DHA和EPA调节3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的作用差异研究
发布时间:2022-01-28 00:18
目的慢性非传染性疾病(Noncommunicablediseases,NCDs)已成为不容忽视的全球性公共卫生问题。改善脂肪组织胰岛素抵抗(Insulinresistance,IR)在NCDs的早期防治中发挥重要的作用。二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)和二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid,EPA)对IR的调节作用备受关注,但两者调节脂肪细胞IR是否存在差异尚不明确。本研究探讨DHA和EPA调节脂肪细胞IR的作用差异和剂量效应关系。研究结果可为NCDs的早期防治提供新思路和科学依据。方法3T3-L1前体脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞后,使用5、10、15、20ng/mL TNF-α处理脂肪细胞48h。GOD-POD法测定糖摄取量,Real-time PCR和Western blot测定胰岛素信号通路关键分子,确定TNF-α诱导脂肪细胞IR的最佳浓度。不同浓度DHA或EPA(25、50、100、200、400μmol/L)处理IR脂肪细胞24h,BSA处理作为对照组。MTT法测定细胞活性,GOD-POD法测定细胞糖摄取量,油红O染色定...
【文章来源】:南方医科大学广东省
【文章页数】:83 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图3-1脂肪细胞的诱导分化和鉴定??Fig.3-1?Differentiation?and?identification?of?of?adipocytes??3T3-L1前体脂肪细胞(A)?;?3T3-L1前体脂肪细胞达到接触抑制(B);??成肪胞(C);成熟脂肪细胞使用油红0染色进行鉴定(D)??
?第三章结果???响(图3-2)。结果显示,各浓度TNF-a处理48h后,处理组细胞活性与Con组??相比均无统计学差异(P>0.05)。??150-??〇??〇?1?00?-?丨?I?-T-??卜1MI??u?墨?■?J?…?T?I??Con?5?10?15?20??Concentration(ng/m?L)??图3-2不同浓度TNF-a处理48h对细胞活性的影响(mean士SD)??Fig.3-2?Effects?of?different?concentrations?of?TNF-a?on?3T3-L1?preadipocytes?(mean?土?SD)??Con:对照组;n=5??3.2.2不同浓度TNF-a对脂肪细胞糖摄取的影响??使用5、10、15、20ng/mLTNF-ot?(含10%FBS培养基)分别处理脂肪细胞??24h,随后将培养液分别换为5、10、15、20ng/niLTNF-a?(无血清培养基)继续??处理脂肪细胞24h,同时设立空白对照组。检测脂肪细胞胰岛素刺激糖摄取量(图??3-3)。结果显示,5、10ng/mLTNF-ot处理48h后,脂肪细胞胰岛素刺激糖摄取??量均较Con组显著降低(P<0.01)。同时,10ng/mLTNF-a处理组糖摄取量显著??低于5ng/mLTNF-a处理组(P<0.01)。故本实验选取10ng/mLTNF-a诱导脂肪??细胞IR。??38??
?第三章结果???A??口?Coti???|?j??|?t〇B?fl?f1]??a?i?I?.??■』—,IE?.1.1.?j??^S-1?PI3K?m?GLUT4??B?广?1,5?n?J=i?Co?n??W?ma?TNF-a??识si?萎??PI3K?l?10.?i?i?psj?^?X??t-Akt?I?os?B?t?I?^?^??gi-ut4?i?_?I?I?I?I?画??&-actin?cr?W?J?[?]?|??Con?TNF-a?irsi?PI3K?t-Akt?p-m?GIUT4??图3-4TNF-ot?(lOng/mL)处理48h对细胞胰岛素信号通路的影响(meanrtSD)??Fig.3-4?Effects?of?TNF-a?(lOng/mL)?on?insulin?signaling?pathway?in?3T3-L1?adipocytes??(mean?土?SD)??a:与?Con?相比?P<0.05;?b:与?Con?相比尸<0.01;?Con:对照组;n=3??3.3不同浓度DHA和EPA对细胞活性的影响??使用lOng/mLTNF-ct?(含10%FBS培养基)处理前体脂肪细胞24h,随后使??用?25、50、100、200、400pmol/LDHA?或?EPA?与?10ng/mLTNF-a?(无血清培养??基)联合处理前体脂肪细胞24h,BSA处理作为对照。MTT法检测细胞活性(图??3-5)。结果显示,各浓度DHA和EPA均无明显细胞毒性。??40??
【参考文献】:
期刊论文
[1]国务院关于实施健康中国行动的意见[J]. 中国公共卫生管理. 2019(04)
[2]肥胖相关性胰岛素抵抗发生机制[J]. 余鹏,袁刚. 华南国防医学杂志. 2017(03)
本文编号:3613339
【文章来源】:南方医科大学广东省
【文章页数】:83 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图3-1脂肪细胞的诱导分化和鉴定??Fig.3-1?Differentiation?and?identification?of?of?adipocytes??3T3-L1前体脂肪细胞(A)?;?3T3-L1前体脂肪细胞达到接触抑制(B);??成肪胞(C);成熟脂肪细胞使用油红0染色进行鉴定(D)??
?第三章结果???响(图3-2)。结果显示,各浓度TNF-a处理48h后,处理组细胞活性与Con组??相比均无统计学差异(P>0.05)。??150-??〇??〇?1?00?-?丨?I?-T-??卜1MI??u?墨?■?J?…?T?I??Con?5?10?15?20??Concentration(ng/m?L)??图3-2不同浓度TNF-a处理48h对细胞活性的影响(mean士SD)??Fig.3-2?Effects?of?different?concentrations?of?TNF-a?on?3T3-L1?preadipocytes?(mean?土?SD)??Con:对照组;n=5??3.2.2不同浓度TNF-a对脂肪细胞糖摄取的影响??使用5、10、15、20ng/mLTNF-ot?(含10%FBS培养基)分别处理脂肪细胞??24h,随后将培养液分别换为5、10、15、20ng/niLTNF-a?(无血清培养基)继续??处理脂肪细胞24h,同时设立空白对照组。检测脂肪细胞胰岛素刺激糖摄取量(图??3-3)。结果显示,5、10ng/mLTNF-ot处理48h后,脂肪细胞胰岛素刺激糖摄取??量均较Con组显著降低(P<0.01)。同时,10ng/mLTNF-a处理组糖摄取量显著??低于5ng/mLTNF-a处理组(P<0.01)。故本实验选取10ng/mLTNF-a诱导脂肪??细胞IR。??38??
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【参考文献】:
期刊论文
[1]国务院关于实施健康中国行动的意见[J]. 中国公共卫生管理. 2019(04)
[2]肥胖相关性胰岛素抵抗发生机制[J]. 余鹏,袁刚. 华南国防医学杂志. 2017(03)
本文编号:3613339
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