高脂环境下miR-125a-5p和miR-125b-5p靶向作用FZD9抑制BMSCs成骨分化机制研究

发布时间：2021-03-21 17:05

　　研究背景:过高的发病率是高脂血症受到全球社会广泛关注的主要原因之一,而且越来越多的疾病（诸如糖尿病、心脑疾病、骨质疏松症等等）都已被证明与高脂血症存在密切关系。在前期实验中,我们观察到高脂血症组大鼠较正常组大鼠种植体周围骨质疏松,骨结合率较低,成骨细胞减少,破骨细胞增多等现象。高脂血症的高发病率和其对骨代谢的不良影响,已成为影响种植修复的潜在危险因素,因此研究高脂血症对种植体骨整合的影响有重要的现实意义。卷曲受体蛋白9（frizzled-9,FZD9）是Wnt通路上细胞膜FZD受体家族中的一员,对于骨代谢有重要意义。而microRNA（miRNA）能与靶基因的mRNA相互作用从而直接降解靶mRNA或抑制靶基因的翻译。因此本实验旨在寻找出在高脂环境下,miRNA通过作用于FZD9从而来影响骨代谢的具体机制。实验目的:（1）观察高脂环境下大鼠骨髓机制干细胞（BMSCs）成骨分化过程中Runx2、ALP、FZD9、miR-125a-5p、miR-125b-5p 的表达变化（2）过表达/抑制表达miR-125a-5p、miR-125b-5p后,观察BMSCs成骨分化过程中FZD9表达量的变化。... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１?ＢＭＳＣｓ细胞培养０、３、５、７天在１００倍镜下观察图像??

?下可见纤维形或纺锤样细胞增殖迅速，细胞间联系紧密，大量细胞集落逐渐融合??成片。（图１－１）。??■??■■??细胞培养（Ｘ１００）??图１－１?ＢＭＳＣｓ细胞培养０、３、５、７天在１００倍镜下观察图像??３．２流式细胞仪检测结果：第三代ＢＭＳＣｓＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ９０阳性细胞比率均??大于９５％，ＣＤｌｌｂ、ＣＤ４５阳性细胞比率小于５％。????１＾－???Ｓ．???！－?§－?Ｉ－??“?｜＼?Ａ?“入八八八??＝＞?Ｉｎ？?ｍｉｌｒｗｕｒＷａｒ?°?．?＂＂ｒａｒｒ?ｍ?ｉ＇ｗｉ?ｉ＊ｍｒ。－?－■ｉａｒ－ｒｒｙ－ｒ￣ｗ－ｕｉａｉ?．ｉ＿ｉ（??＾?＾?＾?＾?＾３?Ｊｌ?Ｊ?ｗ３?＾?＾＇＾３?Ｊ！?＾?＾?＾?＾?＾?Ｊｉ?Ｊ２??ＰＥ＊?ＰＥ－Ａ?Ｐｆ?Ａ??ＣＤ２９?

１－４?Ａ、Ｃ）。油红０染色镜下观察，高脂组细胞逐渐由长梭形变为楠圆形、圆形，??出现折光性强的小脂滴，并随时间延长，小脂滴逐渐融合形成大脂滴，明显可见??红染的串珠样脂肪粒，而对照组基本没有脂肪粒的形成。（图１－４Ｂ、Ｄ）。??綱酬??…，?？??高脂组??茜素红染色?油红０＾色??图１－３?ＢＭＳＣｓ成骨诱导２８天茜素红、油红０染色镜下观（Ｘ４０）??３．８?ＲＴ－ＰＣＲ?结果??在７、１０、１４天时高脂组ＲｕｎＸ２ｍＲＮＡ表达量低于对照组，差异有意义（Ｐ??＜０．０５）。由图可见，随时间增加，对照组中Ｒｕｎｘ２ｍＲＮＡ表达量逐渐增加，在??１０天达到最高，１４天时对照组Ｒｕｎｘ２?ｍＲＮＡ表达量降低。高脂组Ｒｕｎｘ２?ｍＲＮＡ??表达量从第３天开始逐渐增多，到第１０天至１４天时增长速度逐渐降低（图１?－４?Ａ?）。??在对细胞从第３天到第１４天的检测中高脂组Ｒｉｍｘ２?ｍＲＮＡ表达量始终低于对照??组。??在７、１０、１４天时高脂组ＡＬＰ?ｍＲＮＡ相对表达量明显低于普通组，差异有意??义（Ｐ＜０．?０５）。由图可见，高脂组与对照组ＡＬＰ?ｍＲＮＡ相对表达量随检测时间的??增加呈上升趋势

【参考文献】：
期刊论文
[1]牙周炎与高脂血症的相关性及其机制[J]. 吕春旭,孙钦峰.  国际口腔医学杂志. 2013(05)
[2]高血脂患者血脂相关知识需求及自我保健行为调查[J]. 笃铭丽,王秋莉,赵钧,周意,方芳.  上海交通大学学报(医学版). 2013(05)



本文编号：3093232