微针传递生物大分子药物治疗类风湿性关节炎的研究

发布时间：2021-11-26 12:03

　　研究目的:生物大分子药物由于其良好的疗效和较低的毒副作用,已成为治疗类风湿性关节炎（RA）的重要手段。然而,此类药物需要长期注射给药,由此引起的疼痛、局部红肿、以及增大的感染风险,大大降低了患者的顺应性。本研究拟通过制备溶解型微针和水凝胶微针,并以依那西普和抗DEK蛋白核酸适配体DTA为模型药物,探索微针经皮传递生物大分子药物治疗RA的可行性。研究方法:本研究先将透明质酸（HA）与甲基丙烯酸酐进行接枝反应得到甲基丙烯酸化透明质酸（mHA）,并使用核磁共振仪检测其接枝率;再通过模具法制备出溶解型紫外交联微针用于经皮传递依那西普;使用光学显微镜、扫描电镜、质构仪表征微针的形态和力学特性;利用皮肤穿刺实验、台盼蓝染色、H&E染色切片、针体溶解实验以及皮肤恢复实验考察微针的皮肤扎入性能、针体溶解释药性能和对皮肤的侵入性;通过动态光散射和圆二色谱检测依那西普在紫外照射下的活性改变;使用磺酰罗丹明B（SRB）荧光标记依那西普和荧光定量的方法检测微针的载药量;构建佐剂诱导型关节炎小鼠模型并监测其体重、足部体积、炎症因子和病理切片以综合评定微针传递依那西普的治疗效果。另外,通过延长接枝反应时间... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．１微针的分类：（Ａ）固体型微针；（Ｂ）包覆型微针；（Ｃ）溶解型微针；（Ｄ）空心微??针；（Ｅ）膨胀性微针??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆＭＮ：?（Ａ）?ｓｏｌｉｄ?ＭＮ；?（Ｂ）?ｃｏａｔｅｄ?ＭＮ；?（Ｃ）．?ｄｉｓｓｏｌｖａｂｌｅ?ＭＮ；?（Ｄ）?ｈｏｌｌｏｗ??

?第一章前言???／?ＲＡ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ??１?ｗ靖ｒ卿＾?＼?／??＼?Ｄｉｓｓｏｖａｂｌｅ?ＭＮ?＇｜?Ｈｙｄｒｏｇｅｌ?ＭＮ??图１．２课题设计思路??Ｆｉｇｕｒｅ?１．２?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐｒｏｊｅｃｔ?ｄｅｓｉｇｎ．??７??

??３．?１?ｍＨＡ的合成条件确疋??本研宄主要通过调节接枝反应时间来调整ＨＡ的接枝率。由于酸酐在水中??的溶解性较差，无法充分与溶于水中的ＨＡ反应。Ｎ，Ｎ’－二甲基甲酰胺能起到共??溶剂的作用，增加酸酐的溶解度『６２］，可显著提高接枝效率。ｍＨＡ可以将其溶于??交联液中并进行紫外交联观察足否形成水凝胶以简单快速地判断接枝反应是否??成功。将ｍＨＡ溶于交联液后，在紫外光激发下，１?２９５９能快速形成丨＇丨由基，并??催化ｍＨＡ接枝上的乙烯基与ＭＢＡ发生交联反应，形成水凝胶［Ｗ１。如图２．１所??示，宋交联的ｍＨＡ溶液呈液态（左图），进样瓶倾斜时，液体发生流动。经紫外??交联后，ｎｉＨＡ溶液Ｈ丨形成水凝胶，呈现固态，瓶体倾斜吋液面仍垂直子玻璃壁，??不发生流动（右图）。用玻璃棒轻触凝胶，发现凝胶不同于溶液的粘稠状，呈光??滑的固体状。这表明ＨＡ成功接枝上甲基丙烯酸酯基团。核磁共振仪能准确扫描??出氢原子的化学位移从而确认氢原子所处的化学环境，以此判断出其所属的基??团，并根据其峰面积可确定其在整个分子中所占比例１６４１。丨ＩＡ和ｍＨＡ的核磁结??果显示，与丨１Ａ核磁图谱相比，ｍＨＡ在５．７４或６．１８的化学位移处存在两个峰，??均代表接枝上的甲基丙烯酸酯的甲基氢，而１．９９处的峰代表ＨＡ单糖单元ＣＨ３ＣＯ??基团上的氢（图２．２）。两种氢原子的峰面积之比表示ＨＡ分子中接枝上甲基丙烯??酸酯基团的比例，即接枝率。经计算，接枝反应进行８?ｈ，产物的接枝率约为２０％。??图２．１?ｍＨＡ溶液经紫外交联形成水凝胶??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｍＨＡ?ｈｙｄｒｏｇｅｌ?ｂｙ?ＵＶ?ｃｒｏｓｓｌｉｎｋ．??２


本文编号：3520107