ADAMTS18对脂肪发育的影响及其作用机制

发布时间：2021-05-06 20:50

　　内脏性肥胖与皮下脂肪引起的肥胖相比,在引发糖尿病和心血管相关疾病上具有更高的风险。虽然到目前为止的研究并未能够对引发这些疾病的病理做出解析,但研究已经证明这些疾病的发生是与细胞外基质（ECM）的重塑有关。解整合素金属蛋白酶家族（ADAMTSs）是一类锌依赖性的金属蛋白酶,由于此家族成员具有细胞外基质重塑活性,因此在个体发育和多种疾病的发生过程中发挥着至关重要的作用。在众多的ADAMTSs家族成员中,ADAMTS18是一种功能和底物都尚未被研究清楚的“孤儿”金属蛋白酶。在本课题的研究中,我们发现在小鼠出生后的早期发育过程中,Adamts18 mRNA在普通野生（WT）小鼠的内脏白色脂肪组织（vWAT）中大量表达。然而,与WT小鼠相比,Adamts18基因敲除（KO）小鼠的体脂百分比明显上升,并且单个脂肪细胞体积也明显增大。我们发现,这些差异可能部分是由于细胞外基质的重塑,尤其是层粘连蛋白1（LN1）和血小板反应蛋白1（THBS1）的表达增加所导致的。不仅如此,在Adamts18 KO小鼠的内脏白色脂肪组织中,我们还发现ERK1/2活性降低,并且检测到脂肪细胞特异性转录因子PPARγ,C/... 

【文章来源】：华东师范大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一部分 研究背景
    1.1 脂肪细胞发育基本过程
    1.2 ECM在脂肪细胞发育中的作用
    1.3 ADAMTS18研究现状
第二部分 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验耗材
        2.1.3 实验试剂
        2.1.4 实验仪器
        2.1.5 实验试剂配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 Adamts18 KO小鼠的鉴定
        2.2.2 小鼠解剖取脂肪组织
        2.2.3 苏木精-伊红染色(H&E staining)
        2.2.4 蛋白免疫印迹(Westren Bloting)
        2.2.5 RNA提取、RT-PCR及Q-PCR
        2.2.6 小鼠原代前脂肪细胞分离及培养
        2.2.7 油红O染色
        2.2.8 酶联免疫吸附测定(ELASA)
        2.2.9 血糖调节耐受实验
        2.2.10 小鼠血压测量
第三部分 实验结果及讨论
    3.1 Adamts18在小鼠脂肪组织中的表达
        3.1.1 Adamts18主要影响vWAT的早期发育
        3.1.2 Adamts18缺失导致成年小鼠的脂肪异常增多
    3.2 Adamts18缺失对细胞外基质的影响
        3.2.1 Adamts18缺失影响ECM蛋白LN1和THBS1表达上升
        3.2.2 LN会促进SVF细胞分化为前脂肪细胞
    3.3 Adamts18 缺失对 ERK1/2 通路的影响
        3.3.1 Adamts18缺失抑制ERK1/2的磷酸化
        3.3.2 Adamts18缺失激活脂肪细胞发育特异通路的活性
    3.4 Adamts18缺失对小鼠血脂水平的影响
    3.5 Adamts18对Apoe~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响
        3.5.1 Adamts18缺失使Apoe~(-/-)小鼠血脂升高
        3.5.2 Adamts18缺失促进Apoe~(-/-)小鼠患动脉粥样硬化
    3.6 Adamts18缺失对小鼠血糖水平的影响
    3.7 Adamts18缺失对小鼠血压水平的影响
        3.7.1 Adamts18缺失使KO小鼠血压升高
        3.7.2 Adamts18缺失使KO小鼠颈总动脉血管壁增厚
第四部分 总结与展望
    4.1 总结
    4.2 展望
参考文献
附录
附件
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]白色脂肪细胞分化起源的研究进展[J]. 付建飞,王欣,陈士勇,王安世,张慧琴,张晓宏.  公共卫生与预防医学. 2014(04)
[2]脂肪细胞因子对脂肪细胞增殖分化的反馈调节作用[J]. 周艳兰,迟毓婧,管又飞,杨吉春.  中国生物化学与分子生物学报. 2011(03)



本文编号：3172595