骨质疏松病理微环境对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

发布时间：2022-02-22 18:56

　　目的探讨骨质疏松骨髓病理微环境对骨髓间充质干细胞（MSCs）生物学特性的影响。方法通过皮下注射过量地塞米松（Dex）建立激素型骨质疏松动物模型,并分离正常小鼠MSCs进行体外培养。分别收集小鼠骨质疏松模型组（OP组）及对照组（NC组）骨髓液,处理正常培养MSCs。细胞增殖能力以CCK-8实验检测;细胞凋亡水平通过脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测;细胞迁移能力通过划痕实验及transwell实验检测;成骨细胞及脂肪细胞分化情况分别以茜素红染色及油红O染色鉴定;以实时荧光定量PCR（Realtime PCR）检测成骨细胞特异性基因(Osterix（Osx）、Ⅰ型胶原（Colla1）及脂肪细胞特异性基因（aP2、Glut4）的表达;Western blot检测成骨细胞转录因子（Osx、Runx2）及脂肪细胞转录因子（C/EBPα、 PPARγ）的蛋白水平。结果 Dex连续注射5周后小鼠出现明显骨丢失表型。OP组骨髓液处理下MSCs增殖能力明显下降,而凋亡细胞数量随处理时间的增加而增加。迁移能力明显下降,迁移细胞数显著减少（P<0.05）。此外OP组骨髓液显著降... 

【文章来源】：遵义医科大学学报. 2020,43(01)

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物及材料
    1.2 方法
        1.2.1 动物模型建立
        1.2.2 骨质疏松骨髓液收集
        1.2.3 MSCs体外培养及分化
        1.2.4 细胞增殖检测
        1.2.5 细胞凋亡检测
        1.2.6 细胞划痕实验
        1.2.7 Transwell实验
        1.2.8 细胞分化诱导
        1.2.9 实时荧光定量PCR(Realtime PCR)
        1.2.10 Western blot
        1.2.11 茜素红染色
        1.2.12 油红O染色
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 骨质疏松病理骨髓液抑制MSCs增殖
    2.2 骨质疏松病理骨髓液促进MSCs凋亡
    2.3 骨质疏松病理骨髓液抑制MSCs迁移
    2.4 骨质疏松病理骨髓液抑制MSCs成骨分化
    2.5 骨质疏松病理骨髓液促进MSCs成脂分化
    2.6 骨质疏松病理骨髓液影响MSCs分化相关转录因子的表达
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]调节骨髓间充质干细胞的微环境因素研究进展[J]. 陈雪,邓子翔,牛云飞.  实用骨科杂志. 2018(08)
[2]骨质疏松骨髓微环境的影像研究进展[J]. 吴兴,汤光宇.  国际医学放射学杂志. 2016(04)
[3]骨髓造血干细胞微环境[J]. 唐红梅,马静,韩代书.  细胞生物学杂志. 2008(03)

硕士论文
[1]CKIP-1调控骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化能力的研究[D]. 龙燕鸣.广西医科大学 2019



本文编号：3640037