17β-E2通过GPER/PI3K/AKT通路调节小鼠M3T3成骨细胞线粒体自噬的研究

发布时间：2021-01-18 02:10

　　目的:骨质疏松作为最常见的骨疾病,在全球范围内有已有成千上百万的患者,消耗了大量的医疗资源及严重影响了患者生活质量。骨质疏松的进展受多种因素影响,最重要的因素是随年龄雌激素下降引起的骨流失,既往研究表明雌激素可以与其组织特定受体（ER）-α和（ER）–β结合阻止骨的重吸收,增加破骨细胞凋亡。然而,骨质疏松及成骨细胞寿命缩短与雌激素缺乏间的机制仍不明确。这篇文章主要研究线粒体自噬,线粒体通过多种作用调节线粒体稳态。在此项研究中,我们旨在研究雌激素通过GPER/PI3K/AKT通路引起小鼠成骨细胞M3T3细胞线粒体自噬继而阐明其分子机制。方法:体外培养小鼠成骨细胞M3T3,应用实时定量PCR检测小鼠成骨细胞GPER mRNA的表达情况。Western-blot技术检测小鼠成骨细胞GPER蛋白磷酸化水平。分别加入浓度梯度17β-E2和/或GPER特异性抑制剂G15和/或PI3K特异性拮抗剂（LY294002）进行干预,Western-blot技术检测细胞GPER蛋白表达及AKT总蛋白及磷酸化蛋白水平和线粒体自噬相关蛋白（Hsp60、TOM20、LC3-II）活性变化,同时通过免疫荧光印证了线... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

A17β-E2对M3T3细胞GPER的mRNA表达水平的影响

B17β-E2对M3T3细胞的GPER的活性表达的影响

图 3.1C GPER 在 M3T3 细胞中的表达及定位 诱发 M3T3 细胞线粒体自噬度 17β-E2(0, 10-7, 10-8和 10-9M）刺激成骨细胞 24h噬相关蛋白 LC3、Hsp60 和 Tom20 的活性，并进行.2A、3.2B、3.2C)：与其他对照组相比，10-7M 组20、LC3 自噬蛋白的活性，当给予 PI3K 抑制剂 LY时给予以上两种抑制剂后，均会降低成骨细胞中线60、TOM20）的活性，结果有统计学意义（P＜0.0


本文编号：2984057