脂肪细胞通过CXCL12/CXCR4信号通路促进破骨细胞的分化和功能

发布时间：2022-01-06 06:43

　　目的:本实验旨在探讨脂肪细胞对破骨细胞分化及其功能活性的影响,解析其可能的分子机制。方法:ST2小鼠间充质干细胞成脂诱导21天,分化后的ST2-脂肪细胞于无血清α-MEM中培养14小时后收集其培养上清。收集后的脂肪细胞培养上清与α-MEM以1:1比例混合制成脂肪细胞条件培养基（ADIPO CM）,ELISA检测ADIPO CM中趋化因子CXCL12含量。Cell Counting Kit-8（CCK-8）实验分析CXCL12对单核巨噬细胞（RAW264.7）和骨髓巨噬细胞（BMMs）增殖活性的影响。将RAW264.7细胞接种于含有RANKL的培养基,BMMs接种于含有RANKL和M-CSF的培养基中,行破骨细胞分化诱导实验。根据培养基中加入或不加入CXCL12、AMD3100,将破骨细胞分化实验分为4组:对照组（CONTROL）、脂肪细胞条件培养基组（ADIPO CM）、CXCL12组和AMD3100组,培养第4天进行TRAP染色并计数TRAP阳性的多核破骨细胞。在培养第7天,进行van kossa染色并分析破骨细胞功能活性。q RT-PCR及Western blot分别检测破骨细胞N... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ST2细胞成脂诱导前后油红O染色

36 2. 脂肪细胞条件培养基（ADIPO CM）促进破骨细胞分化。A：RAW264.7 细胞分别于普通基（CONTROL）和脂肪细胞条件培养基（ADIPO CM）中行破骨细胞诱导 4 天后的 TRAP。B：BMMs 分别于普通培养基（CONTROL）和脂肪细胞条件培养基（ADIPO CM）中行破胞诱导 4 天后的 TRAP 染色。C：TRAP 阳性破骨细胞数量。D：破骨细胞面积。红色箭头为形成的破骨细胞。与对照组相比*p＜0.05；**p＜0.01。

3. 脂肪细胞条件培养基（ADIPO CM）促进破骨细胞骨吸收功能。A：RAW2647 细胞分别通培养基（CONTROL）和脂肪细胞条件培养基（ADIPO CM）中行破骨细胞诱导 7 天后的 ossa 染色。B：BMMs 分别于普通培养基（CONTROL）和脂肪细胞条件培养基（ADIPO C行破骨细胞诱导 7 天后的 Von Kossa 染色。C：破骨细胞骨吸收面积所占比例。黑色箭头为收区域。**p＜0.01。图 4.ADIPO CM 和α-MEM(CONTROL)中 CXCL12 含量。**p<0.01


本文编号：3571948