TLR9/KLF4对脂肪细胞NF-κB炎症信号的抑制作用及机制研究
发布时间：2020-12-24 02:44
目的本研究在建立人体肥胖网膜脂肪组织研究队列、构建高脂饮食诱导肥胖大鼠模型以及体外培养脂肪细胞的基础上,观察高水平FFA对脂肪细胞TLR9/KLF4及NF-κB炎症信号通路关键因子表达的影响,探讨TLR9/KLF4在FFA诱发的脂肪细胞炎症反应过程中的作用及可能的机制。方法选取受试个体正常组（Normal Control,NC）50例、肥胖组（Obese,OB）45例,检测一般资料和生化指标。Wistar健康雄性大鼠32只,分别正常饮食和高脂饮食喂养,诱导肥胖模型。高脂饮食喂养至第4、10周检测大鼠血脂、血糖水平。在体外培养3T3-L1前脂肪细胞,诱导分化为成熟的脂肪细胞后用油红O染色鉴定。不同浓度棕榈酸PA（0μM、0.2μM、2μM、20μM、100μM、200μM）刺激脂肪细胞,同时运用si-RNA技术下调TLR9/KLF4、p IRES2-KLF4-Zs Green1上调KLF4、慢病毒感染脂肪细胞上调TLR9。q RT-PCR和Western Blot技术检测动物、人体网膜脂肪组织及脂肪细胞中TLR9、KLF4及NF-κB炎症信号通路关键因子m RNA和蛋白表达水平,Elis...
【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
网膜脂肪组织TLR9、KLF4、炎症关键因子mRNA及蛋白表达水平(A)mRNA表达水平(B)蛋白表达水平(C)灰度扫描结果
图 1 网膜脂肪组织 TLR9、KLF4、炎症关键因子 mRNA 及蛋白表达水平(A) mRNA 表达水平 (B) 蛋白表达水平 (C) 灰度扫描结果t 检验, *P<0.05, **P<0.01 差异有统计学意义Figure 1 The mRNA and protein expression levels of TLR9, KLF4, key factors of omental adipose tissue(A) mRNAexpression level (B) protein expression level (C) gray scale scanning resultst test. *P<0.05, **P<0.01 the difference was statistically significant1.3 TLR9/KLF4 表达水平与血脂水平/炎症信号通路关键因子相关性分析肥胖个体中，TLR9 mRNA 表达水平与 HDL、MYD88、SRC 和 KLF4 显著正相关(P<0.05)；KLF4 mRNA 表达水平与 BMI、TG 和 TNF-α显著负相关(P<0.05) ，而与 NF-κB显著正相关(P<0.05)，见图 2。
图 3 网膜脂肪组织 DNMTs mRNA 表达水平(NC=28, OB=28)(A) DNMT1 (B) DNMT3a (C) DNMT3b 秩和检验,*P<0.05 差异有统计学意义Figure 3 The mRNA expression levels of DNMTs of omental adipose tissue(NC=28, OB=28)(A) DNMT1 (B) DNMT3a (C) DNMT3b rank sum test, *P<0.05 the difference was statistically significant.4.2 BSP 引物序列通过 BSP Primers 软件分析 KLF4 基因启动子区及第一外显子区 CpG 岛，见图 设计引物。引物序列如下：1）启动子区引物，Primer-F1:GGGTTTYGAATTTAGGGAGTPrimer-R1: TCCCTTCCATCRTTACTATAACA2）第一外显子区引物，Primer-F2: GTTTTTYGATTAGAGAGAAYGPrimer-R2: CAAATTAACCRAAATCCTTCTT注：Y 和 R 为简并碱基。
【参考文献】：
期刊论文
[1]代谢性疾病的代谢组学研究进展[J]. 周宁,颜贤忠. 国际药学研究杂志. 2015(05)
[2]脂联素在代谢综合征及心血管疾病中的研究进展[J]. 郭莹莹,边云飞,肖传实. 中国动脉硬化杂志. 2015(05)
[3]新疆维吾尔族、哈萨克族和汉族糖尿病前期人群血清尿酸及代谢综合征分布的横断面研究[J]. 张宏武,蒋升,徐焱成. 中华流行病学杂志. 2013 (10)
[4]代谢组学在代谢性疾病研究中的进展[J]. 赵春艳,阿基业,曹蓓,刘林生,王新文,李梦婕,石建,王广基. 中国临床药理学与治疗学. 2011(04)
[5]新疆维汉哈三民族人群肥胖的流行病学调查研究[J]. 周玲,李南方,洪静,李涛. 中国预防医学杂志. 2011(02)
[6]代谢综合征与心血管疾病的相关研究进展[J]. 温晓妮,尤勇. 心血管病学进展. 2010(04)
[7]DNA甲基转移酶分类、功能及其研究进展[J]. 王志刚,吴建新. 遗传. 2009(09)
[8]心血管疾病中血管平滑肌细胞增殖与药物开发[J]. 马秉亮,吴玉林. 中国临床药理学与治疗学. 2004(08)
博士论文
[1]我国成人超重肥胖流行现状、变化趋势及健康危害研究[D]. 姜勇.中国疾病预防控制中心 2013
本文编号：2934822
【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
网膜脂肪组织TLR9、KLF4、炎症关键因子mRNA及蛋白表达水平(A)mRNA表达水平(B)蛋白表达水平(C)灰度扫描结果
图 1 网膜脂肪组织 TLR9、KLF4、炎症关键因子 mRNA 及蛋白表达水平(A) mRNA 表达水平 (B) 蛋白表达水平 (C) 灰度扫描结果t 检验, *P<0.05, **P<0.01 差异有统计学意义Figure 1 The mRNA and protein expression levels of TLR9, KLF4, key factors of omental adipose tissue(A) mRNAexpression level (B) protein expression level (C) gray scale scanning resultst test. *P<0.05, **P<0.01 the difference was statistically significant1.3 TLR9/KLF4 表达水平与血脂水平/炎症信号通路关键因子相关性分析肥胖个体中，TLR9 mRNA 表达水平与 HDL、MYD88、SRC 和 KLF4 显著正相关(P<0.05)；KLF4 mRNA 表达水平与 BMI、TG 和 TNF-α显著负相关(P<0.05) ，而与 NF-κB显著正相关(P<0.05)，见图 2。
图 3 网膜脂肪组织 DNMTs mRNA 表达水平(NC=28, OB=28)(A) DNMT1 (B) DNMT3a (C) DNMT3b 秩和检验,*P<0.05 差异有统计学意义Figure 3 The mRNA expression levels of DNMTs of omental adipose tissue(NC=28, OB=28)(A) DNMT1 (B) DNMT3a (C) DNMT3b rank sum test, *P<0.05 the difference was statistically significant.4.2 BSP 引物序列通过 BSP Primers 软件分析 KLF4 基因启动子区及第一外显子区 CpG 岛，见图 设计引物。引物序列如下：1）启动子区引物，Primer-F1:GGGTTTYGAATTTAGGGAGTPrimer-R1: TCCCTTCCATCRTTACTATAACA2）第一外显子区引物，Primer-F2: GTTTTTYGATTAGAGAGAAYGPrimer-R2: CAAATTAACCRAAATCCTTCTT注：Y 和 R 为简并碱基。
【参考文献】：
期刊论文
[1]代谢性疾病的代谢组学研究进展[J]. 周宁,颜贤忠. 国际药学研究杂志. 2015(05)
[2]脂联素在代谢综合征及心血管疾病中的研究进展[J]. 郭莹莹,边云飞,肖传实. 中国动脉硬化杂志. 2015(05)
[3]新疆维吾尔族、哈萨克族和汉族糖尿病前期人群血清尿酸及代谢综合征分布的横断面研究[J]. 张宏武,蒋升,徐焱成. 中华流行病学杂志. 2013 (10)
[4]代谢组学在代谢性疾病研究中的进展[J]. 赵春艳,阿基业,曹蓓,刘林生,王新文,李梦婕,石建,王广基. 中国临床药理学与治疗学. 2011(04)
[5]新疆维汉哈三民族人群肥胖的流行病学调查研究[J]. 周玲,李南方,洪静,李涛. 中国预防医学杂志. 2011(02)
[6]代谢综合征与心血管疾病的相关研究进展[J]. 温晓妮,尤勇. 心血管病学进展. 2010(04)
[7]DNA甲基转移酶分类、功能及其研究进展[J]. 王志刚,吴建新. 遗传. 2009(09)
[8]心血管疾病中血管平滑肌细胞增殖与药物开发[J]. 马秉亮,吴玉林. 中国临床药理学与治疗学. 2004(08)
博士论文
[1]我国成人超重肥胖流行现状、变化趋势及健康危害研究[D]. 姜勇.中国疾病预防控制中心 2013
本文编号：2934822
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/nfm/2934822.html
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