尿酸对大鼠肾细胞线粒体损伤及Pgam5/Drp1表达的影响

发布时间：2021-02-03 13:37

　　目的:探讨尿酸干预大鼠肾细胞对其线粒体损伤及磷酸甘油酸变位酶家族成员5（Pgam5）和发动蛋白相关蛋白1（Drp1）表达的影响。方法:0. 6 mmol/L尿酸干预大鼠肾细胞NRK-52E,采用MTT法检测细胞活力,Hochest 33258染色观察细胞形态,流式细胞术检测细胞凋亡水平,透射电镜观察线粒体形态结构,免疫荧光染色观察Pgam5和Drp1阳性表达情况,RT-qPCR检测线粒体中Pgam5 m RNA的表达水平,Western blot检测细胞质基质中Pgam5和Drp1蛋白表达水平。结果:与正常细胞比较,尿酸干预组细胞活力显著降低,凋亡率显著升高,线粒体肿胀、空泡化,嵴断裂,线粒体中Pgam5的m RNA表达显著降低,而细胞质基质中Pgam5和Drp1的蛋白表达水平显著升高（P<0. 01）。结论:尿酸可破坏肾细胞线粒体结构,上调细胞质基质中Pgam5/Drp1表达,诱导细胞凋亡。 

【文章来源】：中国病理生理杂志. 2020,36(06)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

尿酸对NRK-52E细胞活力的影响

采用Hoechst 33258染色观察细胞形态，发现正常组细胞大部分细胞呈圆形或椭圆形，细胞核呈均匀蓝色荧光，出现极少浓染致密的细胞碎片，呈亮蓝色，即为凋亡小体；尿酸干预组细胞形态异常，出现大量亮蓝色细胞碎片，即凋亡小体增多，见图2A。采用流式细胞术检测了各组细胞凋亡水平，统计Q2-2和Q2-4细胞凋亡率，结果显示尿酸干预组细胞凋亡率显著高于正常组（P<0.01），见图2B。3 尿酸对肾细胞线粒体形态结构的影响

透射电镜下观察细胞线粒体形态变化，正常组细胞线粒体形态正常，嵴结构完整；尿酸干预组线粒体肿胀、空泡化，且嵴结构被破坏，出现断裂，见图3。4 尿酸对肾细胞Pgam5和Drp1表达的影响

【参考文献】：
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本文编号：3016594