糖尿病小鼠骨髓内皮祖细胞动员、培养后生物学特性的研究
发布时间：2021-08-11 23:36
[目的]研究动员骨髓内皮祖细胞（Endothelial progenitor cells,EPCs）后,再脱离糖尿病高糖微环境培养,观察细胞生物学活性的变化及血管原性情况,为应用EPCs促进糖尿病创面愈合提供依据。[方法]选用5-8周龄C57雄鼠,10只db/db小鼠为实验组;10只db/+小鼠为对照组。采用AMD3100与CSF联合动员骨髓内皮祖细胞,方法如下;每只小鼠第1天注射AMD3100,后续连续注射5天G-CSF,在第10天心脏采血制备EPCs。采用流式细胞术检测EPCs表面特异性标志CD34+/CD133+/CD309+细胞的表达率,免疫细胞化学染色法及摄取Dil-acLDL和结合FITC-UEA-1双荧光染色对EPCs进行的鉴定;鉴定为EPCs细胞后,采用传代至第三代的EPCs细胞进行PCR定量实时聚合酶链反应和蛋白印迹法检测细胞血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、基质细胞衍生因子（stromal cell-derived factor,SDF-1）、趋化因子受体4（CXCR4）基因及蛋白表达情况。[结果]①...
【文章来源】：昆明医科大学云南省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图６ＣＣＫ－８增殖实验折线图??
ｄｂ／＋细胞黏附率（６５．７１１±２．３４１）％，ｄｂ／ｄｂ?细胞黏附率（６１．２３１±７．６８７）％；?ｐ＞０．０５，??两株细胞之间变化无明显差异。??１．７划痕迁移实验??将ＥＰＣｓ接种到６孔细胞培养板上培养Ｏｈ与４８ｈ迁移面积，结果显示；０?ｈ和??４８?ｈ?ｄｂ／＋组?ＥＰＣｓ?迁移面积（分别为（２０４０８８．１±２１９．２）叫，（１４４７２４．９士１９９．４），）??比北／仙组（分别为（２００９８５．７±２３２．６）＾１１１；（１５５０７５．３±２１３．１）哗）明显较大（／７＜〇．〇５）??有统计学差异。（图７）????ｍｍ??圍＿??注：Ａ，Ｃ分别为ｄｂ／＋组Ｏｈ和４８ｈ的迁移面积；Ｂ，Ｄ分别为ｄｂ／ｄｂ组Ｏｈ和４８ｈ的迁移面积??图７两组迁移能力的比较??１．８管腔形成实验??内皮祖细胞具有内皮细胞的特征，在体外具有形成血管样结构的特征；将内??皮祖细胞接种铺于Ｍａｔｒｉｇｅｌ板上体外培养６?ｈ后，观察形成管腔的能力。ｄｂ／＋管??腔形成数量（２９．３３０?±?１．７６４）个，ｄｂ／ｄｂ?管腔形成数量（２４．０００?±?２．０８２）个；（ｐ＜０．０５）??两株细胞之间有明显差异（图８）。??Ａ?ｗｍ??注：Ａ，ｄｂ／＋小鼠管腔形成；Ｂ：?ｄｂ／ｄｂ小鼠管腔形成??图８?ＥＰＣｓ在Ｍａｔｒｉｇｅｌ上成管的特性??２４??
ｄｂ／＋细胞黏附率（６５．７１１±２．３４１）％，ｄｂ／ｄｂ?细胞黏附率（６１．２３１±７．６８７）％；?ｐ＞０．０５，??两株细胞之间变化无明显差异。??１．７划痕迁移实验??将ＥＰＣｓ接种到６孔细胞培养板上培养Ｏｈ与４８ｈ迁移面积，结果显示；０?ｈ和??４８?ｈ?ｄｂ／＋组?ＥＰＣｓ?迁移面积（分别为（２０４０８８．１±２１９．２）叫，（１４４７２４．９士１９９．４），）??比北／仙组（分别为（２００９８５．７±２３２．６）＾１１１；（１５５０７５．３±２１３．１）哗）明显较大（／７＜〇．〇５）??有统计学差异。（图７）????ｍｍ??圍＿??注：Ａ，Ｃ分别为ｄｂ／＋组Ｏｈ和４８ｈ的迁移面积；Ｂ，Ｄ分别为ｄｂ／ｄｂ组Ｏｈ和４８ｈ的迁移面积??图７两组迁移能力的比较??１．８管腔形成实验??内皮祖细胞具有内皮细胞的特征，在体外具有形成血管样结构的特征；将内??皮祖细胞接种铺于Ｍａｔｒｉｇｅｌ板上体外培养６?ｈ后，观察形成管腔的能力。ｄｂ／＋管??腔形成数量（２９．３３０?±?１．７６４）个，ｄｂ／ｄｂ?管腔形成数量（２４．０００?±?２．０８２）个；（ｐ＜０．０５）??两株细胞之间有明显差异（图８）。??Ａ?ｗｍ??注：Ａ，ｄｂ／＋小鼠管腔形成；Ｂ：?ｄｂ／ｄｂ小鼠管腔形成??图８?ＥＰＣｓ在Ｍａｔｒｉｇｅｌ上成管的特性??２４??
【参考文献】：
期刊论文
[1]生长分化因子11对db/db糖尿病小鼠胰岛β细胞功能的保护作用及机制研究[J]. 胡绍波,李珊,邹毅,简峰. 临床和实验医学杂志. 2020(02)
[2]内皮祖细胞外泌体中与血管生成相关的miRNAs生物信息学分析[J]. 熊武,孙安梦,皇毅,全文娟,游凤姣,杨旭龙,兰宏伟,苏红辉,周建大. 中国医师杂志. 2019(04)
[3]AMD3100联合G-CSF对糖尿病小鼠骨髓内皮祖细胞的动员作用[J]. 林晓莹,汪虹. 重庆医科大学学报. 2019(03)
[4]骨髓源内皮祖细胞分泌的外泌体对大鼠创伤性皮肤缺损修复的促进作用[J]. 徐兵,李海乐,刘丹平,张凤蔚. 吉林大学学报(医学版). 2017(04)
[5]《糖尿病足及其相关慢性难愈合创面的处理》再版发行[J]. 感染、炎症、修复. 2013(04)
[6]内皮祖细胞在糖尿病血管病变中的作用及干预治疗[J]. 章容,李素梅. 国际病理科学与临床杂志. 2009(04)
硕士论文
[1]AMD3100对基质细胞衍生因子-1诱导牙髓再生的影响[D]. 郑程峰.广西医科大学 2019
[2]内皮祖细胞外泌体对2型糖尿病动脉粥样硬化小鼠血管内皮细胞炎症反应和氧化应激的调节作用[D]. 尹倩倩.安徽医科大学 2017
本文编号：3337118
【文章来源】：昆明医科大学云南省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图６ＣＣＫ－８增殖实验折线图??
ｄｂ／＋细胞黏附率（６５．７１１±２．３４１）％，ｄｂ／ｄｂ?细胞黏附率（６１．２３１±７．６８７）％；?ｐ＞０．０５，??两株细胞之间变化无明显差异。??１．７划痕迁移实验??将ＥＰＣｓ接种到６孔细胞培养板上培养Ｏｈ与４８ｈ迁移面积，结果显示；０?ｈ和??４８?ｈ?ｄｂ／＋组?ＥＰＣｓ?迁移面积（分别为（２０４０８８．１±２１９．２）叫，（１４４７２４．９士１９９．４），）??比北／仙组（分别为（２００９８５．７±２３２．６）＾１１１；（１５５０７５．３±２１３．１）哗）明显较大（／７＜〇．〇５）??有统计学差异。（图７）????ｍｍ??圍＿??注：Ａ，Ｃ分别为ｄｂ／＋组Ｏｈ和４８ｈ的迁移面积；Ｂ，Ｄ分别为ｄｂ／ｄｂ组Ｏｈ和４８ｈ的迁移面积??图７两组迁移能力的比较??１．８管腔形成实验??内皮祖细胞具有内皮细胞的特征，在体外具有形成血管样结构的特征；将内??皮祖细胞接种铺于Ｍａｔｒｉｇｅｌ板上体外培养６?ｈ后，观察形成管腔的能力。ｄｂ／＋管??腔形成数量（２９．３３０?±?１．７６４）个，ｄｂ／ｄｂ?管腔形成数量（２４．０００?±?２．０８２）个；（ｐ＜０．０５）??两株细胞之间有明显差异（图８）。??Ａ?ｗｍ??注：Ａ，ｄｂ／＋小鼠管腔形成；Ｂ：?ｄｂ／ｄｂ小鼠管腔形成??图８?ＥＰＣｓ在Ｍａｔｒｉｇｅｌ上成管的特性??２４??
ｄｂ／＋细胞黏附率（６５．７１１±２．３４１）％，ｄｂ／ｄｂ?细胞黏附率（６１．２３１±７．６８７）％；?ｐ＞０．０５，??两株细胞之间变化无明显差异。??１．７划痕迁移实验??将ＥＰＣｓ接种到６孔细胞培养板上培养Ｏｈ与４８ｈ迁移面积，结果显示；０?ｈ和??４８?ｈ?ｄｂ／＋组?ＥＰＣｓ?迁移面积（分别为（２０４０８８．１±２１９．２）叫，（１４４７２４．９士１９９．４），）??比北／仙组（分别为（２００９８５．７±２３２．６）＾１１１；（１５５０７５．３±２１３．１）哗）明显较大（／７＜〇．〇５）??有统计学差异。（图７）????ｍｍ??圍＿??注：Ａ，Ｃ分别为ｄｂ／＋组Ｏｈ和４８ｈ的迁移面积；Ｂ，Ｄ分别为ｄｂ／ｄｂ组Ｏｈ和４８ｈ的迁移面积??图７两组迁移能力的比较??１．８管腔形成实验??内皮祖细胞具有内皮细胞的特征，在体外具有形成血管样结构的特征；将内??皮祖细胞接种铺于Ｍａｔｒｉｇｅｌ板上体外培养６?ｈ后，观察形成管腔的能力。ｄｂ／＋管??腔形成数量（２９．３３０?±?１．７６４）个，ｄｂ／ｄｂ?管腔形成数量（２４．０００?±?２．０８２）个；（ｐ＜０．０５）??两株细胞之间有明显差异（图８）。??Ａ?ｗｍ??注：Ａ，ｄｂ／＋小鼠管腔形成；Ｂ：?ｄｂ／ｄｂ小鼠管腔形成??图８?ＥＰＣｓ在Ｍａｔｒｉｇｅｌ上成管的特性??２４??
【参考文献】：
期刊论文
[1]生长分化因子11对db/db糖尿病小鼠胰岛β细胞功能的保护作用及机制研究[J]. 胡绍波,李珊,邹毅,简峰. 临床和实验医学杂志. 2020(02)
[2]内皮祖细胞外泌体中与血管生成相关的miRNAs生物信息学分析[J]. 熊武,孙安梦,皇毅,全文娟,游凤姣,杨旭龙,兰宏伟,苏红辉,周建大. 中国医师杂志. 2019(04)
[3]AMD3100联合G-CSF对糖尿病小鼠骨髓内皮祖细胞的动员作用[J]. 林晓莹,汪虹. 重庆医科大学学报. 2019(03)
[4]骨髓源内皮祖细胞分泌的外泌体对大鼠创伤性皮肤缺损修复的促进作用[J]. 徐兵,李海乐,刘丹平,张凤蔚. 吉林大学学报(医学版). 2017(04)
[5]《糖尿病足及其相关慢性难愈合创面的处理》再版发行[J]. 感染、炎症、修复. 2013(04)
[6]内皮祖细胞在糖尿病血管病变中的作用及干预治疗[J]. 章容,李素梅. 国际病理科学与临床杂志. 2009(04)
硕士论文
[1]AMD3100对基质细胞衍生因子-1诱导牙髓再生的影响[D]. 郑程峰.广西医科大学 2019
[2]内皮祖细胞外泌体对2型糖尿病动脉粥样硬化小鼠血管内皮细胞炎症反应和氧化应激的调节作用[D]. 尹倩倩.安徽医科大学 2017
本文编号：3337118
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/nfm/3337118.html
最近更新
教材专著
