脐带间充质干细胞对食蟹猴实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用及机制研究
发布时间：2021-06-18 19:06
[目的]多发性硬化（multiple sclerosis,MS）是一种常累及中青年人中枢神经系统的自身免疫性疾病,是导致年轻人神经功能障碍最常见的原因,也是仅次于创伤而引起致残的第二大病因。目前治疗方法仍不能治愈MS,仅起到降低复发风险和延缓疾病进展的作用。在我们的前期研究中发现,人源的脐带间充质干细胞（Human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）在 MS 患者中展现了良好的免疫调节作用和疗效。但其发挥作用的具体机制仍不清楚,为了解决这一问题,因此我们拟采用hUC-MSCs治疗多发性硬化的非人灵长类动物（Non-humanprimates,NHP）模型,即使用食蟹猴的实验性自身免疫性脑脊髓炎（Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）模型来评估 hUC-MSCs对EAE病程、疾病病理、外周免疫状态的影响。近年研究表明干细胞发挥免疫调节作用的主要途径可能是通过旁分泌作用,而外泌体是旁分泌的重要组分,UCMSCs来源的外泌体（Exosome,Exo）可通过遗传物质和炎性分子传递参...
【文章来源】：昆明医科大学云南省
【文章页数】：156 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１?ＵＣＭＳＣｓ的分离培养（Ａ）?ＵＣＭＳＣｓ从组织块中迁移出（１００Ｘ）；?（Ｂ）?ＵＣＭＳＣｓ生长达??到９０％融合（１００Ｘ）；?（Ｃ）传代后ＵＣＭＳＣｓ形态为类成纤维样；（Ｄ）３０００Ｘ的间充质干细胞超??
Ａ?ＵＣＭＳＣｓ?ＮＳ?Ｎｏｒｍａｌ??Ｗｍｍｇｍｍｍ／ｍ?■■■■■??｜?Ｉ?，?ｋ??Ｂ?ＵＣＭＳＣｓ?ＮＳ?Ｎｏｒｍａｌ??ｈ＿＿圔??曜＿＿??图４?ＵＣＭＳＣｓ致瘤性评估（Ａ）?（Ｂ）分别为食蟹猴和裸鼠的ＵＣＭＳＣｓ、ＮＳ注射组、正常对??照组、肝组织和肺组织ＨＥ染色；??Ｆｉｇｕｒｅ?４．?Ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｉｃｉｔｙ?ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＵＣＭＳＣｓ．?（Ａ）?ａｎｄ?（Ｂ）?ｓｈｏｗｓ?ＨＥ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ??ＵＣＭＳＣｓ，?ＮＳ?ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ?ｇｒｏｕｐ，?ｎｏｒｍａｌ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ，?ｌｉｖｅｒ?ｔｉｓｓｕｅ?ａｎｄ?ｌｕｎｇ?ｔｉｓｓｕｅ?ｏｆ?ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ??ｍｏｎｋｅｙｓ?ａｎｄ?ｎｕｄｅ?ｍｉｃｅ，?ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；??２．２?ＵＣＭＳＣ－ＣＭ对肺腺癌细胞增殖和迁移的影响??在对增殖的影响中，用ＵＣＭＳＣ－ＣＭ以２０％、４０％、６０％浓度添加至培养基??后并共培养２４小时后，在７２小时内检测肺腺癌（ＳＰＣ－Ａ－１）细胞的增殖活性。添??加不同浓度培养基的组别相比于对照组，对细胞株细胞增殖活性无显著影响，各??个浓度的条件性培养基与对照组相比无统计学意义（图５）。??２６??
ＣＣＫ８?ａｓｓａｙ?（ＳＰＣ－Ａ－１）??＾?１５０－??ｔｒｌｉｌｉ）??１１＿＿閫躍躍屬??令°、。令政、。??冷、°?々?々??图５不同浓度ＵＣＭＳＣ－ＣＭ对ＳＰＣ－Ａ－１增殖的影响。２０％、４０％、６０％浓度的ＵＣＭＳＣ－ＣＭ??对ＳＰＣ－Ａ－１增殖的影响，结果用ＣＣＫ８吸光度相对于未处理的对照孔的百分率表示（三个??独立实验的均数土标准差，每个组设置五个副孔）。数据用均数土标准差表示，采用非配对??ｔ检验进行统计学分析。??Ｆｉｇｕｒｅ?５．?Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ?ｍｅｄｉｕｍ?ｆｒｏｍ?ＵＣＭＳＣ－ＣＭ?ｏｎ?ｔｈｅ??ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｃａｐａｃｉｔｙ?ｏｆ?ＳＰＣ－Ａ－１．?Ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｏｆ?ＳＰＣ－Ａ－１?ｗａｓ?ａｓｓｅｓｓｅｄ?ｂｙ?ｔｈｅ?ＣＣＫ８?ａｓｓａｙ??ａｆｔｅｒ?７２?ｈ．?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ａｒｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?ａｓ?ｍｅａｎ?士?ＳＤ?ｏｆ?ｔｈｒｅｅ?ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ??ｂｅｔｗｅｅｎ?ＵＣＭＳＣ－ＣＭ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｇｒｏｕｐｓ?ａｎｄ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ?ｗｅｒｅ?ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ?ｂｙ?Ｓｔｕｄｅｎｆｓ?ｕｎｐａｉｒｅｄ?ｔ??ｔｅｓｔ．??２．３?ＵＣＭＳＣ－ＣＭ对ＳＰＣ－Ａ－１迁移和侵袭的影响??肿瘤细胞的迁移和侵袭是肿瘤转移的重要过程［１３，１４］。我们采用划痕实验和基??质凝胶侵袭实验研究了?ＵＣＭＳＣ－ＣＭ对癌细胞迁移的影响。如图６Ａ所示，??ＳＰＣ－Ａ－１与ＵＣＭＳＣ－ＣＭ共孵育后能有效抑制划痕实验中伤
【参考文献】：
期刊论文
[1]Mesenchymal stem cells-derived exosomal microRNAs contribute to wound inflammation[J]. Dongdong Ti,Haojie Hao,Xiaobing Fu,Weidong Han. Science China（Life Sciences）. 2016(12)
[2]Cancer metastases: challenges and opportunities[J]. Xiangming Guan. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2015(05)
本文编号：3237220
【文章来源】：昆明医科大学云南省
【文章页数】：156 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１?ＵＣＭＳＣｓ的分离培养（Ａ）?ＵＣＭＳＣｓ从组织块中迁移出（１００Ｘ）；?（Ｂ）?ＵＣＭＳＣｓ生长达??到９０％融合（１００Ｘ）；?（Ｃ）传代后ＵＣＭＳＣｓ形态为类成纤维样；（Ｄ）３０００Ｘ的间充质干细胞超??
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ＣＣＫ８?ａｓｓａｙ?（ＳＰＣ－Ａ－１）??＾?１５０－??ｔｒｌｉｌｉ）??１１＿＿閫躍躍屬??令°、。令政、。??冷、°?々?々??图５不同浓度ＵＣＭＳＣ－ＣＭ对ＳＰＣ－Ａ－１增殖的影响。２０％、４０％、６０％浓度的ＵＣＭＳＣ－ＣＭ??对ＳＰＣ－Ａ－１增殖的影响，结果用ＣＣＫ８吸光度相对于未处理的对照孔的百分率表示（三个??独立实验的均数土标准差，每个组设置五个副孔）。数据用均数土标准差表示，采用非配对??ｔ检验进行统计学分析。??Ｆｉｇｕｒｅ?５．?Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ?ｍｅｄｉｕｍ?ｆｒｏｍ?ＵＣＭＳＣ－ＣＭ?ｏｎ?ｔｈｅ??ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｃａｐａｃｉｔｙ?ｏｆ?ＳＰＣ－Ａ－１．?Ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｏｆ?ＳＰＣ－Ａ－１?ｗａｓ?ａｓｓｅｓｓｅｄ?ｂｙ?ｔｈｅ?ＣＣＫ８?ａｓｓａｙ??ａｆｔｅｒ?７２?ｈ．?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ａｒｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?ａｓ?ｍｅａｎ?士?ＳＤ?ｏｆ?ｔｈｒｅｅ?ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ??ｂｅｔｗｅｅｎ?ＵＣＭＳＣ－ＣＭ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｇｒｏｕｐｓ?ａｎｄ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ?ｗｅｒｅ?ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ?ｂｙ?Ｓｔｕｄｅｎｆｓ?ｕｎｐａｉｒｅｄ?ｔ??ｔｅｓｔ．??２．３?ＵＣＭＳＣ－ＣＭ对ＳＰＣ－Ａ－１迁移和侵袭的影响??肿瘤细胞的迁移和侵袭是肿瘤转移的重要过程［１３，１４］。我们采用划痕实验和基??质凝胶侵袭实验研究了?ＵＣＭＳＣ－ＣＭ对癌细胞迁移的影响。如图６Ａ所示，??ＳＰＣ－Ａ－１与ＵＣＭＳＣ－ＣＭ共孵育后能有效抑制划痕实验中伤
【参考文献】：
期刊论文
[1]Mesenchymal stem cells-derived exosomal microRNAs contribute to wound inflammation[J]. Dongdong Ti,Haojie Hao,Xiaobing Fu,Weidong Han. Science China（Life Sciences）. 2016(12)
[2]Cancer metastases: challenges and opportunities[J]. Xiangming Guan. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2015(05)
本文编号：3237220
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