VEGFA 164 脂肪组织特异表达小鼠模型的构建及研究
发布时间：2021-11-08 03:05
血管内皮生长因子（VEGF）通路在调节脂肪组织的分化及能量代谢过程、促进血管新生和增加血管通透性、促进肿瘤的发生、生长及迁移等方面具有重要作用。在VEGFA的亚型中,VEGFA164体现了VEGFA多数的生物功能。目前,多是用aP2基因启动子构建的脂肪组织特异性敲除或过表达小鼠模型,但aP2基因也在肌肉和巨噬细胞中表达。与aP2启动子相比,adiponectin启动子在脂肪组织中表达的特异性更好。因此,以adiponectin基因为启动子构建的脂肪组织特异转基因小鼠可以更加直观地研究脂肪组织特异性表达VEGF与脂肪分化和能量代谢之间的联系。本论文采用分子克隆的方式,以基因组DNA为模板扩增出目的基因序列,以带启动子序列的质粒小提产物为模板扩增启动子,将脂肪组织特异性的adiponectin基因启动子与改造过的目的基因表达载体pEGFP-N1连接,成功构建了脂肪组织特异性VEGA164过表达载体。并利用显微注射技术,成功培育出鉴定为阳性Founder小鼠及其F1代小鼠。研究证实,转染过的脂肪细胞VEGF表达量升高而VEGFB的mRNA表达量下降...
【文章来源】：东北师范大学吉林省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
白色脂肪棕色化机制[9]
东北师范大学硕士学位论文4图2人和小鼠的脂联素基因启动子结构示意图[34]3.3脂联素的功能脂联素具有缓和炎症的能力，可能是通过调节脂质代谢，脂联素受体表现出神经酰胺酶活性来实现的，目前可视为是引发部分肥胖相关代谢性疾病的主要因素。有研究显示它的浓度在体内呈下降趋势，这一表现与其他脂肪因子相反，相比传统的抗高血压治疗，在胰岛素抵抗的治疗中显示出额外的优势。脂联素促进脂肪酸氧化。AdipoR1/AdipoR2作为脂联素结合蛋白，CK2A、PPL1和LKB1等作为上游因子在肝细胞，肌肉组织中激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)有关信号途径。乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和过氧化物酶体增物激活受体α(PPARα)是AMPK信号途径的下游因子，共同参与脂联素增强脂肪酸氧化的过程[36]。信号途径上下游关系如下所示：1)AdipoR1/2-AMPK-ACC2)AdipoR1/2-AMPK-PPARα3)AdipoR1/2-沉默信息调节因子1（SIRT1）-AMPK脂联素抑制脂肪形成。在小鼠实验中，注射脂联素会显著抑制脂肪的合成，从而显著降低血浆中血脂含量[37]。这一过程由肝激酶B1（LKB1），过氧化物酶体增殖物激活受体辅助活化因子1α（PGC-1α），固醇调节原件结合蛋白-1c（SREBP-1c），钙调素依赖蛋白激酶（CAMK）等因子参与这一通路的调控，相关信号途径上下游关系如下：1)AdipoR1-LKB1-AMPK-SREBP-1c2)AdipoR1-CaMKK-AMPK-SIRTI-PGC-1α3)AdipoR2—PPARα
东北师范大学硕士学位论文54.1VEGFs家族发现史血管内皮生长因子最先由牛垂体的腺泡中提取出[38]。因其促血管生成生物活性高，被命名为血管内皮生长因子(VEGF)[39]。亦称作血管通透性因子(VPF)[40]。VEGFs家族包括VEGFA,VEGFB,VEGFC,VEGFD和PIGF,相关受体包括（血管内皮生长因子1型受体（VEGF-receptor1，VEGFR1），VEGFR2,VEGFR3,神经纤毛蛋白1(neuropilin-1,NRP-1)和NRP-2[41-44]，它们的关系网如(图3)所示。其中，VEGFR1和NRP-1都可以作为VEGF和VEGFB的受体发挥功能，且相比于VEGFR2，VEGF与VEGFR1结合活性更高，相当于是VEGFR2的结合能力的11倍，但是血管生成的主途径是通过VEGF与VEGFR2结合实现的[45]。图3VEGFs家族成员及受体[46]4.2VEGFAVEGFA全长为14kb，共有两个亚基，的亚基相对分子量介于18000-24000之间，每个亚基由两个相同的多肽链构成，通过二硫键结合，因此该功能性糖蛋白的相对分子量介于34000-46000之间，也是一种外分泌蛋白[47]，其基因结构和前体mRNA的组成如图所示（图4）：图4VEGF基因和VEGF前体mRNA[46]VEGFA主要分为四种同分异构体：VEGFA189，VEGFA121，VEGFA165，及VEGFA206[48]。其中VEGF165丢失exon6编码区，还有exon1，exon2，exon3，exon4，exon5，exon7，exon87个外显子编码区，但是是最重要的亚型，多数功能由这一亚型4VEGFs家族及其受体
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂联素调控脂质代谢的研究进展[J]. 唐妮,王书瑶,齐锦雯,吴源冰,李志琼. 畜牧兽医学报. 2018(12)
[2]白色脂肪棕色化的作用机制综述[J]. 明文娟. 辽宁体育科技. 2017(02)
[3]血管内皮生长因子促损伤脑内神经血管单元的重构[J]. 潘之光,毛颖,孙凤艳. 生理学报. 2017(01)
[4]吴茱萸碱对小鼠大脑及肩胛间棕色脂肪摄取18F-FDG的影响[J]. 冯悦,钟萌,张莉,朱艳,邱琳,陈跃. 第三军医大学学报. 2016(15)
[5]血管内皮细胞生长因子可溶性受体在肾脏疾病中的意义[J]. 安圆圆,孙立. 中国医学工程. 2015(08)
[6]支气管哮喘小鼠模型气道血管变化及其影响因子分析[J]. 苏新明,陈晓平,康健. 中国组织化学与细胞化学杂志. 2009(02)
[7]Clinical significance of the expression of isoform 165 vascular endothelial growth factor mRNA in noncancerous liver remnants of patients with hepatocellular carcinoma[J]. I-Shyan Sheen,Kuo-Shyang Jeng,Shou-Chuan Shih,Chih-Roa Kao,Wen-Hsing Chang,Horng-Yuan Wang,Tsang-En Wang,Li-Rung Shyung,Chih-Zen Chen. World Journal of Gastroenterology. 2005(02)
[8]血管内皮生长因子促血管形成作用及其调控[J]. 王建华,尹庆水,黄清春,吴岳嵩. 第二军医大学学报. 2004(02)
[9]VEGF及依据VEGF发展的肿瘤治疗新进展[J]. 邢飞虹. 国外医学(生理、病理科学与临床分册). 2003(04)
本文编号：3482881
【文章来源】：东北师范大学吉林省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
白色脂肪棕色化机制[9]
东北师范大学硕士学位论文4图2人和小鼠的脂联素基因启动子结构示意图[34]3.3脂联素的功能脂联素具有缓和炎症的能力，可能是通过调节脂质代谢，脂联素受体表现出神经酰胺酶活性来实现的，目前可视为是引发部分肥胖相关代谢性疾病的主要因素。有研究显示它的浓度在体内呈下降趋势，这一表现与其他脂肪因子相反，相比传统的抗高血压治疗，在胰岛素抵抗的治疗中显示出额外的优势。脂联素促进脂肪酸氧化。AdipoR1/AdipoR2作为脂联素结合蛋白，CK2A、PPL1和LKB1等作为上游因子在肝细胞，肌肉组织中激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)有关信号途径。乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和过氧化物酶体增物激活受体α(PPARα)是AMPK信号途径的下游因子，共同参与脂联素增强脂肪酸氧化的过程[36]。信号途径上下游关系如下所示：1)AdipoR1/2-AMPK-ACC2)AdipoR1/2-AMPK-PPARα3)AdipoR1/2-沉默信息调节因子1（SIRT1）-AMPK脂联素抑制脂肪形成。在小鼠实验中，注射脂联素会显著抑制脂肪的合成，从而显著降低血浆中血脂含量[37]。这一过程由肝激酶B1（LKB1），过氧化物酶体增殖物激活受体辅助活化因子1α（PGC-1α），固醇调节原件结合蛋白-1c（SREBP-1c），钙调素依赖蛋白激酶（CAMK）等因子参与这一通路的调控，相关信号途径上下游关系如下：1)AdipoR1-LKB1-AMPK-SREBP-1c2)AdipoR1-CaMKK-AMPK-SIRTI-PGC-1α3)AdipoR2—PPARα
东北师范大学硕士学位论文54.1VEGFs家族发现史血管内皮生长因子最先由牛垂体的腺泡中提取出[38]。因其促血管生成生物活性高，被命名为血管内皮生长因子(VEGF)[39]。亦称作血管通透性因子(VPF)[40]。VEGFs家族包括VEGFA,VEGFB,VEGFC,VEGFD和PIGF,相关受体包括（血管内皮生长因子1型受体（VEGF-receptor1，VEGFR1），VEGFR2,VEGFR3,神经纤毛蛋白1(neuropilin-1,NRP-1)和NRP-2[41-44]，它们的关系网如(图3)所示。其中，VEGFR1和NRP-1都可以作为VEGF和VEGFB的受体发挥功能，且相比于VEGFR2，VEGF与VEGFR1结合活性更高，相当于是VEGFR2的结合能力的11倍，但是血管生成的主途径是通过VEGF与VEGFR2结合实现的[45]。图3VEGFs家族成员及受体[46]4.2VEGFAVEGFA全长为14kb，共有两个亚基，的亚基相对分子量介于18000-24000之间，每个亚基由两个相同的多肽链构成，通过二硫键结合，因此该功能性糖蛋白的相对分子量介于34000-46000之间，也是一种外分泌蛋白[47]，其基因结构和前体mRNA的组成如图所示（图4）：图4VEGF基因和VEGF前体mRNA[46]VEGFA主要分为四种同分异构体：VEGFA189，VEGFA121，VEGFA165，及VEGFA206[48]。其中VEGF165丢失exon6编码区，还有exon1，exon2，exon3，exon4，exon5，exon7，exon87个外显子编码区，但是是最重要的亚型，多数功能由这一亚型4VEGFs家族及其受体
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂联素调控脂质代谢的研究进展[J]. 唐妮,王书瑶,齐锦雯,吴源冰,李志琼. 畜牧兽医学报. 2018(12)
[2]白色脂肪棕色化的作用机制综述[J]. 明文娟. 辽宁体育科技. 2017(02)
[3]血管内皮生长因子促损伤脑内神经血管单元的重构[J]. 潘之光,毛颖,孙凤艳. 生理学报. 2017(01)
[4]吴茱萸碱对小鼠大脑及肩胛间棕色脂肪摄取18F-FDG的影响[J]. 冯悦,钟萌,张莉,朱艳,邱琳,陈跃. 第三军医大学学报. 2016(15)
[5]血管内皮细胞生长因子可溶性受体在肾脏疾病中的意义[J]. 安圆圆,孙立. 中国医学工程. 2015(08)
[6]支气管哮喘小鼠模型气道血管变化及其影响因子分析[J]. 苏新明,陈晓平,康健. 中国组织化学与细胞化学杂志. 2009(02)
[7]Clinical significance of the expression of isoform 165 vascular endothelial growth factor mRNA in noncancerous liver remnants of patients with hepatocellular carcinoma[J]. I-Shyan Sheen,Kuo-Shyang Jeng,Shou-Chuan Shih,Chih-Roa Kao,Wen-Hsing Chang,Horng-Yuan Wang,Tsang-En Wang,Li-Rung Shyung,Chih-Zen Chen. World Journal of Gastroenterology. 2005(02)
[8]血管内皮生长因子促血管形成作用及其调控[J]. 王建华,尹庆水,黄清春,吴岳嵩. 第二军医大学学报. 2004(02)
[9]VEGF及依据VEGF发展的肿瘤治疗新进展[J]. 邢飞虹. 国外医学(生理、病理科学与临床分册). 2003(04)
本文编号：3482881
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/nfm/3482881.html
最近更新
教材专著
