脂肪干细胞来源外泌体携带miR-27抑制白色脂肪的棕色化

发布时间：2021-12-24 12:17

　　目的探讨脂肪干细胞（ASC）来源的外泌体在白色脂肪棕色化中的作用。方法分离培养并鉴定小鼠ASC细胞;慢病毒转染构建过表达miR-27的ASC细胞;超高速离心提取正常及过表达miR-27的ASC细胞分泌的外泌体,实时荧光定量核酸扩增（qRT-PCR）分析外泌体中miR-27的表达量;高脂喂食构建肥胖小鼠模型,分别注射过表达miR-27外泌体（过表达组）、正常ASC外泌体（正常表达组）及生理盐水（对照组）,在寒冷暴露条件下监测体质量变化;剥离小鼠附睾皮下脂肪组织和肩胛骨脂肪组织,比较组织大小,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测解偶联蛋白1（UCP1）、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ（PPARγ）、含PR结构域的锌指蛋白16（PRDM16）、过氧化物酶体增殖子激活受体γ共激活因子1α（PGC-1α）的表达。结果成功提取ASC及其外泌体,并成功转染miR-27;ASC及其外泌体中的miR-27显著高于白色脂肪组织（P<0.05）。与对照组相比,过表达组及正常表达组的小鼠体质量下降幅度小,随时间的增加效果更加明显（P<0.05）。过表达组及正常表达组的小鼠的附睾皮下脂肪组织... 

【文章来源】：天津医药. 2020,48(03)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

ASC中外泌体的鉴定

免疫印迹法检测UCP1、PPARγ、PRDM16、PGC-1α的表达

ASC刚贴壁的细胞呈圆形，培养24 h后细胞呈长梭形；培养第3代的ASC的形态，见图1。流式细胞仪检测显示，CD34、CD45、CD133低表达，阳性率分别为6.43%、6.35%、0.09%;CD105与Sca-1高表达，阳性率为93.71%、92.62%，见图2。2.2 外泌体的鉴定

【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-582-5p靶向抑制Rab27a对肺癌细胞生物学行为的影响[J]. 叶璐,母丹,杨莉,付波,王敏.  临床肿瘤学杂志. 2019(02)
[2]miR-27a对胃癌细胞凋亡影响的体外研究[J]. 张悦,管叙文,王婧雅,黄鼎智.  天津医科大学学报. 2018(06)
[3]miR-27a、miR-27b和miR-378在不同猪种皮下脂肪中的差异表达研究[J]. 陶璇,顾以韧,杨雪梅,梁艳,钟志君,杨跃奎,曾凯,陈晓晖,王言,龚建军,应三成,王卫,吕学斌.  中国畜牧杂志. 2018(11)

博士论文
[1]脂肪源性含miR-27a外泌体通过抑制PPARγ诱导骨骼肌胰岛素抵抗的作用机制研究[D]. 于洋.吉林大学 2018



本文编号：3550470