杜仲叶提取物山奈酚对卵巢去势大鼠骨生成的影响及其与mTOR信号通路的关系研究

发布时间：2021-09-28 06:43

　　第一部分目的:观察杜仲叶提取物山奈酚（Kae）对卵巢去势大鼠骨髓间充质干细胞诱导成骨的影响。方法:首先,按照常规建立卵巢去势大鼠模型及获取普通健康雌性SD大鼠,常规饲养8周,引颈处死大鼠后取后肢,无菌操作下从股骨和胫骨中冲洗出骨髓间充质干细胞（BMSCs）,按照常规方法予以进行体外培养,传至第3代后将其分为三组:正常对照组（Control）、骨质疏松模型组（OVX）和山奈酚干预组（OVX+Kae）。Control组使用未行过卵巢去势手术的大鼠骨髓间充质干细胞,在体外诱导成骨;OVX组使用卵巢去势模型大鼠骨髓间充质干细胞,体外诱导成骨;OVX+Kae组是在OVX组的基础上添加Kae对骨髓间充质干细胞进行药物干预。MTT法检测Kae的细胞毒性,茜素红染色观察诱导成骨的情况,并检测诱导成骨后的细胞中碱性磷酸酶（ALP）的活力水平。同时使用实时定量PCR（qPCR）法检测各组细胞中Runx2和Osterix的mRNA相对转录水平以及通过蛋白质免疫印记法（WB）检测各组细胞中Runx2和Osterix蛋白表达水平。结果:1、不同干预浓度山奈酚对大鼠骨髓间充质干细胞均有不同程度的细胞毒性,且具有明... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：93 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

不同干预浓度的山奈酚对BMSCs的抑制率影响

第一部分 山奈酚促进卵巢去势大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化同干预浓度山奈酚对 BMSCs 诱导成骨的影响用成骨诱导培养基诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨转化，不同行干预，在成骨诱导 15 天后，使用茜素红对成骨细胞进行染色，-E 所示：不同浓度的山奈酚干预下的骨髓间充质干细胞在诱导成骨均可见不同数量的钙结节沉积 (400×)。如图 2.F 所示：当山奈酚干10 和 100μM 时，钙结节数量相比 0 和 0.1μM 时明显增加，呈现一赖性。结合 MTT 结果，提示山奈酚的最佳干预浓度为 10μM，后续μM 山奈酚进行干预。

山奈酚促进卵巢去势大鼠骨髓间充质干细胞向成SCs 诱导成骨后 ALP 水平的影响奈酚干预大鼠骨髓间充质干细胞诱导成骨结果详见图 3：相比于正常大鼠，卵巢去势后，细胞中碱性磷酸酶活力水平显著下降（势大鼠的骨髓间充质干细胞在诱导成骨后高（p<0.05 vs. OVX 组）。

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3411425