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miR-23a对染氟UMR-106细胞成骨活性的影响

发布时间:2021-06-27 15:38
  目的:筛选和验证氟作用下大鼠骨肉瘤细胞差异表达的miR-23a,利用miR-23a表达载体和miR-23a反义寡核苷酸探讨miR-23a对染氟UMR-106细胞成骨活性的影响。方法:1、染氟UMR-106细胞差异性miRNA的筛选及验证:通过miRNA芯片筛选染氟UMR-106细胞差异表达的mi R-23a作为研究对象,通过Real-time PCR法验证mi R-23a表达水平,并通过生物信息学分析,预测miR-23a的靶基因及其参与的生物学功能及信号通路。2、mi R-23a对染氟UMR-106细胞成骨活性的影响:(1)NaF对UMR-106细胞成骨活性影响:以0、5×102、103和2×103μmol/L NaF作用UMR-106细胞24h、48h和72h,Real-time PCR检测ALP、BGP、BMP-2、CoL I、Runx2、Osx mRNA的表达,Western Blot测定CoL I、Runx2及Osx蛋白表达,磷酸苯二钠法检测ALP活性。(2)mi R-23a在染氟UMR-106细胞成骨活性变化中... 

【文章来源】:贵州医科大学贵州省

【文章页数】:76 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

miR-23a对染氟UMR-106细胞成骨活性的影响


图0-1技术路线

琼脂糖凝胶电泳,脂糖,分析集,生物过程


ent)以及参与的生物过程(Biological process)。way 分析集靶基因导入 DAVID 分析系统,分析其显著性富均数±标准差( X±S)表示,采用 SPSS19.0 软件本 t 检验,以 P<0.05 为差异有统计学意义。中 miRNA 表达水平鉴定,RNA 样本的 OD260/OD280比值在 1.8~2.1 之间,脂糖凝胶电泳可见 28S、18S 和 5S 三条条带(图性较好,可用于后续实验。

差异表达,鉴定结果,芯片


个差异表达的 miRNA。在 NaF 组中有 5 个 miRNA 上调,5 个 miRNA 下调,中 miR-23a 上调(图 1-2)。表 1-3 部分差异表达 miRNA 芯片鉴定结果Tab1-3 Expression of miRNA array identification results (part)Accession ID miRNA Name Ratio P-valueMIMAT0000792 rno-miR-23a-3p 1.715 0.0452MIMAT001716 rno-miR-222-5p -2.526 0.0415

【参考文献】:
期刊论文
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[3]Treatment and Prevention of Skeletal Fluorosis[J]. YANG Chen,WANG Yan,XU Hui.  Biomedical and Environmental Sciences. 2017(02)
[4]清络通痹方对佐剂性关节炎大鼠破骨细胞分化相关miRNA表达的影响[J]. 彭孝武,周玲玲,朱亚梅,周学平.  中国中西医结合杂志. 2016(10)
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[6]冷应激对大鼠肝脏组织中Rap1b表达的影响[J]. 郭景茹,马莉,刘艳芝,计红,孔凡志,袁建彬,范文静,杨焕民.  中国生物制品学杂志. 2016(06)
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[8]成骨细胞体外培养模型的研究进展[J]. 孙中洋,李东韬,赵学武,张舒.  中国骨质疏松杂志. 2015(06)
[9]高糖环境下成骨细胞增殖和分化与FoxO1及氧化应激的关系[J]. 王筱婧,赵点点,郁静嘉,焦培林,孙立昊,陶蓓,宣言,刘建民,王卫庆,赵红燕.  诊断学理论与实践. 2015(02)
[10]miR-17-92基因簇在骨肉瘤中的表达及其临床意义[J]. 林金銮,王发圣,叶君健,吴朝阳,李祥,林建华.  中国肿瘤临床. 2014(23)

博士论文
[1]miR-705对绝经后骨质疏松小鼠的骨髓间充质干细胞分化功能异常的调控作用[D]. 杨晓红.第四军医大学 2013
[2]成骨细胞矿化过程中microRNA表达谱分析及miR-93的功能研究[D]. 杨丽.中南大学 2012
[3]miR-X/miR-2861表达簇与转录因子Runx2调控环路在成骨细胞分化中的功能研究[D]. 刘唯.中南大学 2010
[4]氟、镉对骨的效应[D]. 钱海雷.复旦大学 2006
[5]Runx2在过量氟激活成骨细胞过程中的作用研究[D]. 李丹.吉林大学 2006

硕士论文
[1]MicroRNA-214在骨关节炎发生发展中作用的研究[D]. 余晓明.中国人民解放军医学院 2016
[2]吡格列酮对高糖环境下MC3T3-E1早期成骨细胞增殖、凋亡和功能蛋白OCN、ALP、BMP2表达的影响[D]. 李美蓉.福建医科大学 2010



本文编号:3253124

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