E2F2在类风湿性关节炎滑膜炎症中的作用及其机制研究

发布时间：2021-07-08 10:46

　　目的1.探讨E2F2对类风湿性关节炎滑膜炎症的调控及其机制;2.探讨E2F2对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞自噬的调控及其机制。方法1.设计并合成靶向E2F2和STAT1的small interfering RNA（siRNA）,转染类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞（RASFs）以沉默E2F2的表达,以转染negative siRNA（NC）为阴性对照;构建过表达E2F2,STAT1的重组腺病毒载体;RT-qPCR和Western Blot检测E2F2和STAT1的表达。2.构建E2F2基因编辑小鼠,传代并鉴定获取E2F2双敲(E2F2^-/-)和野生型（WT）小鼠。取8周龄小鼠用II型胶原诱导成CIA模型;对小鼠关节肿胀程度进行评分;HE染色和番红固绿染色检测不同基因型小鼠的关节损坏情况;取13.5天E2F2基因编辑小鼠的胚胎,进行鉴定和体外原代培养,获取小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）;ELISA和RT-qPCR检测LPS刺激下E2F2^-/-和WT小鼠血清中炎症因子IL-1α,IL-1β和TNF-α的表达。3.采用RNA-seq,RT-qPCR和W... 

【文章来源】：济南大学山东省

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

普通PCR进行小鼠基因型鉴定结果示意图


本文编号：3271416