MiR-324-5p可能通过靶向淀粉样前体蛋白抑制棕榈酸诱导的3T3-L1脂肪细胞凋亡

发布时间：2021-11-04 05:31

　　miRNAs是一种非编码的小RNA,通过靶向mRNA的3′UTR调控基因的转录后翻译。为明确miR-324-5p对棕榈酸诱导的3T3-L1脂肪细胞凋亡的作用和机制,体外培养3T3-L1脂肪细胞,利用棕榈酸诱导细胞凋亡的同时过表达或抑制miR-324-5p,通过Annexin-V/FITC染色、RT-qPCR等方法检测miR-324-5p对3T3-L1脂肪细胞凋亡的作用。通过在线软件预测miR-324-5p的靶基因并进行验证。结果显示,过表达miR-324-5p能够显著抑制凋亡相关基因BCL-2相关X蛋白（BCL2-associated X protein, Bax）和胱天蛋白酶3（caspase3）的表达水平（P<0.05）;而抑制miR-324-5p后能够显著促进这些基因的表达（P<0.05）;靶基因预测及验证结果表明,miR-324-5p能够显著降低淀粉样前体蛋白（amyloid precursor protein, APP）的表达水平（P<0.05）。本研究认为,miR-324-5p可能通过靶定APP抑制棕榈酸诱导的3T3-L1脂肪细胞凋亡。 

【文章来源】：中国生物化学与分子生物学报. 2020,36(08)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 细胞培养
    1.3 细胞转染
    1.4 细胞诱导凋亡
    1.5 细胞凋亡检测
    1.6 RNA提取和实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)
    1.7 统计学方法
2 结果
    2.1 构建3T3-L1前体脂肪细胞凋亡模型
    2.2 1 000 nmol/L棕榈酸能够成功诱导3T3-L1脂肪细胞凋亡
    2.3 MiR-324-5p在棕榈酸诱导的凋亡中表达量持续降低
    2.4 过表达miR-324-5p能够显著降低凋亡标志基因的表达
    2.5 干扰miR-324-5p能够显著性升高凋亡标志基因表达
    2.6 MiR-324-5p能够靶向APP 3′UTR
    2.7 过表达miR-324-5p能够显著性降低APP表达
    2.8 干扰miR-324-5p能够显著增加APP表达
3 讨论



本文编号：3475100