糖酵解通过调节巨噬细胞极化参与桥本甲状腺炎的实验研究

发布时间：2021-02-09 15:40

　　目的:桥本甲状腺炎（Hashimoto thyroiditis,HT）是内分泌系统常见疾病之一。本课题通过研究桥本甲状腺炎患者外周血巨噬细胞极化及代谢方式的改变,探讨二甲双胍（Metformin,Met）、2-脱氧葡萄糖（2-Deoxy-D-glucose,2DG）对外周血巨噬细胞能量代谢及极化状态的影响,为寻找新的治疗靶点和治疗策略提供线索。方法:随机选取患者及健康对照（Healthy control,HC）各30例,使用淋巴细胞分离液提取受试者外周血中的单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMCs）。通过使用流式细胞仪检测PBMCs中M1型和M2型巨噬细胞的比例;应用Stemcell RosetteSep的方法获得纯化的单核细胞,体外给予10ng/ml GM-CSF的血清培养液培养,并在培养后第7天,收集细胞培养上清,分离纯化巨噬细胞并收集细胞培养上清,免疫酶联吸附法（ELISA）检测IL-10、IL-6与TNF-α的水平;seahorse能量代谢分析仪检测分选出的巨噬细胞的糖酵解水平并分析其变化;使用Met、2DG对巨噬细胞进行处理后... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

HT组和HC组M1/M2型巨噬细胞比例的比较

中国医科大学硕士学位论文12图2巨噬细胞表面标志物CD68的表达水平Fig.2ExpressionofmacrophagesurfacemarkerCD683.4巨噬细胞的细胞因子分泌水平ELISA检测HT组和HC组血清中细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10表达差异。结果发现，HT组IL-6、TNF-α的表达水平均高于HC组，IL-10的表达水平低于HC组，且均具有统计学差异（P<0.05）。图3HT组和HC组巨噬细胞细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10分泌水平*P<0.05，HT组与HC组之间比较；n=20Fig.3ExpressionofmacrophagecytokinesTNF-α、IL-6、IL-10inHTgroupandHCgroup*P<0.05,HTvsHC;n=203.5巨噬细胞糖酵解水平的检测采用Seahorse能量代谢分析仪检测HT组与HC组外周血巨噬细胞的糖酵解水平，结果如图所示：与HC组相比，HT组的细胞外酸度（extracellularacidificationrate，ECAR）值显著增加（图4-A），糖酵解水平（图4-B）和糖酵解能力（图4-C）高于HC组，差异均具有统计学意义（P<0.05）。ABC

中国医科大学硕士学位论文12图2巨噬细胞表面标志物CD68的表达水平Fig.2ExpressionofmacrophagesurfacemarkerCD683.4巨噬细胞的细胞因子分泌水平ELISA检测HT组和HC组血清中细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10表达差异。结果发现，HT组IL-6、TNF-α的表达水平均高于HC组，IL-10的表达水平低于HC组，且均具有统计学差异（P<0.05）。图3HT组和HC组巨噬细胞细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10分泌水平*P<0.05，HT组与HC组之间比较；n=20Fig.3ExpressionofmacrophagecytokinesTNF-α、IL-6、IL-10inHTgroupandHCgroup*P<0.05,HTvsHC;n=203.5巨噬细胞糖酵解水平的检测采用Seahorse能量代谢分析仪检测HT组与HC组外周血巨噬细胞的糖酵解水平，结果如图所示：与HC组相比，HT组的细胞外酸度（extracellularacidificationrate，ECAR）值显著增加（图4-A），糖酵解水平（图4-B）和糖酵解能力（图4-C）高于HC组，差异均具有统计学意义（P<0.05）。ABC

【参考文献】：
期刊论文
[1]灵芝抗肿瘤作用的免疫学机制及其临床应用[J]. 林志彬.  中国药理学与毒理学杂志. 2015(06)



本文编号：3025861