关节炎中识别Ⅺ型和Ⅱ型胶原共同表位的致病性抗体

发布时间：2022-04-23 15:28

　　背景:类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）困扰着0.5-1%的世界人口,是影响最为广泛的自身免疫性疾病之一。RA以关节肿胀、红斑、疼痛、以及软骨和骨结构的破坏及损失为特征。关节软骨蛋白,如胶原蛋白等,被认为是潜在的RA自身抗原。Ⅺ型胶原（Collagen Ⅹ,CXI）是软骨中含量较少的蛋白,由三条不同的α链组成[α1（XI）,α2（XI）,α3（Ⅺ）],是具有三螺旋结构的异三聚体。其中α3（Ⅺ）链与Ⅱ型胶原（CollagenⅡ,CII）的α（Ⅱ）链由同一个基因编码,两者具有相同的氨基酸序列,但α3（XI）链具有更复杂的糖基化修饰。与CXI结构类似的CII是软骨中的主要成分,是由三条相同的α链形成三螺旋结构[α1（Ⅱ）]。在正常情况下,CXI、CII和Ⅸ型胶原（Collagen Ⅸ,CIX）共同组成细胶原纤维,且CXI是隐藏在细胶原纤维内部的。我们已知CII具有一个重要的T细胞表位,而CXI含有一条与CII相同的0α链,由此我们可以推测CXI也同样存在该T细胞表位,由于抗体一般倾向于识别具有某种空间构象的表位,CXI是否与CII具有相同的B细胞表位不得而知。方... 

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【学位级别】：博士

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摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 免疫与自身免疫性疾病
    1.2 类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)
    1.3 RA研究中常用的动物模型
    1.4 研究课题背景
第二章 实验材料
    2.1 主要实验仪器和耗材
    2.2 主要试剂
第三章 实验方法及步骤
    3.1 实验动物
    3.2 胶原的纯化
    3.3 肽段的设计和合成
    3.4 T细胞回忆实验
    3.5 生产CⅪ特异性单克隆抗体
    3.6 抗体纯化与检测
    3.7 酶联免疫吸附试验(ELISA)
    3.8 Western Blot
    3.9 磁珠介导的多重免疫分析(Luminex)
    3.10 患者队列
    3.11 关节炎的诱导(胶原诱导的关节炎、姥鲛烷诱导的关节炎和胶原抗体诱导的关节炎)
    3.12 免疫组织化学分析
    3.13 统计分析
第四章 实验结果
    4.1 小鼠关节炎模型的血清CⅡ和CⅪ抗体反应
    4.2 CⅪ含有与CⅡ一致的T细胞糖基化表位(第264位氨基酸糖基化)
    4.3 生产和鉴定抗-CⅪ单克隆抗体
    4.4 D3特异性抗体L10D9能够结合软骨,而CⅪ特异性抗体不能与软骨结合,或只显示微弱的结合反应
    4.5 L10D9能诱导和加重小鼠急性关节炎症,而CⅪ特异性抗体则不具备该能力
    4.6 RA患者和关节炎动物模型的血清D3表位抗体反应
第五章 讨论
参考文献
英文缩略词表
博士期间取得的成果
致谢



本文编号：3647461