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Wnt/β-catenin信号通路对vaspin介导的大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

发布时间:2021-02-14 06:38
  目的:观察不同浓度vaspin对大鼠BMSCs成骨分化的影响,并研究Wnt通路是否参与vaspin对BMSC成骨分化的影响。方法:1.全骨髓贴壁法分离培养4周龄雄性SD大鼠BMSCs,传代培养至P3代作为体外试验模型,观察细胞形态学及流式细胞仪检测表面标记物。2.实验分组:对照组加入成骨诱导液、实验组:分别加入含10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml vaspin成骨诱导液及含100ng/ml vaspin成骨诱导液+DKK1(Wnt/β-catenin信号通路特异性阻断剂),于成骨诱导第7天酶标仪检测碱性磷酸酶(ALP)活性,RT-PCR检测ALP、核心蛋白结合因子2(Runx2)、及β-catenin m RNA表达水平。3.100ng/mlvaspin联合成骨诱导液干预BMSCs,于3周后茜素红染色。结果:1.P3代BMSCs,呈长梭形,细胞分布成簇或旋涡状;细胞表面抗原CD44、CD90(+),CD34(-),符合BMSCs表面标志物特点。2.Vaspin对BMSCs成骨分化的影响:(1)ALP活性:和对照组比较,低浓度组无明显增加(P>0.05),在中高浓度组... 

【文章来源】:山西医科大学山西省

【文章页数】:38 页

【学位级别】:硕士

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前言
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
2 结果
    2.1 大鼠骨髓间充质干细胞的形态特征
    2.2 流式细胞仪鉴定BMSCs表面标志物
    2.3 碱性磷酸酶活性测定
    2.4 ALP、Runx2、β-catenin mRNA表达
    2.5 茜素红染色矿化结节
3 讨论
4 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
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