优化3T3L1细胞成脂诱导模型并初步探讨miR-222-3p对脂肪生成的作用
发布时间：2022-02-13 12:08
一、研究背景肥胖是由机体能量摄入超过能量消耗而造成的一类代谢综合征,具有白色脂肪组织（WAT）过度沉积、中性脂肪细胞异常增殖及分化失衡的主要表现。同时由于脂肪组织具备调节体温、储存能量、缓冲机械冲击等作用,而肥胖加剧了脂肪组织的炎症效应,致使一些心血管疾病如高血压、血栓等的发病率同死亡率都增高。细胞生物学方面,前脂肪细胞是一类同时具有增殖及分化为成熟脂肪细胞能力的前体细胞,此种前体细胞在不同的生长因子、激素等的作用下,经历有丝分裂克隆期、生长停滞期、进一步的克隆期、终末分化四个阶段,细胞本身的成纤维状态发生改变,通过胞质内甘油三酯聚集形成成熟脂肪细胞,这一过程,称为“成脂分化”,该过程一直是肥胖研究领域的热点。为了能够直观地了解细胞分化内部脂质累积的过程,需要在体外建立数量可控,分化较为稳定的成熟脂肪细胞分化模型。小鼠的3T3L1细胞源于18天左右胎龄的Swiss小鼠胚胎,能够在适当的诱导条件下分化为成熟脂肪细胞,同时将其移植入小鼠的体内后也可以进行单一分化,能模拟活体脂肪组织,因此3T3-L1成纤维细胞系一直是最广泛用来进行相关体外研究的细胞系之一[1,2]。经典的3T3-L1前脂肪...
【文章来源】：湖北中医药大学湖北省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
经典激素“鸡尾酒“诱导分化3T3L1细胞示意图
不同葡萄糖浓度对3T3-L1细胞成脂肪分化的影响
湖北中医药大学2020届硕士学位论文143.2不同诱导剂的作用时间对小鼠3T3L1前脂肪细胞成脂分化率的影响经典“鸡尾酒”方法创立以来，很多学者对条件进行了改良，但很多方法改良后运用到不同实验室后都未能显示相同的效果，如有学者将诱导液Ⅰ处理时间延长到72小时，诱导分化率达到了90%以上[35]，但是在本实验条件下尝试后，延长到72小时的效果不如原先的48小时，特别是在36h后观察细胞发现卷边死亡情况。因此旨在研究诱导液Ⅱ对细胞诱导率的影响，染色结果显示：A组:（2DAY）、B组：（3DAY）、C组：（4DAY）相对于对照组都有载脂的脂肪细胞形成，而B组视野内的阳性细胞明显多于A组和C组，脂滴密度也相对较高，而延长时间到4天显然没有得到比2天更高的分化率(图3)，细胞计数结果为：A组:2DAY(59.2%±2.2%)、B组：3DAY(86.2%±1.9%)、C组：4DAY(60.2%±3.3%)、D组(0%)，可以看出使用低糖诱导，各组的分化率都提高，而B组增加诱导剂Ⅱ作用时间到3天，显著提高了视野中阳性细胞所占比例。（*P<0.05）图3诱导剂Ⅱ作用时间对3T3-L1细胞成脂肪分化的影响Figure2Resultsofdifferenttimepointsduringadipogenicdifferentiationof3T3-L1cells
【参考文献】：
期刊论文
[1]MIRE: A GRAPHICAL R PACKAGE FOR MICRORNARELATED ANALYSIS[J]. Xing-qi Yan1, Kang Tu2,3, Lu Xie3, Yi-xue Li2,3, Bin Yin1, Yan-hua Gong1, Jian-gang Yuan1, Bo-qin Qiang1, and Xiao-zhong Peng1 1National Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing 100005 2Bioinformatics Center, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031 3Shanghai Center for Bioinformation Technology, Shanghai 200235. Chinese Medical Sciences Journal. 2008(04)
本文编号：3623167
【文章来源】：湖北中医药大学湖北省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
经典激素“鸡尾酒“诱导分化3T3L1细胞示意图
不同葡萄糖浓度对3T3-L1细胞成脂肪分化的影响
湖北中医药大学2020届硕士学位论文143.2不同诱导剂的作用时间对小鼠3T3L1前脂肪细胞成脂分化率的影响经典“鸡尾酒”方法创立以来，很多学者对条件进行了改良，但很多方法改良后运用到不同实验室后都未能显示相同的效果，如有学者将诱导液Ⅰ处理时间延长到72小时，诱导分化率达到了90%以上[35]，但是在本实验条件下尝试后，延长到72小时的效果不如原先的48小时，特别是在36h后观察细胞发现卷边死亡情况。因此旨在研究诱导液Ⅱ对细胞诱导率的影响，染色结果显示：A组:（2DAY）、B组：（3DAY）、C组：（4DAY）相对于对照组都有载脂的脂肪细胞形成，而B组视野内的阳性细胞明显多于A组和C组，脂滴密度也相对较高，而延长时间到4天显然没有得到比2天更高的分化率(图3)，细胞计数结果为：A组:2DAY(59.2%±2.2%)、B组：3DAY(86.2%±1.9%)、C组：4DAY(60.2%±3.3%)、D组(0%)，可以看出使用低糖诱导，各组的分化率都提高，而B组增加诱导剂Ⅱ作用时间到3天，显著提高了视野中阳性细胞所占比例。（*P<0.05）图3诱导剂Ⅱ作用时间对3T3-L1细胞成脂肪分化的影响Figure2Resultsofdifferenttimepointsduringadipogenicdifferentiationof3T3-L1cells
【参考文献】：
期刊论文
[1]MIRE: A GRAPHICAL R PACKAGE FOR MICRORNARELATED ANALYSIS[J]. Xing-qi Yan1, Kang Tu2,3, Lu Xie3, Yi-xue Li2,3, Bin Yin1, Yan-hua Gong1, Jian-gang Yuan1, Bo-qin Qiang1, and Xiao-zhong Peng1 1National Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing 100005 2Bioinformatics Center, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031 3Shanghai Center for Bioinformation Technology, Shanghai 200235. Chinese Medical Sciences Journal. 2008(04)
本文编号：3623167
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