植物乳杆菌对低剂量单甘油月桂酸酯诱导的小鼠增重的缓解作用及机理研究

发布时间：2021-02-22 07:13

　　肥胖是一种全球范围内的常见慢性病,属于代谢性疾病,往往伴随有Ⅱ型糖尿病、高胆固醇血症、非酒精性脂肪肝等疾病的出现,近些年来肥胖发病率持续升高。单甘油月桂酸酯（Glycerol Monolaurate,GML）是一种一般公认安全（GRAS）的兼具优良抑菌功能的食品乳化剂。最新研究表明,摄入低剂量的GML（150 mg/kg）可能引起饲喂普通膳食的小鼠出现以体重增加为主要表现特征的代谢综合征,并伴随有全身性低度炎症和肠道菌群失调。本论文以益生菌作为干预手段,基于小鼠实验,探究了益生菌制剂对含GML膳食引起的小鼠增重的缓解作用,并从肠道菌群的角度对可能的作用机理进行了探讨。主要研究结果如下:1.从我国不同地区的传统酸面团中筛选得到多株乳酸菌,进行了模拟胃肠液转运、耐受胆盐、降胆固醇能力等体外益生特性测试,筛选得到了 5株益生性能优良的乳酸菌,经鉴定均为植物乳杆菌,其中,植物乳杆菌T34能耐受pH2.5模拟胃液,能在1.6%浓度的胆盐培养基中生长,并且有较好的体外降胆固醇的能力;植物乳杆菌T17兼具良好的凝集能力（与粘附能力相关）和抑制4种肠道致病菌的能力。此外,T34和T17菌液与终浓度30... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：142 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
英文缩略词（ABBREVATION）
第1章 绪论
    1.1 肥胖概述
        1.1.1 肥胖对健康的影响
        1.1.2 肥胖与肠道菌群
    1.2 单甘油月桂酸酯
        1.2.1 单甘油月桂酸酯简介
        1.2.2 单甘油月桂酸酯的应用
        1.2.3 单甘油月桂酸酯研究的最新发现
    1.3 益生菌
        1.3.1 益生菌简介
        1.3.2 益生菌的种类
        1.3.3 益生菌调节肠道菌群
        1.3.4 益生菌对肥胖的缓解作用
    1.4 植物乳杆菌
        1.4.1 植物乳杆菌的来源
        1.4.2 植物乳杆菌缓解肥胖研究进展
    1.5 本课题立题依据及研究内容
        1.5.1 立题依据
        1.5.2 研究内容
        1.5.3 技术路线
第2章 乳酸菌的筛选、鉴定及其体外益生特性研究
    2.1 前言
    2.2 实验材料与设备
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 主要试剂
        2.2.3 主要仪器设备
    2.3 实验方法
        2.3.1 乳酸菌的筛选
        2.3.2 菌株活化
        2.3.3 乳酸菌耐胆盐初筛
        2.3.4 生长曲线的测定
        2.3.5 益生特性测定
        2.3.6 乳酸菌耐受GML能力测定
        2.3.7 乳酸菌菌种鉴定
        2.3.8 数据处理
    2.4 实验结果
        2.4.1 乳酸菌的分离筛选
        2.4.2 生长曲线的绘制
        2.4.3 不同浓度胆盐的耐受能力
        2.4.4 耐受模拟胃肠液转运能力
        2.4.5 凝集特性研究
        2.4.6 抑菌特性研究
        2.4.7 清除胆固醇能力分析
        2.4.8 耐受GML能力分析
        2.4.9 乳酸菌菌种鉴定
        2.4.10 植物乳杆菌的保藏
    2.5 讨论
    2.6 小结
第3章 植物乳杆菌制剂的制备及保存研究
    3.1 前言
    3.2 实验材料与设备
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 主要试剂
        3.2.3 主要仪器设备
    3.3 实验方法
        3.3.1 冻干保护剂的配制
        3.3.2 菌制剂的冻干制备
        3.3.3 冻干保护剂及保存条件初选
        3.3.4 植物乳杆菌T17和T34菌制剂的制备优化
        3.3.5 数据处理
    3.4 实验结果
        3.4.1 真空冷冻干燥制备菌制剂评价
        3.4.2 最佳保护剂浓度及重悬比例优化
        3.4.3 最佳保护剂成分优化
    3.5 讨论
    3.6 小结
第4章 植物乳杆菌对摄食含GML普通膳食小鼠生长及肠道菌群的影响
    4.1 前言
    4.2 实验材料与设备
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 主要试剂
        4.2.3 主要仪器设备
    4.3 实验方法
        4.3.1 实验设计
        4.3.2 小鼠血清及组织器官的采集
        4.3.3 脂肪细胞大小的测定
        4.3.4 血清中各项指标的测定
        4.3.5 肠道微生态分析
        4.3.6 数据处理
    4.4 实验结果
        4.4.1 小鼠体重的变化
        4.4.2 小鼠摄食量的变化
        4.4.3 小鼠脏器重量分析
        4.4.4 小鼠血脂水平分析
        4.4.5 小鼠LPS和细胞因子水平分析
        4.4.6 小鼠肠道菌群分析
    4.5 讨论
    4.6 小结
第5章 植物乳杆菌T17缓解含GML的高脂膳食诱导小鼠肥胖的研究
    5.1 前言
    5.2 实验材料与设备
        5.2.1 实验材料
        5.2.2 主要试剂
        5.2.3 主要仪器设备
    5.3 实验方法
        5.3.1 实验设计
        5.3.2 小鼠血清及组织器官的采集
        5.3.3 脂肪细胞大小的测定
        5.3.4 血清脂质和细胞因子的测定
        5.3.5 血清中内毒素（脂多糖）含量测定
        5.3.6 血清中胰岛素含量测定
        5.3.7 血清中氧化应激指标的测定
        5.3.8 数据处理
    5.4 实验结果
        5.4.1 小鼠体重分析
        5.4.2 小鼠脏器重量的变化
        5.4.3 小鼠血脂水平分析
        5.4.4 小鼠胰岛素敏感性分析
        5.4.5 小鼠血清中肝脏相关酶的变化
        5.4.6 小鼠血清氧化应激指标分析
        5.4.7 小鼠血清中脂肪因子的变化
        5.4.8 小鼠血清炎症水平分析
        5.4.9 小鼠脂肪组织形态
        5.4.10 小鼠肝脏脂质累积
    5.5 讨论
    5.6 小结
第6章 基于肠道菌群研究T17缓解高脂膳食诱导肥胖的机理
    6.1 前言
    6.2 实验材料与设备
        6.2.1 主要试剂
        6.2.2 本章所用引物
        6.2.3 主要仪器设备
    6.3 实验方法
        6.3.1 小鼠粪便中植物乳杆菌T17的活菌检测
        6.3.2 小鼠肠道菌群变化分析
        6.3.3 基于肠道菌群分析改善肥胖的作用机理
        6.3.4 小鼠肠道有益菌荧光定量PCR （qPCR）验证
        6.3.5 数据处理
    6.4 实验结果
        6.4.1 小鼠粪便中植物乳杆菌T17菌株的筛选
        6.4.2 鉴定小鼠粪便中筛选得到的菌株
        6.4.3 摄食高脂膳食小鼠肠道菌群的变化
        6.4.4 肠道菌群与代谢相关指标的关联分析
        6.4.5 肠道菌群差异物种与代谢通路关联分析
    6.5 讨论
    6.6 小结
第7章 结论与展望
    7.1 本论文的主要结论
    7.2 创新点
    7.3 后续研究展望
参考文献
附录
    附录一 表S188株乳酸菌胆盐耐受性初筛选
    附录二 第5章补充图
作者简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]饲粮添加单月桂酸甘油酯对蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生化指标、免疫器官指数和腹脂形态的影响[J]. 刘梦芸,王建莉,冯凤琴.  中国家禽. 2017(17)
[2]饲粮中添加单月桂酸甘油酯对肉鸡生长性能、消化能力及鸡肉营养品质的影响[J]. 刘梦芸,陈晓倩,赵豪斌,冯凤琴.  食品科学. 2018(15)
[3]高脂膳食与肠道微生态相关性研究进展[J]. 赵敏洁,蔡海莺,蒋增良,李杨,张辉,冯凤琴.  食品科学. 2018(05)
[4]新疆传统发酵奶酪中乳酸菌的益生特性研究（英文）[J]. Ramila AZAT,Yan LIU,Wei LI,Abdurihim KAYIR,Ding-bo LIN,Wen-wen ZHOU,Xiao-dong ZHENG.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2016(08)
[5]Review on microbiota and effectiveness of probiotics use in older[J]. Mariangela Rondanelli,Attilio Giacosa,Milena Anna Faliva,Simone Perna,Francesca Allieri,Anna Maria Castellazzi.  World Journal of Clinical Cases. 2015(02)
[6]椰子油和单月桂酸甘油酯对断奶仔猪生产性能及粪便微生物的影响[J]. 李涛,王春维,万志友,房一粟,祝爱侠.  粮食与饲料工业. 2013(06)
[7]具有潜在益生特性发酵乳杆菌的筛选[J]. 鲍雅静,王水泉,何秋雯,礼贺,孟和毕力格,张和平.  中国食品学报. 2013(05)
[8]几种面粉添加剂的作用机理及研究进展[J]. 班进福,刘彦军,张国丛,彭义峰.  粮食加工. 2010(02)

博士论文
[1]基于微生物组学和代谢组学研究月桂酸单甘油酯对生长和健康的作用机制[D]. 蒋增良.浙江大学 2018
[2]传统酸面团中微生物多样性及其风味物质代谢研究[D]. 刘同杰.浙江大学 2018
[3]益生菌L.plantarum P-8对肉鸡肠道菌群、肠道免疫和生长性能影响的研究[D]. 王丽凤.内蒙古农业大学 2014
[4]实时定量PCR分析肠道正常菌群及其在实验性肝损伤研究中的初步应用[D]. 胡锦华.第三军医大学 2008

硕士论文
[1]单月桂酸甘油酯在豆腐保鲜中的应用研究[D]. 杨明.浙江大学 2014
[2]单月桂酸甘油酯在冷鲜肉保鲜中的应用研究[D]. 宋飞.山东轻工业学院 2012
[3]蔬菜发酵专用乳酸菌选育及其菌剂制备核心技术研究[D]. 王韵.南昌大学 2010
[4]蔬菜发酵专用乳酸菌的选育及其菌体高密度培养[D]. 徐立荣.南昌大学 2007



本文编号：3045646