼠精子品质的影响
        3.2 小鼠精子ATP不同生成途径模型的建立
        3.3 氟对不同呼吸模型下小鼠精子ATP产量及活力的影响
    4 本章小结
第三章 氟中毒小鼠精子ATP生成途径分析
    1 材料与方法
        1.1 试验材料
        1.2 试验方法
        1.3 数据统计分析
    2 试验结果
        2.1 氟对小鼠精子有氧呼吸关键分子mRNA表达的影响
            2.1.1 精子总RNA纯度的检测
            2.1.2 建立标准曲线
            2.1.3 试验目的基因与内参基因的RT-PCR扩增动力学曲线和熔解曲线
            2.1.4 目的基因扩增产物的鉴定
            2.1.5 小鼠精子线粒体有氧呼吸关键基因定量分析结果
        2.2 试验雄性小鼠精子超微结构结果
    3 分析与讨论
        3.1 精子总RNA的提取
        3.2 氟对小鼠精子线粒体有氧呼吸关键基因的影响
        3.3 氟化物对小鼠精子超微结构的影响
    4 本章小结
全文结论
参考文献
Abstract
致谢



本文编号:2925448

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