艾拉莫德对调节性B细胞及细胞因子影响的研究
发布时间:2021-11-03 23:26
目的:通过艾拉莫德治疗大鼠胶原诱导性关节炎(CIA),研究对白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子(TGF-β)、Foxp3、Bcl-6的影响变化情况。方法:6-8周龄健康清洁级雌性Wistar大鼠30只,体质量(180-220)g,随机分成空白对照组、模型对照组、艾拉莫德组,每组10只大鼠进行实验。模型对照组、艾拉莫德组均给予牛Ⅱ型胶原(CⅡ)与完全弗氏佐剂(CFA)0.3ml/只诱导成CIA模型,治疗28天后,观察CIA大鼠体重变化情况;通过HE染色观察滑膜组织病理变化情况;利用ELISA法检测血清中IL-10、TGF-β含量;通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测滑膜组织中IL-10mRNA、TGF-βmRNA及脾脏中Foxp3mRNA、Bcl-6mRNA的表达水平。结果:⑴经治疗后,艾拉莫德组大鼠体重明显增加,性情变温顺;模型对照组大鼠体重增加缓慢,性情焦躁;⑵关节滑膜经HE染色后,艾拉莫德组见关节滑膜细胞层为4层(正常时为1-3层),未见明显增生及炎性细胞浸润;模型对照组关节滑膜细胞层增加到10层,可见明显增生及大量炎性细胞浸润。⑶血清IL-10含量:艾拉莫德组...
【文章来源】:新疆医科大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】:36 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
Breg的功能及其调控机制Fig.1RegulatoryfunctionandmolecularmechanismofBcellRA作为一个高发病率、高致残率的疾病,目前生物治疗制剂TNF-α拮抗剂、IL-1
图 2 标准品的稀释与加样示意图Fig.2Dilution and sampling schematic of standard products⑵加样:设空白孔和待测样品孔。在待测样品孔中先加 40μl 样品稀释液,然后再加 10μl 待测样品。⑶温育:在封板膜封板的情况下 37℃温育 30 分钟。⑷配液:将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水稀释后 20 倍备用。⑸洗涤:将封板膜小心揭掉,弃去液体后甩干,每孔将洗涤液加满后静置 30 秒,再弃去液体,重复 5 次,拍干。⑹加酶:每孔加入 50ul 酶标试剂,空白孔不加。⑺温育:方法可重复 3。⑻洗涤:方法可重复 5。⑼显色:每孔首先加入 A50ul 显色剂,再加入 B50ul 显色剂,轻震荡并混匀,避光显色 15 分钟在 37℃条件下。⑽终止:加 50ul 终止液,终止显色。⑾测定:将空白孔调至零,在加终止液后 15 分钟内进行 450nm 波长测各孔的吸光度(OD 值)。
IL-10溶解峰Fig.3IL-10Dissolvingpeak
本文编号:3474542
【文章来源】:新疆医科大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】:36 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
Breg的功能及其调控机制Fig.1RegulatoryfunctionandmolecularmechanismofBcellRA作为一个高发病率、高致残率的疾病,目前生物治疗制剂TNF-α拮抗剂、IL-1
图 2 标准品的稀释与加样示意图Fig.2Dilution and sampling schematic of standard products⑵加样:设空白孔和待测样品孔。在待测样品孔中先加 40μl 样品稀释液,然后再加 10μl 待测样品。⑶温育:在封板膜封板的情况下 37℃温育 30 分钟。⑷配液:将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水稀释后 20 倍备用。⑸洗涤:将封板膜小心揭掉,弃去液体后甩干,每孔将洗涤液加满后静置 30 秒,再弃去液体,重复 5 次,拍干。⑹加酶:每孔加入 50ul 酶标试剂,空白孔不加。⑺温育:方法可重复 3。⑻洗涤:方法可重复 5。⑼显色:每孔首先加入 A50ul 显色剂,再加入 B50ul 显色剂,轻震荡并混匀,避光显色 15 分钟在 37℃条件下。⑽终止:加 50ul 终止液,终止显色。⑾测定:将空白孔调至零,在加终止液后 15 分钟内进行 450nm 波长测各孔的吸光度(OD 值)。
IL-10溶解峰Fig.3IL-10Dissolvingpeak
本文编号:3474542
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