PI3K在P2Y受体调控的AC/cAMP/Epac/Kv通道信号通路中的作用及对胰岛素分泌的影响

发布时间：2022-08-08 11:25

　　目的:在胰岛β细胞中,P2Y嘌呤受体（P2YR）的激活可以产生葡萄糖依赖性的促胰岛素分泌作用,我们课题组之前的研究发现P2YR调控的胰岛素分泌是通过AC/c AMP/Epac/Kv通道信号途径实现的,本实验通过全细胞膜片钳记录技术和检测胰岛素分泌量的实验来证明3-磷酸肌醇激酶（PI3K）参与了P2YR/AC/c AMP/Epac/Kv通道信号途径,从而进一步完善了P2YR调控胰岛素分泌的机制。方法:（1）大鼠断头处死后,用75%的酒精消毒腹部皮肤,将腹部剖开,在胆管上剪个小口,向胰腺内注入已准备好的胶原酶P,然后将胰腺组织剥离下来,放入38℃恒温水浴中让其消化11分钟后,终止消化,在1200转每分钟的条件下离心3分钟,弃去上清,再加10ml的1077分离液,在3200转每分钟的条件下离心23分钟,在体式镜下挑取质量比较好的胰岛（淡白色、透光率小、质感强、直径在100-300um间）。将分离得到的胰岛用DispaseⅡ消化成胰岛细胞,所得胰岛和细胞一般可在一周内使用。（2）分别用不同药物干预胰岛β细胞,用膜片钳技术检测各组药物对胰岛β细胞电压依赖性钾通道（Kv）的影响。（3）将分得的胰岛... 

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

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前言
1 材料与方法
    1.1 药品与试剂
    1.2 溶液的配制
    1.3 主要实验仪器
    1.4 动物
    1.5 大鼠胰岛的分离纯化与培养
    1.6 大鼠胰岛β细胞的分离与培养
    1.7 检测胰岛素分泌实验
    1.8 膜片钳实验
    1.9 数据统计处理
2 结果
    2.1 大鼠胰岛和β细胞的分离及培养
    2.2 cAMP/Epac参与了P2Y受体对Kv通道的抑制作用
    2.3 P2Y受体对Kv通道的作用依赖于PI3K途径
    2.4 PI3K是联系Epac和Kv通道之间的一个起关键作用的分子
    2.5 PI3K参与了P2Y受体调控的胰岛素分泌
3 讨论
4 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
在学期间承担/参与的科研课题与研究成果
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂LY29400联合吲哚-3-甲醇对人甲状腺未分化癌细胞FRO增殖的抑制作用[J]. 王文斌,刘杨,黄明,陈大平,任平.  中国药房. 2015(22)
[2]吲哚三甲醇的研究进展[J]. 孙超,贾玉萍,袁栋栋.  海峡药学. 2014(07)
[3]胰岛素通过PI3K/Akt和MEK/ERK信号通路增强大鼠骨骼肌成肌细胞的增殖[J]. 于欢,张敏,赵勇,吴萍,陈培良,李卫东.  生理学报. 2013(01)
[4]糖尿病易感基因的研究进展[J]. 汪艳,李会芳,宋滇平.  中华临床医师杂志(电子版). 2012(23)
[5]糖尿病的认识[J]. 魏玉秀.  中国社区医师(医学专业). 2012(23)
[6]Ⅱ型糖尿病的研究进展[J]. 张艳,李永哲.  吉林化工学院学报. 2012(05)
[7]BAFF/BAFF-R通过PI3K/Akt/mTOR信号转导通路调节B淋巴细胞功能在类风湿关节炎发病机制中的意义[J]. 张玲玲,魏伟.  中国药理学通报. 2010(07)
[8]糖尿病的发病机制以及治疗[J]. 张蕾.  中国民族民间医药. 2010(10)
[9]糖尿病治疗药物-胰岛素研究进展[J]. 饶建华,陈廷胜,禹腾波.  中国实用医药. 2009(29)
[10]PI3K通路及其抑制剂抗肿瘤的研究进展[J]. 丘雅维,杨惠玲.  中山大学学报(医学科学版). 2009(S3)

硕士论文
[1]2型糖尿病患者住院费用构成及其相关因素研究[D]. 荆文华.山东大学 2014



本文编号：3671420