炎性因子环境下Caveolin-1表达对甲状腺上皮细胞自噬功能的影响

发布时间：2021-05-07 07:07

　　研究背景:桥本甲状腺炎（Hashimoto’s thyroiditis,HT）的发生与基因易感性、环境、免疫紊乱等众多因素有关。我们课题组先前发现,HT患者甲状腺组织中甲状腺细胞自噬活动减弱。小窝蛋白-1（Caveolin-1）是细胞质膜烧瓶样凹陷微囊结构小窝的主要组成部分,可以通过调控自噬活动影响疾病的发生、发展,然而Caveolin-1对人甲状腺上皮细胞自噬活动的调节尚不清楚。研究目的:研究HT患者甲状腺组织中炎性因子（IL-1β、IFN-γ）和Caveolin-1的表达情况,以及IL-1β与IFN-γ共同作用于甲状腺上皮细胞后对Caveolin-1和自噬标志性蛋白LC3B-II表达的影响,探讨甲状腺上皮细胞中Caveolin-1与自噬的关系。研究方法:1.单纯结节性甲状腺肿和HT患者甲状腺病理标本各收集8例。免疫组织化学染色分析甲状腺组织中IL-1β、IFN-γ和Caveolin-1的表达及分布情况。2.甲状腺上皮细胞系Nthy-ori 3-1细胞用2 ng/m L IL-1β和10 ng/m L IFN-γ联合刺激后,采用荧光实时定量PCR检测Caveolin-1的m RNA水... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
中英文缩略词
第一章 绪论
    1.1 自身免疫性甲状腺疾病
    1.2 HT病
        1.2.1 概述
        1.2.2 流行病学
        1.2.3 免疫病理特征
        1.2.4 发病机制
    1.3 细胞因子
        1.3.1 概述
        1.3.2 Th1/Th2细胞因子与AITD
        1.3.3 IFN-γ
        1.3.4 .IL-1β
        1.3.5 IFN-γ、IL-1β与HT
    1.4 细胞程序性死亡
        1.4.1 细胞凋亡
        1.4.2 自噬
        1.4.3 自噬、凋亡和HT
    1.5 Caveolin-1
        1.5.1 Caveolin-1概述
        1.5.2 Caveolin-1与凋亡
        1.5.3 Caveolin-1与自噬
        1.5.4 Caveolin-1与HT
    1.6 小结
第二章 研究目的、内容、方法、意义及实验方案设计
    2.1 研究目的
    2.2 研究内容
    2.3 研究方法及技术
    2.4 研究意义
    2.5 实验方案设计
        2.5.1 检测HT患者甲状腺组织与正常甲状腺组织中IL-1β、IFN-γ及Caveolin-1表达情况
        2.5.2 IL-1β、IFN-γ对甲状腺上皮细胞Caveolin-1和LC3B-II蛋白的影响,以及干扰Caveolin-1后细胞中LC3B-II的表达变化
第三章 实验材料与方法
    3.1 临床标本收集
    3.2 主要试剂和材料
        3.2.1 细胞系
        3.2.2 主要试剂
        3.2.3 主要仪器设备和耗材
    3.3 实验方法
        3.3.1 甲状腺上皮细胞Nthy-ori3-1的培养
        3.3.2 免疫组织化学染色
        3.3.3 细胞免疫荧光染色
        3.3.4 瞬时转染
        3.3.5 提取RNA(Trizol法提取)
        3.3.6 逆转录PCR
        3.3.7 实时荧光定量PCR
        3.3.8 蛋白质印迹
        3.3.9 统计学分析
第四章 实验结果
    4.1 HT患者组织中IL-1β和IFN-γ高表达而Caveolin-1低表达
    4.2 IL-1β和IFN-γ抑制甲状腺上皮细胞Caveolin-1和LC3B-II表达
    4.3 siCaveolin-1降低甲状腺上皮细胞Caveolin-1表达
    4.4 干扰Caveolin-1后甲状腺上皮细胞LC3B-II表达下降
第五章 讨论
第六章 主要结论及展望
    6.1 主要结论
    6.2 展望
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文
致谢



本文编号：3172968