自噬机制在白藜芦醇保护高脂饮食小鼠睾酮合成功能中的作用

发布时间：2021-12-23 02:50

　　背景:现代社会由于过度食用高脂食物造成肥胖人群越来越多。过量的膳食脂肪会增加脂肪和非脂肪组织的脂质含量,并通过脂肪毒性引起组织慢性炎症,导致细胞功能障碍和死亡。线粒体功能异常和过量的氧化应激可能是肥胖等因素导致迟发性性腺功能低下的主要发病机制。由于睾酮合成限速步骤在线粒体完成,且睾丸间质细胞具有较高的基础自噬活性,研究表明白藜芦醇（RSV）对代谢性疾病的治疗效应与其调节自噬作用有关,但自噬机制在高脂饮食（HFD）导致肥胖小鼠睾酮合成减退及RSV保护效应中的作用亟待研究。目的:研究高脂饮食引起的肥胖相关代谢性疾病对睾酮合成的不利影响,以及白藜芦醇对男性生殖系统保护效应中的自噬机制及作用,并从体外调节TM3细胞的自噬水平及诱导氧化应激,进一步研究自噬介导的白藜芦醇减轻线粒体功能异常和氧化应激、保护睾酮合成通路的机制,从而阐明自噬在白藜芦醇保护高脂饮食小鼠睾丸Leydig细胞功能中的作用。方法:60只8周龄的雄性C57BL/6J雄鼠,随机分为四组:分别给以高脂饮食（HFD group）或高脂饮食添加白藜芦醇的（HFD+RSV group,400 mg/kg/day）灌胃,对照组用基础饲粮不添... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Ctrl组（正常饮食），Ctrl+RSV组（正常饮食+白藜芦醇），HFD组（高脂饮食），HFD+RSV组（高脂饮食+白藜芦醇）小鼠睾丸组织HE染色结果

安徽医科大学硕士学位论文30表达弱于Ctrl组，在HFD+RSV组中表达较HFD组有明显上调。由于Ctrl+RSV组的参数和睾丸结构与Ctrl组没有显著差异，因此未进一步测试其他指标。图2Ctrl组（正常饮食），Ctrl+RSV组（正常饮食+白藜芦醇），HFD组（高脂饮食），HFD+RSV组（高脂饮食+白藜芦醇）小鼠睾丸组织免疫组化3β-HSD的染色结果，Leydig细胞阳性染色部分呈棕色颗粒，生精小管呈阴性。Fig.2Theresultsof3β-HSDantibodylabeledLeydigcellsbyimmunohistochemistryinCtrlgroup,Ctrl+RSVgroup，HFDgroupandHFD+RSVgroup，whichwerestainedbrown..Scalebar=50μm.3.1.3白藜芦醇对小鼠睾酮合成能力的保护作用体外分离小鼠Leydig细胞后，通过放射免疫测定法检测上清液中的睾酮水平，与Ctrl组相比，HFD组显著下调，而与HFD组相比，在HFD+RSV组中上调。加入胆固醇和人绒毛膜促性腺激素（HCG）分别刺激睾酮的合成和分泌。结果表明，三组小鼠的睾丸间质细胞分泌的睾酮水平显著增加，两组之间的差异与血清睾酮水平的变化一致（图3）。

安徽医科大学硕士学位论文31图3原代细胞功能实验，将提取出的小鼠睾丸间质细胞悬液分为（a）阴性对照组（-），（b）胆固醇治疗组（22-Hydroxycholesterol2μM）和（c）HCG组（10ng/ml），三组不同处理因素刺激睾酮分泌功能后，在37°C的振荡水浴中浸泡3小时。分离上清液，将其用于放射免疫测定（RIA）以测量睾酮。（均数±SD）显著差异表示如下：与Ctrl组相比，*P<0.05,；与HFD组相比，#P<0.05。Fig.3Primarycellfunctionexperiments,themousetesticularmesenchymalcellsuspensionwasdividedinto(a)negativecontrolgroup(-),(b)cholesteroltreatmentgroup(22-Hydroxycholesterol2μM)and(c)HCGgroup(10ng/ml),threegroupsofdifferentprocessingfactorsstimulatetestosteronesecretionfunction,soakinashakingwaterbathat37°Cfor3hours.Thesupernatantwasseparatedandusedinaradioimmunoassay(RIA)tomeasuretestosterone.(meanData±SD)Significantdifferenceswereexpressedasfollows:*P<0.05versusCtrlgroup;#P<0.05versusHFDgroup.


本文编号：3547627