金黄色葡萄球菌通过TLR2/PI3K信号诱导巨噬细胞的炎症反应和自噬

发布时间：2021-10-05 07:51

　　目的探究巨噬细胞表面Toll样受体2（TLR2）在介导金黄色葡萄球菌（SA）诱导哮喘炎症反应中的分子机制。方法通过SA刺激小鼠RAW264.7巨噬细胞系建立炎症反应模型,分别用TLR2小干扰RNA（si RNA）和磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）处理。Western blot法检测细胞裂解液中TLR2、髓样分化因子88（My D88）、PI3K、核因子κBp65（NF-κBp65）磷酸化的NF-κBp65（p-NF-κBp65）以及自噬蛋白beclin-1和微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）的水平,ELISA检测细胞上清液肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）的分泌水平,激光共聚焦显微镜观察自噬溶酶体的数量。结果 SA刺激巨噬细胞活化TLR2等多种信号通路。TLR2 si RNA显著抑制PI3K、p-NF-κBp65以及自噬蛋白beclin-1和LC3B的表达,此外,自噬溶酶体的数量和TNF-α和IL-6的分泌也显著减少。3-MA在抑制自噬和炎症反应方面与TLR2 si RNA的作用效果相同。结论 TLR2通过PI3K信号通路调控金黄色葡萄球... 

【文章来源】：细胞与分子免疫学杂志. 2017,33(09)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2细胞转染和筛选
        1.2.3 RNA干扰TLR2的水平
        1.2.4 自噬实验观察
        1.2.5 Western blot法检测巨噬细胞中NF-κBp63、p-NF-κBp65、TLR2、PI3K、LC3B、beclin-1的蛋白水平
        1.2.6 ELISA检测巨噬细胞上清液TNF-α和IL-6水平
        1.2.7 统计学分析
2 结果
    2.1 SA刺激RAW264.7巨噬细胞活化多种信号通道
    2.2 TLR2调控巨噬细胞PI3K和NF-κB信号通路以及自噬作用和促炎症细胞因子的分泌
    2.3 PI3K信号通路参与调控巨噬细胞自噬作用和NF-κB信号通路及其介导的促炎症细胞因子的分泌
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]PI3K、NF-κB和STAT1在支气管哮喘儿童外周血单个核细胞的表达和临床意义[J]. 石惠玲,刘杰波,芦爱萍.  中国当代儿科杂志. 2016(07)



本文编号：3419309