MiR-150通过T细胞对小鼠类风湿关节炎的影响

发布时间：2021-06-09 07:08

　　目的探讨miR-150通过T细胞对小鼠类风湿关节炎发病的影响。方法1采用miR-150基因敲除小鼠（miR-150 knockout,miR-150KO）及其C57BL/6J野生型正常对照小鼠（wildtype,WT）,采用鼠尾基因组PCR扩增鉴定小鼠基因型,采用real-time PCR确定miR-150基因在miR-150KO小鼠和WT小鼠中的表达变化;2采用鸡Ⅱ型胶原（CIA）和弗氏完全佐剂的乳化物注射小鼠尾部,制备miR-150KO小鼠和WT小鼠的类风湿关节炎模型;3应用游标卡尺测量小鼠的后肢厚度,肿胀程度采用动物关节指数评分,比较miR-150KO小鼠和WT小鼠的发病率和发病严重程度;4应用流式细胞术检测miR-150KO小鼠和WT小鼠脾脏和腹股沟淋巴结中T细胞和NKT细胞总量,检测脾脏CD4⁺T细胞和NKT细胞中IFN-γ、IL-4、IL-17细胞因子的表达变化;5制备实验组及对照组miR-150KO和WT小鼠踝关节病理切片,进行HE染色和免疫组化,比较类风湿关节炎miR-150KO和WT小鼠的组织病理变化和炎症因子浸润情况。结果1建立miR-150K... 

【文章来源】：华北理工大学河北省

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

实验小鼠基因型的鉴定

Real-timePCR检测实验小鼠中miR-150表达水平

（1）随机选取12周以上鼠龄雄性的miR-150KO 和C57BL/6J(WT)小鼠各15只,分为溶剂对照组和实验组,实验组小鼠尾部注射鸡Ⅱ型胶原和弗氏完全佐剂的乳化物,溶剂对照组注射冰醋酸和弗氏完全佐剂的乳化物（见图3）（2）第一次胶原注射21天后,进行第二次注射,进行加强免疫,注射完成后用游标卡尺对小鼠踝关节同一部位进行测量,且每隔3天就测量一次,记录数据并观察小鼠的后足肿胀程度,图4为小鼠发病后后肢肿胀的图片,可以观察到WT小鼠发病后后足肿胀程度要比150KO小鼠严重,图5是小鼠后足厚度测量值的变化图,图6是关节指数评分图,结合两个图可以发现实验组中WT小鼠发病时间早,从第二次注射第3天开始发病,发病的关节指数评分为1。第6天时,实验组WT小鼠后肢肿胀明显,关节指数评分升为4,而实验组150KO小鼠后肢有轻微肿胀,评分为1,且实验组150KO发病小鼠后肢从第36天开始有减轻的趋势。在第54天统计小鼠的发病率,实验组150KO小鼠的发病率明显低于WT小鼠,差异具有显著性（*P<0.05）。

【参考文献】：
期刊论文
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[2]MiR-150特异调控胸腺iNKT细胞的发育和成熟[J]. 郑全辉,张爱红,郑爱华,陆斌,张庆波,侯志宏,李娟,陈淑媛.  中国免疫学杂志. 2013(02)
[3]芍药苷对胶原性关节炎大鼠滑膜细胞G蛋白偶联信号的调节作用[J]. 张玲玲,魏伟,汪庆童,陈镜宇,陈尹,吴华勋.  中国药理学通报. 2008(03)
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[5]T细胞在类风湿性关节炎中的作用[J]. 郭丽丽.  上海免疫学杂志. 2002(03)



本文编号：3220190