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柚皮素防护2型糖尿病的作用及分子机制研究

发布时间:2021-04-10 02:04
  研究目的:糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)是影响人类健康的一个重大疾病,DM患者中90%-95%是2型DM(T2DM)患者。T2DM的有效防治已是全球关注的热点,更是我国亟需解决的重大课题。近年来研究发现,二氢黄酮类化合物柚皮素在体内明显降低T2DM大鼠空腹血糖及糖化血红蛋白含量,对T2DM有防治作用,但柚皮素防治T2DM机制及具体分子靶点是什么?尚不清楚。柚皮素对T2DM胰岛素抵抗是否有抑制作用?目前还有争议,需进一步研究证实。研究方法:分别对MIN6细胞、HepG2和3T3-L1细胞进行以下处理:用高糖培养基培养MIN6细胞建立高糖损伤模型,用高糖/高胰岛素培养基培养3T3-L1和HepG2细胞建立胰岛素抵抗(IR)模型;分别转染mi R-375和miR-29b mimic和inhibitor到MIN6高糖损伤模型细胞和HepG2/3T3-L1 IR模型细胞。用不同浓度柚皮素对三种细胞进行分组干预。然后用MTT检测细胞的增殖活力,用GOD检测细胞对葡萄糖摄取的能力,用ELISA检测胰岛素释放能力;用qRT-PCR和Western Blotting检测胰岛素信号传导... 

【文章来源】:电子科技大学四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:72 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
英文缩略语对照
第一章 绪论
    1.1 研究工作的背景与意义
    1.2 国内外研究历史与现状
        1.2.1 T2DM的发病机理和治疗现状
        1.2.2 柚皮素在T2DM的防治领域研究进展
        1.2.3 微小RNA在T2DM的防治机制方面的研究进展
    1.3 本文的主要创新与贡献
    1.4 本论文的结构安排
第二章 柚皮素对MIN6高糖模型细胞和3T3-L1/HEPG2胰岛素抵抗模型细胞的防护作用
    2.1 材料
    2.2 方法
    2.3 结果
        2.3.1 柚皮素干预对MIN6高糖模型细胞增殖的影响
        2.3.2 3T3-L1细胞和成熟脂肪细胞的形态及鉴定
        2.3.3 柚皮素干预对3T3-L1胰岛素抵抗模型细胞增殖的影响
        2.3.4 柚皮素干预对3T3-L1胰岛素抵抗模型细胞葡萄糖摄取和胰岛素敏感性的影响
        2.3.5 柚皮素干预对HepG2胰岛素抵抗模型细胞增殖的影响
        2.3.6 柚皮素干预对HepG2胰岛素抵抗模型细胞葡萄糖摄取和胰岛素敏感性的影响
    2.4 讨论
    2.5 本章小结
第三章 柚皮素对MIRNA-375上调/下调后MIN6高糖模型细胞胰岛素分泌的影响
    3.1 材料
    3.2 方法
    3.3 结果
        3.3.1 不同浓度柚皮素对高糖培养MIN6细胞胰岛素释放的影响
        3.3.2 转染MIN6细胞后miR-375表达的测定
        3.3.3 miR-375上调/下调表达在柚皮素调节高糖培养MIN6细胞胰岛素释放的作用
    3.4 讨论
    3.5 本章小结
第四章 柚皮素对胰岛素抵抗3T3-L1/HEPG2细胞IRS-1/AKT/GLUT4基因或蛋白表达的影响
    4.1 材料
    4.2 方法
    4.3 结果
        4.3.1 柚皮素对胰岛素抵抗3T3-L1模型细胞IRS-1/AKT/GLUT4基因表达的影响
        4.3.2 柚皮素对胰岛素抵抗3T3-L1模型细胞IRS-1/p-AKT蛋白表达的影响..
        4.3.3 柚皮素对胰岛素抵抗HepG2模型细胞IRS-1/AKT/GLUT4基因表达的影响
        4.3.4 柚皮素对HepG2胰岛素抵抗模型细胞IRS-1/p-AKT蛋白表达的影响..
    4.4 讨论
    4.5 本章小结
第五章 柚皮素对3T3-L1/HEPG2细胞MIR-29B上调/下调后IRS-1/AKT/GLUT表达的影响
    5.1 材料
    5.2 方法
    5.3 结果
        5.3.1 对3T3-L1/HepG2细胞转染miR-29b的鉴定
        5.3.2 柚皮素对3T3-L1细胞miR-29b上调/下调后IRS-1/AKT/GLUT4基因表达的影响
        5.3.3 柚皮素对3T3-L1细胞miR-29b上调/下调后IRS-1/p-AKT蛋白表达的影响
        5.3.4 柚皮素对HepG2细胞miR-29b上调/下调后IRS-1/AKT/GLUT4基因表达的影响
        5.3.5 柚皮素对HepG2细胞miR-29b上调/下调后IRS-1、p-AKT蛋白表达的影响
    5.4 讨论
    5.5 本章小结
第六章 全文总结与展望
    6.1 全文总结
    6.2 后续工作展望
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间取得的成果


【参考文献】:
期刊论文
[1]Fructose as a key player in the development of fatty liver disease[J]. Metin Basaranoglu,Gokcen Basaranoglu,Tevfik Sabuncu,Hakan Sentürk.  World Journal of Gastroenterology. 2013(08)



本文编号:3128736

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