基质Gla蛋白对人成骨肉瘤MG63细胞株骨形成及Wnt/β-catenin信号通路的影响

发布时间：2021-03-17 14:32

　　目的:1、观察人成骨肉瘤MG63细胞株中MGP基因表达改变对其骨形成的影响;2、观察MGP对人成骨肉瘤细胞MG63中Wnt/β-catenin信号通路相关因子的影响,探讨MGP在绝经后骨质疏松症防治作用中可能的新机制。方法:1、MGP基因重组质粒转染:将MG63细胞分成MGP过表达组及MGP敲低组,过表达组用重组质粒pIRES2-EGFP（过表达对照组）及pIRES2-EGFP-MGP（过表达组）转染至MG63,敲低组用重组质粒p KLO-EGFP（敲低对照组,）及pKLO-EGFP-shRNA（敲低组）转染至MG63细胞中;2、MG63细胞骨形成能力检测:MG63细胞转染质粒后,用CCK-8法检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶（ALP）染色及活力测定技术检测MG63细胞的分化情况,茜素红S染色及氯化十六烷基吡啶半定量矿化结节检测细胞矿化能力;3、Wnt/β-catenin信号通路相关因子的检测:采用Western blot和QRT-PCR技术检测各组MGP及Wnt/β-catenin信号通路相关因子如wnt3a、β-catenin和Runx2蛋白及基因的表达情况。结果:1、CCK-8试验结... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Westernblot检测转染不同质粒对MG63细胞MGP蛋白表达的影响

Westernblot检测转染不同质粒对MG63细胞MGP蛋白表达的影响

CCK-8检测过表达及敲低MGP对MG63细胞增殖情况的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]四种骨质疏松治疗药物对原代SD大鼠成骨细胞MGP表达的影响[J]. 赖晓阳,方向南,陈雪英,姜醒华,张美英,王平芳,廖二元,杨雅.  中华内分泌代谢杂志. 2012 (12)
[2]维生素K2对老年去卵巢大鼠血管钙化的影响[J]. 陈雪英,杨雅,游志刚,丁颖,吴韦,姜醒华.  中国动脉硬化杂志. 2012(03)
[3]维生素K2对SD去卵巢大鼠基质Gla蛋白（MGP）及腰椎基因表达的影响[J]. 陈雪英,姜醒华,闫玉刚,方向南,赖晓阳,吴韦,丁颖,杨雅.  中国骨质疏松杂志. 2011(08)
[4]原发性骨质疏松症诊治指南（2011年）[J].   中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志. 2011(01)



本文编号：3087297