艾拉莫德调控miR-146a介导的IRAK1/TRAF6/JNK1通路治疗类风湿关节炎的机制研究
发布时间:2021-11-27 03:52
类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是以对称性多关节炎为临床特征的慢性炎症性疾病。病理特征是关节滑膜的炎症和增生,伴骨、软骨的侵蚀。其发病机制尚不明确,表观遗传学可能是未来的研究方向。RA成纤维样滑膜细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS)作为滑膜炎的主要组成细胞,它的侵袭和抗凋亡特性,以及调节免疫反应和慢性炎症的能力,最终使它成为关节炎的主要参与者。了解RA-FLS的表观遗传特性可能有助于我们识别RA新的诊断和预后标志物以及治疗靶点。近年来,micro RNA(mi RNA)在RA-FLS中的功能研究成为RA机制研究的热点。我们前期研究发现mi R-146a在RA患者的成纤维样滑膜细胞中表达下调,这引起了我们的兴趣。mi R-146a在RA中到底扮演一个什么角色呢?是促炎基因还是抑炎基因呢?生物信息学预测和双荧光素酶报告基因都证实白介素-1受体相关激酶1(Interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(Tumor necrosis factor r...
【文章来源】:中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校
【文章页数】:112 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
RA-FLS和Ctrl-FLS细胞
RA-FLS和Ctrl-FLS中miR-146amRNA水平
??竟?泶锒哉?质粒组,Mimic-miR-146a—转染miR-146a过表达质粒组,Inhibitor-NC—转染干扰对照质粒组,Inhibitor-miR-146a—转染miR-146a干扰质粒组。转染24h后采用RT-qPCR检测miR-146a表达量,以检测质粒转染效率。由图1-3可见,与Mimic-NC组相比,Mimic-miR-146a组miR-146a表达量明显上升(p<0.001),表明miR-146a过表达质粒转染成功,miR-146a表达量显著增加;另一方面,与Inhibitor-NC组相比,Inhibitor-miR-146a组miR-146a表达量明显下降(p<0.001),表明miR-146a干扰质粒转染成功,miR-146a表达受到显著抑制。图1-3miR-146a质粒转染RA-FLS(四)miR-146a对RA-FLS增殖的作用在RA-FLS转染质粒后,分别在0h、24h、48h和72h以CCK8法检测细胞活力。各组在各时间点检测吸光度(OD)值如表1-1所示,生长曲线如图1-4所示。结果显示,与Mimic-NC组相比,Mimic-miR-146a组在0hOD值相等,没有统统计学差异(p>0.05);在24h和48h时,Mimic-miR-146a组OD值减低,但没有统计学差异(p>0.05);在72h时,Mimic-miR-146a组OD值显著减低,具有统计学差异(p<0.05)。同时,结果还显示,与Inhibitor-NC组相比,0h时Inhibitor-miR-146a组OD值基本一致,没有统计学差异(p>0.05);24h时Inhibitor-miR-146a组OD值升高,但没有统计学差异(p>0.05);在48h和72h时,Inhibitor-miR-146a组明显升高,并且具有统计学意义(p<0.05)。结果说明,与Mimic-NC组相比,Mimic-miR-146a组增殖能力减弱;另外,与Inhibitor-NC组相比,Inhibitor-miR-146a组增殖能力增强。说明过表达miR-146a能抑制RA-FLS的增殖能力,而抑制miR-146a会增强RA-FLS的增殖能力。
本文编号:3521512
【文章来源】:中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校
【文章页数】:112 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
RA-FLS和Ctrl-FLS细胞
RA-FLS和Ctrl-FLS中miR-146amRNA水平
??竟?泶锒哉?质粒组,Mimic-miR-146a—转染miR-146a过表达质粒组,Inhibitor-NC—转染干扰对照质粒组,Inhibitor-miR-146a—转染miR-146a干扰质粒组。转染24h后采用RT-qPCR检测miR-146a表达量,以检测质粒转染效率。由图1-3可见,与Mimic-NC组相比,Mimic-miR-146a组miR-146a表达量明显上升(p<0.001),表明miR-146a过表达质粒转染成功,miR-146a表达量显著增加;另一方面,与Inhibitor-NC组相比,Inhibitor-miR-146a组miR-146a表达量明显下降(p<0.001),表明miR-146a干扰质粒转染成功,miR-146a表达受到显著抑制。图1-3miR-146a质粒转染RA-FLS(四)miR-146a对RA-FLS增殖的作用在RA-FLS转染质粒后,分别在0h、24h、48h和72h以CCK8法检测细胞活力。各组在各时间点检测吸光度(OD)值如表1-1所示,生长曲线如图1-4所示。结果显示,与Mimic-NC组相比,Mimic-miR-146a组在0hOD值相等,没有统统计学差异(p>0.05);在24h和48h时,Mimic-miR-146a组OD值减低,但没有统计学差异(p>0.05);在72h时,Mimic-miR-146a组OD值显著减低,具有统计学差异(p<0.05)。同时,结果还显示,与Inhibitor-NC组相比,0h时Inhibitor-miR-146a组OD值基本一致,没有统计学差异(p>0.05);24h时Inhibitor-miR-146a组OD值升高,但没有统计学差异(p>0.05);在48h和72h时,Inhibitor-miR-146a组明显升高,并且具有统计学意义(p<0.05)。结果说明,与Mimic-NC组相比,Mimic-miR-146a组增殖能力减弱;另外,与Inhibitor-NC组相比,Inhibitor-miR-146a组增殖能力增强。说明过表达miR-146a能抑制RA-FLS的增殖能力,而抑制miR-146a会增强RA-FLS的增殖能力。
本文编号:3521512
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