雌激素通过GPER/PKA信号途径调节Min6细胞线粒体自噬的分子机制研究

发布时间：2021-03-10 04:20

　　目的:雌激素是一种在人体心血管、免疫、神经及内分泌等系统中均发挥重要作用的类固醇激素。流行病学调查发现,与同龄男性相比,绝经后女性随着雌激素水平的降低,糖尿病的发病率及并发症发生的速度明显增快,提示雌激素水平变化有可能对糖尿病的发生及发展造成影响。雌激素介导生理效应,调控病理过程主要依靠与雌激素受体结合形成配体。G蛋白偶联雌激素受体（G protein coupled estrogen receptor,GPER）,又称为GPR30,作为一种新型的雌激素膜受体被发现至今已有20余年,近年来,大量研究表明GPER参与了包括糖代谢、脂质代谢、骨代谢等多种生理过程与生命活动,并在心脏、血管、脑、肝脏、乳腺、胰腺、神经组织及生殖器官等组织中广泛分布。有研究者发现,GPER的缺失导致糖耐量受损和高血糖症,对雄性和雌性小鼠产生不同的影响。以上研究提示了雌激素可能通过GPER影响胰岛β细胞的功能与存活。自噬是细胞内异常或多余蛋白质的一种自我降解过程,是除“1型程序性死亡”——细胞凋亡之外的另一种细胞死亡形式,也被称为“2型程序性死亡”。自噬通过细胞器的更新、代谢保障细胞内的稳态,促进细胞适应和存活。... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同浓度E2影响GPER在Min6细胞中的表达

9中国医科大学硕士学位论文图3.2GPER在Min6细胞的表达及定位图中行I为对照组，行II为10-7M的E2组，a、A为GPER（绿色），b、B为DAPI染色的细胞核（蓝色），c、C为融合。细胞培养24小时。

21中国医科大学硕士学位论文8结果8.1E2减少Min6细胞中线粒体自噬体的形成。应用透射电镜方法观察对照组和10-7M浓度的E2处理24小时后的Min6细胞中线粒体自噬体的形成情况，从而判定细胞内线粒体自噬的发生。实验结果显示,与对照组相比，仅E2处理过的细胞中线粒体自噬体数量较少，先后被G15和E2处理过的细胞中具有双层膜结构的线粒体自噬体数量增加（图8.1）。图8.1E2影响Min6细胞中线粒体自噬体的形成图中A为对照组，B为10-7M浓度E2组，C为G15+E2组。细胞培养时间为24小时，C组加入E2处理前，经过15μM浓度的G15预处理30min。箭头指示线粒体自噬体。放大倍数20000倍。8.2E2减少Min6细胞中TOM20和LampII共定位的表达将Min6细胞分为对照组、10-7M浓度E2组、E2+GPER拮抗剂（G15）组，通过免疫荧光技术检测线粒体外膜蛋白TOM20和溶酶体膜蛋白LampII共定位。实验结果显示，与对照组相比，E2组的TOM20和LampII阳性颗粒共定位减少，而在经过G15预处理的G15+E2组中，这种减少被抵消（图8.2）。


本文编号：3074041