基于血清药理学方法研究绿茶对高糖诱导大鼠海马神经细胞凋亡的影响

发布时间：2021-03-06 20:47

　　目的:通过观察含茶血清干预前后海马神经细胞超微结构变化,并同时检测海马神经细胞活性、损伤程度、凋亡水平及Bcl-2、Bax的表达水平,探讨含茶血清对高糖诱导海马神经细胞凋亡的影响。方法:1.制备空白血清和含茶血清,在高效液相色谱法方法学建立的基础上测定血清中茶叶10种成分的含量,采用维持培养基按倍比稀释的方法分别配制低、中、高浓度（25%、50%、100%）空白血清和含茶血清。2.海马神经细胞的原代培养及纯度:原代培养出生24h以内SD乳鼠的海马神经细胞,采用葡萄糖浓度为25mmol/L的培养基培养,细胞培养至第5d,NSE免疫组化染色鉴定其纯度。3.细胞分组及药物干预:将细胞随机分为8组,分别为对照组,高糖组,低、中、高浓度空白血清组和低、中、高浓度含茶血清组,其中对照组的葡萄糖浓度为25mmol/L,高糖组的葡萄糖浓度全量换为45mmol/L,低、中、高浓度空白血清组按总体积的10%加入事先稀释好的低、中、高浓度空白血清并且葡萄糖浓度全量换为45mmol/L,低、中、高浓度含茶血清组按总体积的10%加入配制的低、中、高浓度含茶血清并且葡萄糖浓度全量换为45mmol/L,继续培养48... 

【文章来源】：贵州医科大学贵州省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

空白血清(A)、混合标准溶液(B)、含茶血清样品(C)的HPLC色谱图

图 2-2 海马神经细胞纯度鉴定结果（×200）Fig 2-2 Result of purity identification of hippocampal neurons （×200）2.2.2 电镜观察海马神经细胞的超微结构对照组海马神经细胞形态正常，细胞核形态规则，核内染色质丰富且分布均匀，核仁明显，胞浆内含有较多形态正常的线粒体和内质网（图 2-3-A）与对照组比较，高糖组核内染色质分布不均、颗粒化、凝集成块并边集，无核仁，胞浆内含有较多肿胀的线粒体，呈囊泡化扩张的内质网（图 2-3-B）与高糖组比较，低、中、高浓度空白血清组的细胞结构均无明显差异，细胞核形态不规则，核内染色质颗粒化、凝集成块并边集，无核仁，胞浆内含有较多肿胀的线粒体，呈囊泡化扩张的内质网（图 2-3-C、D、E）与高糖组比较，低浓度含茶血清组神经细胞结构无明显改善，细胞核形态不规则，核内染色质颗粒化、凝集成块并边集，无核仁，胞浆内含有较多肿胀的线粒体，呈囊泡化扩张的内质网，同时也含有较少形态正常的线粒体和内质网（图

胞浆内含有较多肿胀的线粒体，呈囊泡化扩张的内质网，同时也含有较少形态正常的线粒体和内质网（图2-3-F）；中、高浓度含茶血清组神经细胞结构均有不同程度的改善，中浓度含茶血清组神经细胞核形态规则，核内染色质丰富且分布均匀，核仁明显，胞浆内可见较少的形态正常的内质网和线粒体（图 2-3-G）；而高浓度含茶血清组神经细胞核形态规则，核内染色质丰富且分布均匀，核仁明显，胞浆内可见较多的形态正常的线粒体和内质网，结果表明含茶血清对高糖诱导神经细胞超微结构异常具有保护作用，并且具有剂量依赖性（图 2-3-H）。

【参考文献】：
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硕士论文
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本文编号：3067785