中国北部蒿属物种鉴定与野艾蒿变应原分析
发布时间：2021-04-09 23:55
目的:花粉症是由风媒花粉引起且主要累及呼吸道和眼部的常见的Ⅰ型变态反应,具有明显的季节性和区域性,其发病率逐年增加,严重影响人们身体健康,加重社会经济负担。在中国北方地区由蒿属花粉引起的花粉症尤为突出,因此在现有的蒿属花粉研究的基础上,明确蒿属植物种属鉴定,进一步深入分析蒿属变应原的免疫活性,对于中国北部地区花粉症诊治具有重要价值。方法:本研究通过花粉症问卷调查、变应原筛查、实地花粉和血清采集,利用现有的核酸序列数据库,通过ITS序列分析及形态学进行蒿种鉴定。通过基因合成技术合成野艾蒿花粉变应原基因Art la 1至Art la 6。构建本氏烟草植物、毕赤酵母和大肠杆菌蛋白表达载体,转化宿主重组表达变应原,并进行金属镍离子配体亲和层析纯化。最后用SDS-PAGE电泳分析、c-myc标签抗体及艾蒿过敏患者血清的Western Blotting检测验证各重组变应原的重组表达与lgE结合活性。结果:（1）中国北部航空兵部队花粉症患病率39.15%（449/1147）,SPT和血清slgE检测结果显示艾蒿阳性率最高,航空兵部队阳性检出率高达33.24%和48.84%;（2）ITS序列及形态学鉴...
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
植物过表达载体pBI121-EGFP
图 2.3 毕赤酵母蛋白分泌表达载体 pPICZɑAI (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)数据库中野艾蒿ion number:ANC85024.1)和 Art la 3.0102 (GenBank原蛋白氨基酸序列，分别去除 N 端 1-25 氨基酸氨基酸序列去除 N 端 1-21 氨基酸信号肽序列。此组表达对照蛋白。以上四个基因经毕赤酵母密码子)。设计上下游引物，并分别在引物 5'端引入与 p基（表 2.3）。PCR 扩增 Art la 3.0101、Art la 3.段。反应体系包括 25 μl HiFi 2X Master Mix、1.5的 DNA 片段模版，超纯水定容至 50μl。Artla3钟，98℃变性 20 秒，63℃退火 15 秒，72℃延伸延伸 10 秒；Artla3.0102 退火条件为 65℃15 秒；72℃延伸 30 秒；mCitrine (P. pastoris)基因 60℃退
中国医科大学硕士学位论文GGTTCTTCGAAGATATGGCCTTATTGATGTCACGTTGTAGCCATCACCAAAAAATTAAAAAAATGCATGTCACCAAAGAATGCCACGATGTACCAGCTGGGGAACGTACCAAGGCAACCGATTCCATGAGGGCTGATGCACCACGAAAGACTTGTTAGAAAAATCTAACCCCGGAACAAAGTTCTTCAACTCACCAGTCTTGCTAA
【参考文献】：
期刊论文
[1]蒿属花粉特异性免疫治疗变应性鼻炎的临床疗效观察[J]. 刘艾竹,王学艳,尹金淑,于睿莉,马婷婷. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2018(20)
[2]乌海市气传花粉调查[J]. 班慧,银福,王东平,武静. 中国公共卫生管理. 2018(03)
[3]西安市城区花粉调查研究[J]. 吴媛媛,孙秀珍,刘昀,张永红. 临床肺科杂志. 2018(04)
[4]中国气传致敏花粉的季节和地理播散规律[J]. 李全生,江盛学,李欣泽,朱晓明,魏庆宇. 解放军医学杂志. 2017(11)
[5]悬铃木花粉微颗粒（SPPs）释放的快速有效观察[J]. 沈家慧,李瑞沙,赵慧,李扬,张卫,吕森林,周树敏. 中国细胞生物学学报. 2017(09)
[6]草原地区气传花粉可诱发应变性鼻炎[J]. 王晓艳,宁慧宇,韩班布拉,何欢,石海云,王学艳. 基因组学与应用生物学. 2017(07)
[7]包头地区气传致敏花粉监测与研究[J]. 杨旺盛,杨敬平,李桂平,李月花. 疾病监测与控制. 2016(12)
[8]点刺试验与血清特异性IgE检测在蒿属花粉症中的诊断价值[J]. 王晓丽,王夕娟,张续德,盛舰辉,张丽丽,刘凤霞. 潍坊医学院学报. 2016(01)
[9]中国主要城市气传花粉植物种类与分布[J]. 程晟,余咏梅,阮标. 中华临床免疫和变态反应杂志. 2015(02)
[10]Cross-reactivity between aeroallergens and food allergens[J]. Florin-Dan Popescu. World Journal of Methodology. 2015(02)
博士论文
[1]中国人群蒿花粉相关食物过敏精准诊断的研究[D]. 邓珊.北京协和医学院 2016
硕士论文
[1]内蒙某空军驻训部队常见变态反应性疾病流行病学调查[D]. 王清玉.中国医科大学 2018
[2]昆明主城区气传致敏花粉日历及预测模型建立[D]. 程晟.昆明医科大学 2015
[3]新疆乌鲁木齐市气传花粉与变应性鼻炎的相关分析[D]. 吕靓.新疆医科大学 2013
本文编号：3128542
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
植物过表达载体pBI121-EGFP
图 2.3 毕赤酵母蛋白分泌表达载体 pPICZɑAI (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)数据库中野艾蒿ion number:ANC85024.1)和 Art la 3.0102 (GenBank原蛋白氨基酸序列，分别去除 N 端 1-25 氨基酸氨基酸序列去除 N 端 1-21 氨基酸信号肽序列。此组表达对照蛋白。以上四个基因经毕赤酵母密码子)。设计上下游引物，并分别在引物 5'端引入与 p基（表 2.3）。PCR 扩增 Art la 3.0101、Art la 3.段。反应体系包括 25 μl HiFi 2X Master Mix、1.5的 DNA 片段模版，超纯水定容至 50μl。Artla3钟，98℃变性 20 秒，63℃退火 15 秒，72℃延伸延伸 10 秒；Artla3.0102 退火条件为 65℃15 秒；72℃延伸 30 秒；mCitrine (P. pastoris)基因 60℃退
中国医科大学硕士学位论文GGTTCTTCGAAGATATGGCCTTATTGATGTCACGTTGTAGCCATCACCAAAAAATTAAAAAAATGCATGTCACCAAAGAATGCCACGATGTACCAGCTGGGGAACGTACCAAGGCAACCGATTCCATGAGGGCTGATGCACCACGAAAGACTTGTTAGAAAAATCTAACCCCGGAACAAAGTTCTTCAACTCACCAGTCTTGCTAA
【参考文献】：
期刊论文
[1]蒿属花粉特异性免疫治疗变应性鼻炎的临床疗效观察[J]. 刘艾竹,王学艳,尹金淑,于睿莉,马婷婷. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2018(20)
[2]乌海市气传花粉调查[J]. 班慧,银福,王东平,武静. 中国公共卫生管理. 2018(03)
[3]西安市城区花粉调查研究[J]. 吴媛媛,孙秀珍,刘昀,张永红. 临床肺科杂志. 2018(04)
[4]中国气传致敏花粉的季节和地理播散规律[J]. 李全生,江盛学,李欣泽,朱晓明,魏庆宇. 解放军医学杂志. 2017(11)
[5]悬铃木花粉微颗粒（SPPs）释放的快速有效观察[J]. 沈家慧,李瑞沙,赵慧,李扬,张卫,吕森林,周树敏. 中国细胞生物学学报. 2017(09)
[6]草原地区气传花粉可诱发应变性鼻炎[J]. 王晓艳,宁慧宇,韩班布拉,何欢,石海云,王学艳. 基因组学与应用生物学. 2017(07)
[7]包头地区气传致敏花粉监测与研究[J]. 杨旺盛,杨敬平,李桂平,李月花. 疾病监测与控制. 2016(12)
[8]点刺试验与血清特异性IgE检测在蒿属花粉症中的诊断价值[J]. 王晓丽,王夕娟,张续德,盛舰辉,张丽丽,刘凤霞. 潍坊医学院学报. 2016(01)
[9]中国主要城市气传花粉植物种类与分布[J]. 程晟,余咏梅,阮标. 中华临床免疫和变态反应杂志. 2015(02)
[10]Cross-reactivity between aeroallergens and food allergens[J]. Florin-Dan Popescu. World Journal of Methodology. 2015(02)
博士论文
[1]中国人群蒿花粉相关食物过敏精准诊断的研究[D]. 邓珊.北京协和医学院 2016
硕士论文
[1]内蒙某空军驻训部队常见变态反应性疾病流行病学调查[D]. 王清玉.中国医科大学 2018
[2]昆明主城区气传致敏花粉日历及预测模型建立[D]. 程晟.昆明医科大学 2015
[3]新疆乌鲁木齐市气传花粉与变应性鼻炎的相关分析[D]. 吕靓.新疆医科大学 2013
本文编号：3128542
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/nfm/3128542.html
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