AICAR调节骨骼肌细胞糖代谢机制中Tiam1的作用研究

发布时间：2021-11-14 11:13

　　目的:骨骼肌是人体最大的摄取餐后葡萄糖的组织,胰岛素促进骨骼肌摄取葡萄糖障碍在2型糖尿病发生发展过程中起关键作用,非胰岛素依赖方式促进骨骼肌摄取葡萄糖可有效预防和治疗2型糖尿病。运动或AMPK激活剂AICAR均通过AMPK促进骨骼肌摄取葡萄糖,此外,Rac1也参与运动调节骨骼肌葡萄糖摄取的作用。本课题组前期工作发现AICAR激活C2C12小鼠骨骼肌细胞Rac1,Rac1抑制剂Rac1 inhibitor II显著抑制AICAR促进的GLUT4转位,提示Rac1可能介导AICAR的作用。Rac是小G蛋白,其活化由Rac鸟苷交换因子（Rac-GEFs）调节,Tiam1和VAV2均可作为Rac-GEF激活Rac1,本研究探讨Tiam1和VAV2是否介导AICAR激活Rac1,促进骨骼肌细胞摄取葡萄糖的作用。内容:第一部分,应用AICAR孵育C2C12肌管细胞,Western blot检测Rac-GEF Tiam1和VAV2的蛋白及磷酸化水平。第二部分,应用药物抑制剂、腺病毒以及siRNA,上调或者下调AMPK或Tiam1,探讨AMPK与Tiam1的上下游关系:1.感染激活型AMPK腺病毒（A... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Westernblot检测C2C12肌管细胞中Tiam1和VAV2

细胞不同时间，Western blomean±SE 表示，**** p<0.0胞 VAV2 蛋白酪氨酸磷酸化水平，但有研究表明 VAV AICAR 是否影响 C2C12 肌细胞无血清培基培养2 h，抗体，阴性对照则加入 IgG结果如图 2 所示，阴性对照AV2 蛋白酪氨酸磷酸化没 的磷酸化，VAV2 并不参与lgG Bas AICyr2

stern blot 检测激活型 AMPK 腺病毒感效率光蛋白的激活型 AMPK 腺病毒感染 C光蛋白的表达，Western blot 检测激活平。病毒感染 C2C12 细胞对 Tiam1 的影响毒剂量和时间感染 C2C12 成肌细胞，病毒为阴性对照。荧光显微镜观察绿腺病毒是否感染成功。提取细胞蛋白如图 4 所示，在 C2C12 成肌细胞中感色荧光蛋白的表达。Western blot 检测（p<0.01），为对照组的 1.86±0.22 倍


本文编号：3494533