PEMF通过调控细胞内活性氧水平抑制RANKL诱导的破骨细胞分化

发布时间：2021-07-09 23:49

　　背景:机体骨量的平衡由骨吸收和骨形成所维持,破骨细胞是体内唯一具有骨吸收功能的细胞,其数量和活性增加将导致骨质疏松症发生。数据统计显示骨质疏松使得老年人发生髓部骨折的机会增加50%,这给社会和家庭都带来了沉重的负担。目前对于骨质疏松主要以雌激素替代及药物治疗为主,但是副作用明显,甚至增加肿瘤发生的风险,因此寻求新的治疗方式对临床意义重大。破骨细胞分化受多条信号通路调控,经典的RANK/RANKL（Receptor Activator for Nuclear Factor-κB Ligand）信号通路是对破骨细胞分化最为重要。低频脉冲电磁场（pulsed electromagnetic felds,PEMF）作为新的治疗手段已经应用于骨质疏松症的局部治疗,取得了令人满意的临床效果。许多基础也研究证实PEMF能够影响破骨细胞分化,但是具体的机制未完全阐明。细胞内活性氧（ROS）是细胞线粒体电子链传递过程中相关酶促反应的副产物。近年来的研究显示,细胞内ROS的变化与破骨细胞分化成熟密切相关。有一些文献报道PEMF可降低其他细胞内ROS水平,因此我们猜想PEMF可能通过调控细胞内ROS水平抑制... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－２?ＰＥＭＦ抑制ＲＡＮＫＬ诱导的破骨细胞分化Ａ：?ＴＲＡＰ诱导４天之后，各组细胞经过??ＴＲＡＰ染色后光镜下（ｌ〇ｘ）所见图像，ＲＡＮＫＬ可以促进多核且不规则紫红色多核破骨细??

测目标ＲＮＡ表达水平，试验的结果表明：与??Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比的话，ＲＡＷ２６４．７细胞经过ＲＡＮＫＬ诱导处理后，ＲＡＮＫＬ组三??个标志基因（ＣＴＳＫ、ＮＦＡＴｃｌ、ＴＲＡＰ）的表达水平明显升高，在第２天和第４??天时，试验结果呈现相同趋势。另一方面，ＲＡＷ２６４．７细胞经过ＰＥＭＦ刺激??后，三个标志基因的表达水平明显下降。Ｓ卩：与ＲＡＮＫＬ组相比较，??ＲＡＮＫＬ＋ＰＥＭＦ组三个基因表达水平明显下降，第４天的实验结果与第２天相??同，组间差异具有统计学意义，Ｐ＜〇．〇５?（如图２－１所示）。??Ａ?Ｂ??｜?５〇０１?ｍ?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ?｜?５１?■?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ??Ｚ?４００－?Ｔ?＊?？?ＲＡＮＫＬ?？?４－?＾?Ｈ?ＲＡＮＫＬ??？＝?＾?？?ＲＡＮＫＬ＋ＰＥＭＦ?１?■?＊＊?？?ＲＡＮＫＬ＋ＰＥＭＦ??ｆｉ?３０°－?ｍ?＿?■?＿?ＰＥＭＦ?＾?３－?｜?Ｊ．?ｍ?ＰＥＭＦ??ｈｉ?＿＿?ＩＩ?ｉｌｌｉ??＾?Ｚ?＾??ｃ??ｌ?＾?ｍ?Ｃｏｎｔｒｏｌ??ｔ?８００－?Ｗ?＊?＿?ＲＡＮＫＬ??？｜?ｉ?？?ＲＡＮＫＬ＋ＰＥＭＦ??￡?６００＇?ｍ?＾?圍■?＿?ＰＥＭｆ??卜＿?｜｜｜?ＩＩ??？Ｖ?ｂ＞??图２－１?ＰＥＭＦ抑制ＲＡＮＫＬ诱导的破骨细胞分化相关基因表达ＲＡＮＫＬ处理细胞后三个基??２４??

?领士学位论文???Ｂ?２５０??｜?＃＃??｜?＿?２００－?＊??１?１?１５０－?－?＾??Ｎａｌｌ??ｃ／?，?／??°?＾??图３－ｌ?ＰＥＭＦ抑制ＲＡＷ２６４．７细胞内ＲＯＳ水平地升高?Ａ：在荧光显微镜下细胞内活性氧??呈现绿色斑点状。Ｂ：在５３０！？条件下检测各组ＤＣＦ的ＯＤ值，每组实验重复３次，组间??差异具有统计学意义。??Ｆｉｇ．?３－ｌ?ＰＥＭＦ?ｒｅｄｕｃｅｄ?ｔｈｅ?ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ｉｎｄｕｃｅｄ?ＲＯＳ．?ＲＡＷ２６４．７?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ?ｔｒｅａｔｅｄ??ｗｉｔｈ?Ｈ２Ｏ２?（ｌ?ｍＭ）?ｆｏｒ?３０?ｍｉｎ?ｉｎ?ｔｈｅ?ａｂｓｅｎｃｅ?ａｎｄ?ｐｒｅｓｅｎｃｅ?ｏｆ?ＰＥＭＦ．?（Ａ）?Ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ?ｏｆ??ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ?ＲＯＳ?ｉｎ?Ｈ２〇２－ｔｒｅａｔｅｄ?ｇｒｏｕｐｓ?ｗａｓ?ａｓｓｅｓｓｅｄ?ｂｙ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ?（ｓｃａｌｅ??ｂａｒ＝ｌ００?｜ｉｍ）?ａｎｄ?（Ｂ）?ＯＤ?ｖａｌｕｅｓ?ｏｆ?ＤＣＦ?ｉｎ?ｔｈｅｓｅ?ｇｒｏｕｐｓ?ｗｅｒｅ?ｍｅａｓｕｒｅｄ?ｕｓｉｎｇ?ａ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ??ｒｅａｄｅｒ?ａｔ?Ｘ＝５３０?ｎｍ．?＃＃Ｐ＜０．０ｌ?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｔｏ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ；?＊Ｐ＜０．０５?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｔｏ?Ｈ２０２?ａｌｏｎｅ．??ＰＥＭＦ，?ｐｕｌｓｅｄ?ｅｌｅｃｔｒｏｍａｇｎｅｔｉｃ?ｆｉｅｌｄ；?Ｈ２０２，?ｈｙｄｒｏｇｅｎ?ｐｅｒｏｘｉｄｅ；?ＤＣＦ，?２，，７＇－ｄｉｃｈｌｏｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ；??ＯＤ


本文编号：3274735