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叶酸缺乏对人结肠细胞基因组稳定性和miR-21-5p调控hMSH2表达的影响

发布时间:2021-05-28 10:52
  叶酸(folate)是一类水溶性B族维生素,是一碳单位代谢的核心成分,叶酸最高氧化状态folic acid(FA)是药物和膳食补充剂中常见的叶酸类型。外源叶酸在细胞中被逐级还原为5,10-亚甲基四氢叶酸,是由dUMP从头合成dTMP的主要甲基供体,因此叶酸缺乏可导致细胞DNA内dUMP/dTMP比值升高、dUTP大量掺入DNA,引起DNA碱基错配、DNA链和染色体断裂等基因组不稳定(Genomic instability,GIN)事件发生。错配修复(Mismatch repair,MMR)系统能通过纠正细胞复制和/或重组期间产生的碱基错配而维持基因组完整性,本文围绕叶酸缺乏对人结肠细胞基因组稳定性和miRNA-21-5p表达的影响、miR-21-5p对MMR系统核心基因hMSH2的靶向性与表达调控开展研究。旨在比较叶酸缺乏对不同生理病理状态的细胞基因组稳定性的影响差异,同时揭示miRNA响应叶酸缺乏并介导错配修复基因表达改变与机制。根据本实验室人淋巴细胞基因组稳定性维护的FA浓度,研究以FA缺乏浓度(22.6nM)和RPMI1640培养基标准FA浓度(2260nM)分别干预培养人结肠上... 

【文章来源】:云南师范大学云南省

【文章页数】:67 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

叶酸缺乏对人结肠细胞基因组稳定性和miR-21-5p调控hMSH2表达的影响


预测hMSH2基因是miR-21的靶基因之一

双荧光,报告基因,载体,图谱


图 2.1 双荧光素酶报告基因 psiCHECKTM-2 载体图谱Figure2.1 Doubleluciferase reporter gene psiCHECKTM-2 vector map荧光素酶报告基因检测全基因组 DNA,步骤如下:

流程图,试剂,流程图,表达水平


图 2.2 miRNA 提取试剂(Omega)流程图Figure2.2 miRNA extraction reagent (Omega) flow chart.2.5.3 miRNA-21-5p 表达水平检测

【参考文献】:
期刊论文
[1]循环microRNA-21在实体肿瘤早期诊断中应用价值的研究进展[J]. 朱钰倩,郭锡汉,吴暇玉,徐伟江,汪旭.  癌变·畸变·突变. 2017(02)
[2]叶酸缺乏与肿瘤发生[J]. 张银玲,薛赓,孙树汉,张毅.  第二军医大学学报. 2016(01)
[3]抗叶酸制剂与结直肠癌[J]. 顾湘,朱海杭.  中国肿瘤临床与康复. 2011(06)
[4]DNA甲基化与microRNA相互作用的研究进展[J]. 段维霞,江高峰.  公共卫生与预防医学. 2010(02)
[5]叶酸代谢与人类基因组稳定性的关系研究进展[J]. 汪旭,薛京伦.  国外医学.遗传学分册. 2005(05)

硕士论文
[1]miRNA介导靶基因沉默的分析与识别[D]. 成磊.南京航空航天大学 2011



本文编号:3208132

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