依达拉奉对过氧化氢诱导的成骨细胞氧化应激损伤的抑制效果

发布时间：2022-01-13 11:01

　　目的研究依达拉奉（EDA）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的成骨细胞氧化应激损伤的影响,为骨质疏松的治疗提供依据。方法取24 h内新生SD大鼠头盖骨进行成骨细胞原代培养,传代至第3代进行成骨细胞鉴定。将鉴定后的成骨细胞分别用H₂O₂或（和）EDA以不同浓度作用2、4、6 h进行MTT法检测细胞增殖情况;选择合适的作用浓度和作用时间进行H₂O₂诱导成骨细胞氧化损伤模型的建立,测定超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、碱性磷酸酶（ALP）等指标,分析EDA对H2O2诱导成骨细胞氧化应激损伤的影响。同时通过免疫印迹法测定药物处理分组后bax,bcl-2凋亡相关蛋白的变化。用SPSS 23.0软件进行方差分析。结果 400μmol/L H₂O₂作用4 h是建立成骨细胞氧化应激模型的适宜浓度和作用时间。MTT显示,不同浓度（10、20、40、80μmol/L）EDA作用2、4、6 h成骨细胞成活率均高于空白组,差异均有统计... 

【文章来源】：中国慢性病预防与控制. 2020,28(10)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

不同组成骨细胞MTT检测细胞成活率

H2O2组MDA浓度较空白对照组升高，SOD活力较空白对照组明显下降，差异均有统计学意义（P<0.05），氧化应激模型成立。将成骨细胞预先用EDA(0、10、20、40、80μmol/L）处理，然后建立成骨细胞氧化应激模型，MDA浓度随EDA浓度增加而逐渐下降，SOD活力则逐渐升高，差异均有统计学意义（P<0.05），见图3和图4。图4 双氧水（H2O2）或（和）依达拉奉（EDA）处理后成骨细胞的超氧化物歧化酶（SOD）检测

western blot结果显示，成骨细胞在EDA处理后，进行H2O2诱导成骨细胞氧化应激损伤，bax蛋白表达随EDA浓度增加而减少，条带灰度值差异有统计学意义（P<0.05）；凋亡相关蛋白bcl-2蛋白表达随EDA浓度增加而增加，条带灰度值差异有统计学意义（P<0.05),bcl-2与bax比值符合抗凋亡机制，见图6。3 讨论


本文编号：3586294