肌腱蛋白C在百草枯中毒肺损伤中的作用

发布时间：2021-03-09 19:57

　　目的探讨肌腱蛋白C （TNC）在百草枯（PQ）中毒小鼠肺损伤中的表达及作用。方法 C57BL/6雄性小鼠经腹腔注射30 mg/kg PQ建立动物模型,对照组为同等剂量生理盐水腹腔注射。分别于接触PQ后2 d、7 d、14 d和28 d,麻醉后处死小鼠取出肺组织,苏木精-伊红染色法（HE）和胶原染色证明模型成功。逆转录定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）、Western blotting和免疫组化（IHC）方法检测TNC基因和蛋白在小鼠肺组织中随时间的表达规律及定位,Western blotting检测核因子-κB p65 （NF-κB p65）,α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和转化生长因子-β1 （TGF-β1）在肺组织中随时间的表达规律。结果 TNC蛋白表达在接触PQ后2 d升高,7 d达高峰,之后表达降低,在14 d和28 d与对照组比较无统计学差异。TNC基因表达高峰提前到2 d,之后降低,在14 d和28d表达与对照组比较无统计学差异。IHC染色发现,TNC主要分布于损伤的肺泡间质区。NF-κB p65在接触PQ后2 d出现表达峰值,α-SMA在接触后14 d和28 d高表达... 

【文章来源】：中国医科大学学报. 2020,49(08)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

PQ中毒小鼠模型肺组织中相关炎症纤维化指标的蛋白检测结果

Western blotting检测结果（图2）显示，NF-κB p65表达水平与对照组相比在2 d(1.466±0.147 7vs 0.835±0.094 4,P<0.05）和7 d(1.284±0.034 0 vs0.835±0.094 4,P<0.01）明显升高，有统计学意义，并且在2 d达高峰。在2 d之后的表达开始下降，在14 d(0.853±0.064 3 vs 0.835±0.094 4,P>0.05）和28 d(0.792±0.063 0 vs 0.835±0.094 4,P>0.05）后与对照组持平，回归正常水平。α-SMA在造模后的28 d内表达呈现逐渐升高的趋势，在早期无明显升高，分别为2 d(1.315±0.453 vs 0.900±0.208 2,P>0.05),7 d(1.467±0.524 6 vs 0.900±0.208 2,P>0.05），均无统计学意义。14 d(2.804±0.467 7 vs 0.900±0.208 2,P<0.05）和28 d(3.296±0.735 0 vs 0.900±0.208 2,P<0.05）呈现有统计学意义的高表达。TGF-β1与对照组相比，从2 d(2.694±0.194 5 vs 1.000±0.152 8,P<0.01),7 d(1.849±0.088 8 vs 1.000±0.152 8,P<0.01),14 d(1.944±0.098 4 vs 1.000±0.152 8,P<0.01），并一直持续到28 d(2.467±0.260 3 vs1.000±0.152 8,P<0.01），均为有统计学意义的高表达。图2 PQ中毒小鼠模型肺组织中相关炎症纤维化指标的蛋白检测结果

对照组中TNC仅微量表达。但是PQ中毒小鼠肺组织中TNC在基因和蛋白水平均明显高表达，见图3。基因的表达高峰早于蛋白表达，在2 d达高峰。TNC基因表达量与对照组相比各组结果如下：2 d(5.038±0.421 8 vs 1.212±0.427 7,P<0.01),7 d(3.508±0.640 5 vs 1.212±0.427 7,P<0.05),14d(2.177±0.915 8 vs 1.212±0.427 7,P>0.05),28 d(1.351±0.201 2 vs 1.212±0.427 7,P>0.05),2 d和7d时差异有统计学意义，其余无统计学意义。TNC蛋白从2 d(2.575±0.435 1 vs 1.000±0.471 5,P<0.05）开始升高，7 d(5.525±0.256 0 vs 1.000±0.471 5,P<0.01）达高峰，之后表达降低。在14 d(2.511±0.568 9vs 1.000±0.471 5,P>0.05）和28 d(1.790±0.178 9vs 1.000±0.471 5,P>0.05）与对照组比较，蛋白表达量无统计学差异。IHC结果可见，对照组几乎无黄染，PQ作用后的各个时间点均可见一定程度的黄染，7 d黄染最为明显，并且主要分布于损伤的肺间质区。3 讨论

【参考文献】：
期刊论文
[1]血清肌腱蛋白C评估急性百草枯中毒患者肺损伤[J]. 刘倩倩,刘晓伟,张迪,兰洪海,马涛,刘志,刘伟.  中华急诊医学杂志. 2019 (03)



本文编号：3073388