人脐带间充质干细胞治疗卵巢早衰的实验研究
发布时间：2021-01-19 03:20
背景卵巢早衰（premature ovarian failure,POF）是指女性40岁前以闭经、不育、雌激素缺乏及促性腺激素水平升高为特征的一种疾病[1]。化疗是目前治疗恶性肿瘤的有效手段,但化疗药会对患者卵巢造成不同程度的损伤,甚至有部分患者发展成为POF[2]。环磷酰胺（Cyclophosphamide,CTX）,是化疗常用的烷化剂,研究CTX造成的POF治疗方案具有十分重要的意义。目前治疗POF的方案均不能从根本上起到修复卵巢的作用,近些年间充质干细胞治疗POF成为研究热点,人脐带间充质干细胞（Human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUMSCs）来至废弃的脐带,资源丰富获取便捷,属于免疫缺陷细胞,具有多向分化潜能成为干细胞治疗POF的重点研究对象[3]。我们将hUMSCs从脐带中分离出来,期望探究出一种可修复卵巢,从根本上解决POF的治疗方案。目的（1）采用组织贴壁法分离hUMSCs,对其进行鉴定并观察其生物学特性。（2）观察hUMSCs成脂、成骨、成软骨分化能力。（3）评价CTX造POF动物模型方案是否成功。（4）探究hUMS...
【文章来源】：广东药科大学广东省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
P0代细胞形态（×100）
图 1.1：P0 代细胞形态（×100） 图 1.2：P1 代细胞形态（×100） 图 1.3：P5 代细胞形态（×100）2.4.2 hUMSCs 表面抗原鉴定流式细胞仪检测结果如图 2 所示，CD73、CD90、CD105 表达阳性，CD19、CD34、CD45、CD11b 和 HLA-DR 表达阴性。其中 CD73 的表达率为 99.5%，CD90 表达率为 100%，CD105 表达率为 99.8%。间充质干细胞表达 CD29、CD44、CD90、CD73、CD105、HLA-ABC，不表达造血细胞标志物 CD34、CD45、CD117、HLA-DR。根据我们测出的细胞免疫表型结果表明，我们培养并进行传代扩增的细胞表达与 MSCs 相类似的抗原表面标志物。（鉴定结果见图 2）图 2 流式细胞仪测细胞表面抗原
图 1.1：P0 代细胞形态（×100） 图 1.2：P1 代细胞形态（×100） 图 1.3：P5 代细胞形态（×100）2.4.2 hUMSCs 表面抗原鉴定流式细胞仪检测结果如图 2 所示，CD73、CD90、CD105 表达阳性，CD19、CD34、CD45、CD11b 和 HLA-DR 表达阴性。其中 CD73 的表达率为 99.5%，CD90 表达率为 100%，CD105 表达率为 99.8%。间充质干细胞表达 CD29、CD44、CD90、CD73、CD105、HLA-ABC，不表达造血细胞标志物 CD34、CD45、CD117、HLA-DR。根据我们测出的细胞免疫表型结果表明，我们培养并进行传代扩增的细胞表达与 MSCs 相类似的抗原表面标志物。（鉴定结果见图 2）图 2 流式细胞仪测细胞表面抗原
【参考文献】：
期刊论文
[1]脐带血血浆分离培养脐带间充质干细胞及体外扩增人脐血CD34+细胞的研究[J]. 吴洁莹,陆琰,陈劲松,吴韶清,汤雪薇,李焱. 中国实验血液学杂志. 2015(04)
[2]卵巢早衰的治疗现状及进展[J]. 徐晖. 中国现代医生. 2015(21)
[3]卵巢功能早衰动物模型建立方法的研究进展[J]. 向澜,姚广涛,李瑞霞,张杰,黄元泽. 中国药学杂志. 2015(05)
[4]Mesenchymal stem cells: Emerging mechanisms of immunomodulation and therapy[J]. Justin D Glenn,Katharine A Whartenby. World Journal of Stem Cells. 2014(05)
[5]Migration capacity of human umbilical cord mesenchymal stem cells towards glioma in vivo[J]. Cungang Fan,Dongliang Wang,Qingjun Zhang,Jingru Zhou. Neural Regeneration Research. 2013(22)
[6]An update on primary ovarian insufficiency[J]. JIN Min,YU YiQi & HUANG HeFeng * Women’s Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310006,China. Science China（Life Sciences）. 2012(08)
[7]人脐带间充质干细胞分离扩增方法的优化[J]. 杨卿,杨扬,刘剑戎,潘国政,张英才,陈规划,张琪. 中山大学学报(医学科学版). 2011(06)
[8]卵巢早衰临床治疗及促排卵后妊娠率研究[J]. 冯慧娴. 山西医药杂志(下半月刊). 2010(01)
博士论文
[1]人脐带间充质干细胞治疗卵巢早衰的初步实验研究[D]. 俞凌.中国人民解放军军医进修学院 2012
[2]促性腺激素释放激素拮抗剂（GnRHant）预防化疗损伤性卵巢功能早衰的实验研究[D]. 赵雪静.第四军医大学 2011
[3]人脐带间充质干细胞移植改善化疗损伤卵巢功能的实验研究[D]. 朱少芳.南方医科大学 2011
硕士论文
[1]脐带间充质干细胞移植治疗卵巢早衰的实验研究[D]. 吕晓丹.北京协和医学院 2016
[2]脐带基质干细胞在不同诱导条件下向生殖细胞分化的实验研究[D]. 冷少华.第三军医大学 2009
本文编号：2986230
【文章来源】：广东药科大学广东省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
P0代细胞形态（×100）
图 1.1：P0 代细胞形态（×100） 图 1.2：P1 代细胞形态（×100） 图 1.3：P5 代细胞形态（×100）2.4.2 hUMSCs 表面抗原鉴定流式细胞仪检测结果如图 2 所示，CD73、CD90、CD105 表达阳性，CD19、CD34、CD45、CD11b 和 HLA-DR 表达阴性。其中 CD73 的表达率为 99.5%，CD90 表达率为 100%，CD105 表达率为 99.8%。间充质干细胞表达 CD29、CD44、CD90、CD73、CD105、HLA-ABC，不表达造血细胞标志物 CD34、CD45、CD117、HLA-DR。根据我们测出的细胞免疫表型结果表明，我们培养并进行传代扩增的细胞表达与 MSCs 相类似的抗原表面标志物。（鉴定结果见图 2）图 2 流式细胞仪测细胞表面抗原
图 1.1：P0 代细胞形态（×100） 图 1.2：P1 代细胞形态（×100） 图 1.3：P5 代细胞形态（×100）2.4.2 hUMSCs 表面抗原鉴定流式细胞仪检测结果如图 2 所示，CD73、CD90、CD105 表达阳性，CD19、CD34、CD45、CD11b 和 HLA-DR 表达阴性。其中 CD73 的表达率为 99.5%，CD90 表达率为 100%，CD105 表达率为 99.8%。间充质干细胞表达 CD29、CD44、CD90、CD73、CD105、HLA-ABC，不表达造血细胞标志物 CD34、CD45、CD117、HLA-DR。根据我们测出的细胞免疫表型结果表明，我们培养并进行传代扩增的细胞表达与 MSCs 相类似的抗原表面标志物。（鉴定结果见图 2）图 2 流式细胞仪测细胞表面抗原
【参考文献】：
期刊论文
[1]脐带血血浆分离培养脐带间充质干细胞及体外扩增人脐血CD34+细胞的研究[J]. 吴洁莹,陆琰,陈劲松,吴韶清,汤雪薇,李焱. 中国实验血液学杂志. 2015(04)
[2]卵巢早衰的治疗现状及进展[J]. 徐晖. 中国现代医生. 2015(21)
[3]卵巢功能早衰动物模型建立方法的研究进展[J]. 向澜,姚广涛,李瑞霞,张杰,黄元泽. 中国药学杂志. 2015(05)
[4]Mesenchymal stem cells: Emerging mechanisms of immunomodulation and therapy[J]. Justin D Glenn,Katharine A Whartenby. World Journal of Stem Cells. 2014(05)
[5]Migration capacity of human umbilical cord mesenchymal stem cells towards glioma in vivo[J]. Cungang Fan,Dongliang Wang,Qingjun Zhang,Jingru Zhou. Neural Regeneration Research. 2013(22)
[6]An update on primary ovarian insufficiency[J]. JIN Min,YU YiQi & HUANG HeFeng * Women’s Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310006,China. Science China（Life Sciences）. 2012(08)
[7]人脐带间充质干细胞分离扩增方法的优化[J]. 杨卿,杨扬,刘剑戎,潘国政,张英才,陈规划,张琪. 中山大学学报(医学科学版). 2011(06)
[8]卵巢早衰临床治疗及促排卵后妊娠率研究[J]. 冯慧娴. 山西医药杂志(下半月刊). 2010(01)
博士论文
[1]人脐带间充质干细胞治疗卵巢早衰的初步实验研究[D]. 俞凌.中国人民解放军军医进修学院 2012
[2]促性腺激素释放激素拮抗剂（GnRHant）预防化疗损伤性卵巢功能早衰的实验研究[D]. 赵雪静.第四军医大学 2011
[3]人脐带间充质干细胞移植改善化疗损伤卵巢功能的实验研究[D]. 朱少芳.南方医科大学 2011
硕士论文
[1]脐带间充质干细胞移植治疗卵巢早衰的实验研究[D]. 吕晓丹.北京协和医学院 2016
[2]脐带基质干细胞在不同诱导条件下向生殖细胞分化的实验研究[D]. 冷少华.第三军医大学 2009
本文编号：2986230
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