基质金属蛋白酶-9和细胞外信号调节激酶1/2在哮喘中的表达及其与CCR3/RANTES信号轴的关系

发布时间：2021-04-21 19:36

　　目的探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）在哮喘中的表达水平,并进一步探讨两者与CCR3/RANTES信号轴的关系。方法复制小鼠哮喘模型,分为对照组、哮喘组、干预组。3组小鼠处死后进行肺泡灌洗,收集肺泡灌洗液,对各细胞进行计数,取右肺叶进行苏木精-伊红染色法染色,免疫荧光法检测CCR3在支气管上皮细胞的表达。体外实验分别用活化正常T细胞表达分泌的调节蛋白（RANTES）及RANTES+SB328437刺激16HBE细胞,明胶酶谱法检测MMP-9的活性;用RANTES及RANTES+PD98059（ERK1/2阻断剂）刺激16HBE细胞,Western blot检测ERK1/2、p ERK1/2及MMP-9的表达水平。结果体内实验结果证明成功复制哮喘小鼠模型。通过苏木精-伊红染色法及计数肺泡灌洗液中各细胞数量发现,哮喘组小鼠气道周围有明显的炎症细胞聚集,而干预组小鼠气道周围的炎症细胞明显减少。通过免疫荧光实验发现,小鼠支气管上皮细胞大量表达趋化因子CCR3。体外实验结果发现,哮喘组小鼠MMP-9的活性升高,而干预组MMP-9的活性下降。用外源性RA... 

【文章来源】：中国现代医学杂志. 2016,26(17)北大核心

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验试剂
    1.2 小鼠模型的复制
    1.3 肺泡灌洗液的收集及细胞计数
    1.4 肺组织苏木精-伊红染色法染色
    1.5 正常人支气管上皮细胞系细胞的培养和传代
    1.6免疫荧光法检测16HBE细胞中CCR3的表达
    1.7 Western blot检测蛋白含量
    1.8 明胶酶谱法检测MMP-9的活性
    1.9 统计学方法
2 结果
    2.1 哮喘模型的鉴定
    2.2 CCR3在支气管上皮细胞的表达
    2.3 CCR3阻断剂SB328437对小鼠哮喘应答的影响
    2.4 CCR3阻断剂SB328437对MMP-9活性的影响
    2.5 RANTES诱导MMP-9的表达
    2.6 RANTES刺激ERK1/2的表达
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]大环类酯类抗生素联合支气管扩张剂和皮质激素吸入治疗MP感染引发小儿哮喘的临床效果观察[J]. 何冬梅.  临床和实验医学杂志. 2015(18)
[2]老年患者哮喘长期控制不佳应用雾化吸入糖皮质激素的疗效[J]. 周为,柯会星,李洋.  中华老年医学杂志. 2015 (07)



本文编号：3152362