miR-30a-5p通过靶向Runx2基因抑制成骨细胞分化

发布时间：2021-05-26 09:30

　　目的:构建绝经后骨质疏松大鼠模型,分析miR-30a-5p在成骨细胞分化中的功能。方法:将SD大鼠分为雌激素组、假手术组和模型组;取胫骨组织进行miRNA测序并差异表达分析;检测miR-30a-5p在各组大鼠骨中的表达含量;通过qRT-PCR检测miR-30a-5p表达对成骨分化标记相关蛋白胶原Ⅰ、骨钙素（OCN）和骨桥蛋白（OPN）表达的影响,同时检测对碱性磷酸酶（ALP）活性的影响;双萤光素酶报告基因检测miR-30a-5p对RUNT相关转录因子2（Runx2）的靶向调控作用。结果:miRNA测序分析结果显示,相对于假手术组、雌激素组,模型组有33种共同miRNA表达上调,选取miR-30a-5p作为本研究对象;qRT-PCR进一步验证miR-30a-5p在模型组骨组织中高表达;miR-30a-5p靶向抑制Runx2的表达,且能够抑制OCN、OPN和胶原Ⅰ的表达,降低ALP活性;而同时过表达Runx2后,OCN、OPN和胶原Ⅰ的表达升高,ALP活性增加,Runx2过表达部分缓解miR-30a-5p对成骨细胞分化的抑制作用。结论:miR-30a-5p在骨质疏松大鼠骨组织中表达上调,并... 

【文章来源】：生物技术通讯. 2020,31(02)

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 大鼠模型建立与分组
    1.3 差异miRNA表达检测
    1.4 成骨诱导
    1.5 细胞转染
    1.6 荧光定量PCR
    1.7 ALP活性检测
    1.8 萤光素酶报告基因检测
    1.9 蛋白质表达分析
    1.1 0 茜素红染色
    1.1 1 统计学分析
2 结果
    2.1 miRNA差异表达分析
    2.2 miR-30a-5p在组织中的表达
    2.3 miR-30a-5p靶向调控Runx2的表达
    2.4 Runx2过表达部分缓解miR-30a-5p对成骨细胞分化的抑制作用
3 讨论



本文编号：3206144