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胃饥饿素通过PI3K/AKT通路诱导成骨细胞的研究

发布时间:2021-02-27 06:31
  目的探讨胃饥饿素(ghrelin)对成骨细胞诱导的影响,同时探讨PI3K/Akt信号通路在其中发挥的作用。方法选择小鼠成骨前体细胞MC 3T3-E1为研究对象,培养并于显微镜下观察细胞生长形态及其变化。分别将不同浓度的胃饥饿素(0μmol/L、0.05μmol/L、0.10μmol/L)加入细胞培养基中孵育,采用CCK-8试剂盒检测细胞的增殖活性;碱性磷酸酶测定试剂盒检测细胞的碱性磷酸酶活性;Western blot方法检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT的表达变化。根据上述实验方法所得的实验数据应用统计分析软件SPSS 22.0进行分析,应用制图软件Graphpad Prism 5进行作图。组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA),以P<0.05为差异有统计学意义。结果(1)在显微镜下观察细胞,可见细胞贴壁生长,呈现出纺锤形、三角形、多角形等不规则形态,且细胞间可通过长短不一的树突相互连接,符合成骨细胞系生长的形态学特征,实验组与对照组相比较,加入饥饿素后细胞生长更快,且在一定浓度范围内,饥饿素浓度越高,细胞生长越快。(... 

【文章来源】:青岛大学山东省

【文章页数】:43 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
引言
第一章 实验材料
    1.1 实验细胞
    1.2 试剂与药品
    1.3 主要实验仪器
第二章 实验方法
    2.1 培养液的配置
    2.2 成骨细胞 3T3-E1 的复苏、培养、传代、冻存
    2.3 CCK-8法测定成骨细胞3T3-E1增殖
    2.4 测定碱性磷酸酶(ALP)活性
    2.5 Western blot检测通路相关蛋白表达
    2.6 统计学分析
第三章 实验结果
    3.1 一般结果
    3.2 CCK-8测定细胞增殖情况
    3.3 微量酶标法测定细胞碱性磷酸酶活性
    3.4 WESTERN BLOT测定PI3K/AKT通路相关蛋白表达情况
第四章 讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢



本文编号:3053831

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