不同碘营养状态对甲状腺细胞P38/MAPK通路介导的炎症反应的作用及机制

发布时间：2022-07-08 13:57

　　目的从细胞水平探讨不同碘营养状态对人正常甲状腺细胞P38/MAPK通路介导的炎症反应的作用及在这一过程中内质网应激所起的作用。方法体外培养人正常甲状腺细胞株（Nthy-ori-3-1）,取对数生长期的细胞,培养于六孔板中,待细胞相互接触,融合度达100%时,以此做为实验研究对象,进行不同浓度的碘化钾及内质网应激抑制剂（4-PBA）、P38/MAPK通路阻断剂（SB203580）干预,运用Western-blot测定干预后p-P38、PEKR、IRE1、ATF6蛋白的表达水平,运用Real Time PCR检测细胞中MCP-1 mRNA的表达水平。结果1.（1）相对于适碘状态,不良碘营养状态（高碘、低碘、碘波动状态）p-P38蛋白、MCP-1 mRNA的表达量均显著升高（P<0.05）;（2）高碘状态相对低碘状态,p-P38蛋白、MCP-1 mRNA的表达显著升高（P<0.05）;（3）高碘状态与碘波动状态、低碘状态与碘波动状态之间p-P38蛋白、MCP-1 mRNA的表达无显著区别（P>0.05）;（4）内质网应激相关蛋白（PERK、IER1、ATF6）的表达量在各组... 

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【学位级别】：硕士

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前言
实验一：不同碘营养状态对甲状腺细胞P38/MAPK通路介导的炎症反应的作用
    1 材料
        1.1 主要实验仪器
        1.2 主要实验材料、试剂及配制
    2 方法
        2.1 人正常甲状腺细胞株培养
        2.2 实验分组
        2.3 蛋白提取
        2.4 Western-blot检测细胞中PERK、IRE1、ATF6、p-P38蛋白的表达量
        2.5 RNA提取
        2.6 Real TimePCR检测细胞中MCP-1mRNA的表达量
        2.7 统计学分析
    3 结果
        3.1 各分组p-P38蛋白及MCP-1mRNA表达量的比较
        3.2 各分组内质网相关蛋白表达量的比较
    4 讨论
实验二：内质网应激对不良碘营养状态介导炎症反应的作用
    1 材料
        1.1 4-PBA(内质网应激抑制剂)的配制
        1.2 实验仪器、实验材料、其它试剂及配制
    2 方法
        2.1 实验分组
        2.2 其他实验方法
        2.3 统计学分析
    3 结果
        3.1 各分组内质网应激相关蛋白表达量的比较
        3.2 各分组p-P38蛋白及MCP-1mRNA表达量的比较
    4 讨论
实验三：P38/MAPK通路介导的炎症反应对内质网应激的作用
    1 材料
        1.1 干预液配制
        1.2 实验仪器、实验材料、其它试剂及配制
    2 方法
        2.1 实验分组
        2.2 其他实验方法
        2.3 统计学分析
    3 结果
        3.1 各分组p-P38蛋白及MCP-1mRNA表达量的比较
        3.2 各分组内质网应激相关蛋白表达量的比较
    4 讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]细胞因子IFN-γ、IL-6、IL-17和TGF-β1在Graves病发病中的作用[J]. 李红林,高美华,郑云会,杨士军,刘艳秋,陆卫平.  中国免疫学杂志. 2015(02)
[2]Graves病患者血清25（OH）D水平及其与甲状腺激素和自身抗体的相关性[J]. 韩英,程耀科,陈玉娟,李咏梅,江雁琼,张少峰.  中国临床研究. 2013(07)
[3]细胞凋亡与自身免疫性甲状腺病的关系研究进展[J]. 韦华,王民登.  右江医学. 2006(03)
[4]细胞内炎症信号通路交汇作用研究进展[J]. 刘辉,姚咏明.  感染.炎症.修复. 2003(04)



本文编号：3657152