肠道微生物和系统性红斑狼疮相关性研究及肠道分离株（肺炎克雷伯杆菌）在高血压发生发展中的作用

发布时间：2021-07-22 10:40

　　研究目的:系统性红斑狼疮是一种慢性系统性自身免疫病,血清中高滴度的抗双链DNA抗体是诊断特异性的致病抗体。系统性红斑狼疮的发病机制目前尚未完全阐明,一般认为基因和环境因素在发病中都起到了重要作用。肠道微生物作为环境因素的一种,在系统性红斑狼疮发病中的作用仍不明确。本研究的主要目的是明确肠道微生物在系统性红斑狼疮发病中的作用及其病理生理机制,为疾病发病机制研究和疾病治疗提供理论依据。方法:我们收集系统性红斑狼疮患者和健康人粪便、狼疮小鼠和健康小鼠粪便,利用16s rDNA测序技术对粪便中肠道微生物组成和差异情况进行分析;将收集到的粪便利用菌群移植的技术处理悉生小鼠,进行微生物定植情况和差异物种分析;ELISA检测血清中疾病特异性抗体滴度,并用流式细胞术分析淋巴细胞在肠道黏膜免疫器官和外周免疫器官中的分布;利用宏基因组学、代谢组学和微生物代谢表型鉴定系统分析肠道微生物基因功能差异以及代谢方面差异;利用转录组测序和荧光定量PCR技术分析肠道微生物对宿主基因表达的影响,鉴定差异基因并进行功能分析。结果:狼疮人群、狼疮小鼠相比各自的健康对照,肠道微生物组成、物种丰度和多样性不同;菌群移植可以使大... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：139 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１－１．?ＴＣ小鼠与Ｂ６小鼠血清抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体滴度??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?Ａｎｔｉ?ｄｏｕｂｌｅ－ｓｔｒａｎｄｅｄ?ＤＮＡ（Ａｎｔｉ－ｄｓＤＮＡ）?ａｎｔｉｂｏｄｙ?ｔｉｔｅｒｓ?ｉｎ?Ｃ５７／Ｂ６?ｍｉｃｅ??

Ｇｒｏｕｐ?Ｎａｍｅ?■Ｌａｃｔ〇ｔ？〇？ｕｔ??图１－２．?ＴＣ小鼠和Ｂ６小鼠肠道微生物组成和相对含量情况??Ｆｉｇｕｒｅｌ－２．?ＴｏｐｌＯ?ｐｈｙｌｕｍ?ａｎｄ?Ｔｏｐ３０?ｇｅｎｕｓ?ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ?ｉｎ?Ｃ５７／Ｂ６?ｍｉｃｅ?ａｎｄ?ＴＣ?ｍｉｃｅ．??Ａ．菌门（Ｐｈｙｌｕｍ）水平相对含量前１０的微生物Ｂ．菌属（Ｇｅｎｕｓ）水平相对含量前３０的微生物??狼疮小鼠血清中抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体滴度水平显著高于健康小鼠。１６ｓ测序质控结??果表明所有样品数据质量合格，有效数据百分比基本均在９０％以上（仅有１例Ｂ６??样品为８６．６４％）。两种小鼠的主要肠道微生物构成结果显示，按照菌群含量，优势??菌群集中在Ｆ／ｒｍ／ｃｗｔｏ■（厚壁菌门）、Ａ７ｃ／ｅｒａ／＜ｉｅ／ａ?（拟杆菌门）、Ｊｃ／＿／＞？ｏＺ）ａｃｒｍ＇ｆｌ?（放线菌??门）、／Ｖｏ丨（变形菌门）等；优势菌属包括Ｌｏｃｔｏ６ｆｌｃ／／／ｉＭ？（乳酸菌属）、??／＾＾７／／力（３＜？？／？／？?（柔嫩梭菌属）、Ｔｗｒ／ｃ／ｔｅｃ／ｅｒ?（厚壁菌门中的一个属）、??（双歧杆菌属）等。??２．狼疮小鼠与健康小鼠肠道微生物样品复杂度（ａ－ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ?ｉｎｄｅｘ）分析??ａ－ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ?ｉｎｄｅｘ用于分析样品内（Ｗｉｔｈｉｎ－ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ）的微生物群落多样性，??反映样品内的微生物群落的丰富度和多样性

?ｍｕｉｉ??Ｃｍｍｒ??图１－３．狼疮小鼠和健康小鼠ａ多样性指数??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３．?ａ－ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ?ｉｎｄｅｘ?ｆｏｒ?ＴＣ?ｍｉｃｅ?ａｎｄ?Ｂ６?ｍｉｃｅ．??Ａ．?ＡＣＥ?指数（＊＊尸?＜０．０１）?Ｂ．Ｃｈａｏ?１?指数（＊＊Ｐ＜０．０１）??Ｃ．?Ｏｂｓｅｒｖｅｄ?ｓｐｅｃｉｅｓ?指数（＊Ｐ?＜０．０５）?Ｄ．?ＯＵＴ?数目统计??表１－１１．狼疮小鼠和健康小鼠肠道微生物ａ多样性指数??Ｔａｂｌｅ?１－１１．?ａ?－ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ?ｉｎｄｅｘ?ｂｅｔｗｅｅｎ?Ｃ５７／Ｂ６?ｍｉｃｅ?ａｎｄ?ＴＣ?ｍｉｃｅ??Ｇｒｏｕｐ?Ｏｂｓｅｒｖｅｄ?ｓｐｅｃｉｅｓ?Ｓｈａｎｎｏｎ?Ｃｈａｏ?１?ＡＣＥ?ＯＵＴ?ｃｌｕｓｔｅｒｓ??Ｃ５７／Ｂ６?５７３?５．８０６?６８３．７８１?６７７．３９３?１２３０??ＴＣ?（ＳＬＥ）?５０６?６．１４５?５８０．４５１?５８３．２９８?１０７９??上述结果显示，狼疮小鼠肠道微生物的群落丰度和多样性指数（ＡＣＥ，?Ｃｈａｏｌ，??Ｏｂｓｅｒｖｅ?ｓｐｅｃｉｅｓ）均显著低于健康对照小鼠；Ｂ６小鼠特有ＯＵＴ数量２２６个，多于??ＴＣ小鼠特有ＯＵＴ数量７５个。上述结果表明，与健康小鼠相比，狼疮小鼠粪便中??的肠道微生物丰富度和多样性减少。??３？狼疮小鼠与健康小鼠肠道微生物多样品比较（ｐ－ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ?ｉｎｄｅｘ?）分析??Ｐ－ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ?ｉｎｄｅｘ是对不同样品的微生物群落构成进行比较，对不同分组间的样??品进行差异分析


本文编号：3296997