n-3脂肪酸对PM 2.5 暴露的糖尿病大鼠氧化应激和炎症的影响
发布时间：2021-12-02 13:50
目的本研究旨在探讨环境细颗粒物(fine particulate matter,PM2.5)暴露对2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）大鼠炎症反应和氧化应激的影响,以及n-3多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acids,PUFA）干预对其是否有改善作用。方法1.动物分组和处理:在本实验中通过腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）和高脂高糖饲料喂养的方法建立T2DM大鼠模型,以随机血糖≥16.7mmol/L为T2DM建模成功的标准。将70只雄性四周龄SD大鼠根据体重随机分为2组:对照组（NC）8只,造模组（MD）62只,并分别饲喂普通饲料和高脂高糖饲料6周,对MD组大鼠进行一次性腹腔注射STZ（30 mg/kg）。1周后,将T2DM造模成功的大鼠（共54只,造模成功率为87%）按照血糖随机分为T2DM对照组、PM2.5气管滴注对照组、玉米油对照组（corn oil control group,CO）、鱼油（fishoil,FO）低、中、高剂量组（FOL、FOM、F...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．１?ＢＣＡ蛋白定量标准曲线??２．２．１３氧化应激指标的检测??
?材料与方法???体表面，再加入待测标本（抗原），形成抗原抗体复合物，洗涤未结合的物质，??然后加入酶标二抗，三者形成抗体－抗原－酶复合物，最后加入酶作用的底物，根??据显色反应来进行抗原的定量分析。??试剂盒组成：微孔酶标板、标准品、样本稀释液、检测抗体－ＨＲＰ、２〇ｘ洗涤??缓冲液、底物Ａ、底物Ｂ、终止液、封板膜。??实验步骤：试剂盒从冷藏环境中取出在室温平衡２０?ｍｉｎ后使用。将２０倍浓??缩洗涤液用纯水２０倍稀释后备用。在酶标板上设置标准品孔和样本孔，在各标??准品孔和样本孔分别加入５０?ｐＬ梯度浓度标准品和待测样本。再每孔加入１００?ｐＬ??辣根过氧化物酶标记的抗体，混匀后，将反应孔用封板膜封住，于３７°Ｃ恒温箱??温育６０?ｍｉｎ。洗板５次后，依次每孔加入底物Ａ、Ｂ各５０?ｐＬ。３７°Ｃ避光孵育１５??ｍｉｎ后，每孔各加入５０队终止液，于４５０?ｎｍ波长处测定各孔ＯＤ值。以所测??标准品的ＯＤ值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，绘制标准曲线，见图??２．２－２．６，得到直线回归方程，将样品的ＯＤ值代入方程，计算出样品的浓度。??１８０??１６０?．?ｙ?＝?１５４．１９ｘ－１９．４１??Ｒ２?＝?０．９９７?＾??１４０?？??？１２０??苞１〇〇．?／??制?ｚ??＾?６０??４０?■?ＪＴ??２０?＊??０?０．２?０．４?０．６?０．８?１?１．２?１．４??〇Ｄ４５０ｎｍ??图２．２血清ＴＮＦ－ａ标准曲线??１５??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]糖料甘蔗品质评定新指标—甘蔗葡聚糖的形成、危害及检测方法[J]. 胡玉玫,蚁细苗,曾练强,李凯,梁达奉. 甘蔗糖业. 2012(02)
硕士论文
[1]n-3脂肪酸对PM2.5暴露的T2DM大鼠部分代谢指标的影响[D]. 宋春蕾.郑州大学 2017
[2]DHA抑制2型糖尿病大鼠肝脏炎症改善胰岛素抵抗的机制研究[D]. 何天博.河北医科大学 2013
本文编号：3528567
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．１?ＢＣＡ蛋白定量标准曲线??２．２．１３氧化应激指标的检测??
?材料与方法???体表面，再加入待测标本（抗原），形成抗原抗体复合物，洗涤未结合的物质，??然后加入酶标二抗，三者形成抗体－抗原－酶复合物，最后加入酶作用的底物，根??据显色反应来进行抗原的定量分析。??试剂盒组成：微孔酶标板、标准品、样本稀释液、检测抗体－ＨＲＰ、２〇ｘ洗涤??缓冲液、底物Ａ、底物Ｂ、终止液、封板膜。??实验步骤：试剂盒从冷藏环境中取出在室温平衡２０?ｍｉｎ后使用。将２０倍浓??缩洗涤液用纯水２０倍稀释后备用。在酶标板上设置标准品孔和样本孔，在各标??准品孔和样本孔分别加入５０?ｐＬ梯度浓度标准品和待测样本。再每孔加入１００?ｐＬ??辣根过氧化物酶标记的抗体，混匀后，将反应孔用封板膜封住，于３７°Ｃ恒温箱??温育６０?ｍｉｎ。洗板５次后，依次每孔加入底物Ａ、Ｂ各５０?ｐＬ。３７°Ｃ避光孵育１５??ｍｉｎ后，每孔各加入５０队终止液，于４５０?ｎｍ波长处测定各孔ＯＤ值。以所测??标准品的ＯＤ值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，绘制标准曲线，见图??２．２－２．６，得到直线回归方程，将样品的ＯＤ值代入方程，计算出样品的浓度。??１８０??１６０?．?ｙ?＝?１５４．１９ｘ－１９．４１??Ｒ２?＝?０．９９７?＾??１４０?？??？１２０??苞１〇〇．?／??制?ｚ??＾?６０??４０?■?ＪＴ??２０?＊??０?０．２?０．４?０．６?０．８?１?１．２?１．４??〇Ｄ４５０ｎｍ??图２．２血清ＴＮＦ－ａ标准曲线??１５??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]糖料甘蔗品质评定新指标—甘蔗葡聚糖的形成、危害及检测方法[J]. 胡玉玫,蚁细苗,曾练强,李凯,梁达奉. 甘蔗糖业. 2012(02)
硕士论文
[1]n-3脂肪酸对PM2.5暴露的T2DM大鼠部分代谢指标的影响[D]. 宋春蕾.郑州大学 2017
[2]DHA抑制2型糖尿病大鼠肝脏炎症改善胰岛素抵抗的机制研究[D]. 何天博.河北医科大学 2013
本文编号：3528567
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