日本血吸虫虫卵抗原Th1表位肽P25与不同佐剂联用对OVA诱导小鼠过敏性哮喘的抑制作用

发布时间：2021-04-24 22:41

　　目的:探究日本血吸虫（Schistosoma japonicum,SJ）可溶性虫卵抗原SjP40蛋白Th1表位肽P25对SJ尾蚴感染小鼠脾淋巴细胞刺激产生IFN-γ的作用机制,并检测P25多肽分别与弗氏不完全佐剂（Incomplete Freund?s Adjuvant,IFA）和铝佐剂（Aluminum,Alum or Al）联用对OVA诱导小鼠过敏性哮喘的抑制作用。方法:体外实验:SJ尾蚴感染BALB/c雌性小鼠（n=3）,分离脾淋巴细胞。研究分为三组:Medium对照组（单纯DMEM培养液培养）,P12多肽对照组（含50μg/ml P12多肽的DMEM培养液培养,P12为日本血吸虫虫卵抗原SjP40蛋白中非Th1表位肽）,P25多肽组（含50μg/ml P25多肽的DMEM培养液培养,P25为日本血吸虫虫卵抗原SjP40蛋白中Th1表位肽）（n=3）。脾淋巴细胞培养72 h后细胞计数和MTS法检测脾淋巴细胞增殖水平;培养72 h后收集细胞培养上清液,ELISA法检测IFN-γ的分泌水平;培养48 h后收集细胞,流式细胞术分析脾细胞中CD4+T细胞、CD8+T细胞分泌IFN-γ的水... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、P25多肽对SJ感染小鼠脾脏T细胞的刺激作用
    1.1 对象和方法
        1.1.1 实验材料
        1.1.2 实验试剂及耗材
        1.1.3 实验设备
        1.1.4 实验试剂配制
        1.1.5 SJ尾蚴感染小鼠
        1.1.6 小鼠脾脏淋巴细胞的提取
        1.1.7 MTS法检测脾脏淋巴细胞增殖情况
        1.1.8 ELISA法检测脾脏淋巴细胞中IFN-γ的诱导情况
+T细胞、CD8⁺T细胞分泌IFN-γ的情况">        1.1.9 流式细胞分析法检测脾细胞中CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞分泌IFN-γ的情况
    1.2 结果
        1.2.1 P25促进SJ尾蚴感染鼠脾淋巴细胞增殖
        1.2.2 P25促进SJ尾蚴感染鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ
+T细胞、CD8⁺T细胞中IFN-γ表达">        1.2.3 P25上调SJ尾蚴感染鼠CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞中IFN-γ表达
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、P25多肽与不同佐剂联用对小鼠过敏性哮喘的抑制作用
    2.1 对象和方法
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验试剂及耗材
        2.1.3 实验设备
        2.1.4 实验试剂配制
        2.1.5 哮喘模型建立
        2.1.6 肺组织切片的制作
        2.1.7 肺组织HE染色
        2.1.8 肺组织AB-PAS染色
        2.1.9 BALF的收集
        2.1.10 BALF中嗜酸性细胞计数
        2.1.11 BALF中细胞因子检测
        2.1.12 血清中OVA特异性IgE检测
    2.2 结果
        2.2.1 肺组织炎症反应
        2.2.2 支气管上皮粘液分泌情况
        2.2.3 BALF中嗜酸性细胞计数
        2.2.4 血清中OVA特异性IgE表达水平
        2.2.5 BALF中IL-4、IFN-γ水平
    2.3 讨论
    2.4 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 疫苗佐剂和日本血吸虫TH1表位肽对哮喘作用的研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
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[2]免疫佐剂在动物中的应用研究[J]. 刘云峰,程尧,黄文显.  兽医导刊. 2018(15)
[3]哮喘模型大鼠肺组织中IL-4、IFN-γ的变化及防哮方的干预作用[J]. 杨晨羲,宣桂琪,阮晓琳,周星星,陈健.  中国中医急症. 2018(02)
[4]过继转移日本血吸虫可溶性虫卵抗原致敏鼠CD8α-树突状细胞抑制OVA诱导过敏性哮喘的研究[J]. 郭盼,章婧,孙越,朱晓龙,冯晓月,黄俊凯,姚晔,纪伟华,任继玲,朱云娟,刘佩梅,胡立志.  中国病原生物学杂志. 2017(11)
[5]联合T、B细胞表位设计多肽疫苗的研究进展[J]. 李少华,唐康,张春梅,金伯泉,马樱.  中国免疫学杂志. 2017(01)
[6]铝佐剂的作用机制研究进展[J]. 闻晓波,张玲玲,冉旭华.  现代畜牧兽医. 2016(11)
[7]支气管哮喘和卫生假说[J]. 郑仰明,李昌崇.  国外医学(儿科学分册). 2005(02)



本文编号：3158193