mTORC1在Aβ经血脑屏障外排转运和糖尿病认知功能障碍中的作用及机制研究

发布时间：2021-01-09 14:56

　　背景:糖尿病认知功能障碍是糖尿病最常见的慢性并发症之一。Aβ清除障碍是引发脑内Aβ沉积和糖尿病认知功能障碍的启动因素和关键环节。目的:研究mTORC1/SREBP-1/LRP1信号通路在糖尿病引起的脑Aβ外排清除障碍中的作用和机制。方法:我们培养人脑微血管内皮细胞构建血脑屏障的体外模型。将HBMECs暴露于不同葡萄糖浓度环境下检测高糖对脑微血管内皮细胞Aβ40/42外排转运的影响。经高糖处理后（25mM,50mM）,采用qRT-PCR、Western blot、免疫荧光染色等方法检测参与调节Aβ外排转运过程的相关蛋白表达水平。使用抑制剂betulin和rapamycin阻断SREBP-1和mTORC1信号,检测其下游基因的表达以及SREBP-1和mTORC1对Aβ清除的影响。结果:高糖能够损伤血脑屏障对Aβ的外排清除作用,使得HBMECs中LRP1表达下调,SREBP-1表达升高。抑制SREBP-1的表达能有效阻断高糖对LRP1表达的下调作用,并且改善高糖引起的血脑屏障Aβ外排清除受损。高糖促进mTOR、S6K1和4EBP1磷酸化,诱导mTORC1活化,并且抑制mTORC1信号后能够改... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

高糖对HBMECs外排转运Aβ40/42的影响

33图 2.高糖对 Aβ转运受体 LRP1 表达水平的影响。图 A.B.在高糖作用下(50mM)LRP1 表达量随着时间变化的 Western blot 结果；图C.D.高糖组(25mM,50mM)和对照组LRP1的Western blot结果;图E.高糖组和对照组LRP1的qRT-PCR结果(n=6, *: 与对照组相比，P<0.05；#: 与葡萄糖浓度25mM组相比，P<0.05)。

35 3.高糖下 Aβ降解酶(IDE 和 NEP) 及 P-gp 的表达水平 A.不同葡萄糖浓度下(25mM，50mM) IDE，NEP 和 P-gp 的 Western blot 结果； B.不同葡萄糖浓度下 IDE 蛋白含量的灰度分析结果以及 mRNA 表达水平；图.不同葡萄糖浓度 NEP 蛋白含量的灰度分析结果以及 mRNA 表达水平;图 D.不葡萄糖浓度下 P-gp 蛋白含量的灰度分析结果以及 mRNA 表达水平(n=4; *: 与照组相比，P<0.05；#: 与葡萄糖浓度 25mM 组相比，P<0.05)。


本文编号：2966870